多效调控蛋白CcpA及其在提升菌株发酵性能中的用途制造技术

本发明专利技术涉及多效调控蛋白CcpA及其在提升菌株发酵性能中的用途。具体而言，本发明专利技术涉及一种表达载体，用于表达产溶剂梭菌的CcpA蛋白，包括所述产溶剂梭菌CcpA蛋白的编码序列和与所述编码序列操作性连接的启动子。本发明专利技术还包括包含本发明专利技术表达载体的宿主细胞，尤其是产溶剂梭菌。还涉及提高产溶剂梭菌生产丙酮、丁醇和/或乙醇的能力的方法，制备具有提高的糖利用能力和/或酸回用产溶剂能力的产溶剂梭菌的方法，以及CcpA蛋白、其编码序列或其表达载体在提升产溶剂梭菌发酵性能尤其是糖利用能力和/或酸回用产溶剂能力中的用途。

Pleiotropic regulatory protein CcpA and its use in the fermentation performance of a raised strain

The present invention relates to a pleiotropic regulatory protein CcpA and its use in the fermentation performance of a raised strain. Specifically, the invention relates to an expression vector for expression of solventogenic Clostridium CcpA protein encoding sequences, including the solventogenic Clostridium CcpA protein and the encoding sequence operably linked to the promoter. The present invention also includes host cells comprising the expression vector of the present invention, in particular Clostridium perfringens. Also relates to a method for improving the ability of solventogenic clostridia production of acetone and butanol and / or ethanol, preparation of sugar utilization ability and / or solventogenic ability of solventogenic clostridia to improve the method of acid, and CcpA protein and its encoding sequence or its expression vector in the fermentation performance of solventogenic bacteria especially the shuttle sugar utilization ability and / or to use acid in solvent production capacity.

【技术实现步骤摘要】
多效调控蛋白CcpA及其在提升菌株发酵性能中的用途
本专利技术涉及多效调控蛋白CcpA及其在提升菌株发酵性能中的用途。
技术介绍
产溶剂梭菌(Solventogenicclostridia)是一种可以利用多种碳源合成各类化学品的革兰氏阳性厌氧菌。其中，丙酮丁醇梭菌(C.acetobutylicum)和拜氏梭菌(C.beijerinckii)作为典型的产溶剂梭菌受到研究者的广泛关注〔Wang，Y.，etal.，Single-nucleotideresolutionanalysisofthetranscriptomestructureofClostridiumbeijerinckiiNCIMB8052usingRNA-Seq.BMCGenomics，2011.12：p.479；Ren，C.，etal.，IdentificationandinactivationofpleiotropicregulatorCcpAtoeliminateglucoserepressionofxyloseutilizationinClostridiumacetobutylicum.MetabEng，2010.1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种表达载体，用于表达产溶剂梭菌的CcpA蛋白，包括所述产溶剂梭菌CcpA蛋白的编码序列和与所述编码序列操作性连接的启动子。

【技术特征摘要】
1.一种表达载体，用于表达产溶剂梭菌的CcpA蛋白，包括所述产溶剂梭菌CcpA蛋白的编码序列和与所述编码序列操作性连接的启动子。2.如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述产溶剂梭菌选自丙酮丁醇梭菌、拜氏梭菌和扬氏梭菌；和/或所述启动子选自thl启动子和ptb启动子。3.如权利要求1或2所述的表达载体，其特征在于，所述CcpA蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO:2、6或10所示；和/或所述CcpA蛋白的编码序列如SEQIDNO:1、5或8所示；和/或所述启动子序列如SEQIDNO:3或7所示。4.如权利要求1－4中任一项所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体具有SEQIDNO:4、8或11所示的核苷酸序列。5.一种宿主细胞，包含权利要求1－4中任一项所述的表达载体；优选地，所述宿主细胞为产溶剂梭菌，优选选自丙酮丁醇梭菌、拜氏梭菌和扬氏梭菌。6.如权利要求5所述的产溶剂梭菌，其特征在于，在相同发酵条件下，与未转入CcpA蛋白的表达载体的对照相比，发酵结束时，所述产溶剂梭菌具有以下一个、任意多个或全部特征：(1)生物量提高至少10％，如至少15％、至少20％；(2)葡萄糖利用率提高至少5％，如至少8％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾阳，杨云鹏，李宁，柴常升，杨晟，姜卫红，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，
类型：发明
国别省市：上海,31