一株裂殖壶菌菌株、其构建方法及应用技术

技术编号:15818175 阅读:153 留言:0更新日期:2017-07-15 01:21
本发明专利技术公开了一株裂殖壶菌菌株、其构建方法及应用,本发明专利技术的菌株其分类命名为裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)HX‑RS,保藏编号CCTCC NO:M2017046。所述菌株采用来自希瓦氏菌PKS酶中的酰基转移酶功能域替换裂殖壶菌PKS酶中的酰基转移酶功能域,并通过平板筛选、高转速低温驯化筛选获得,本发明专利技术的菌株可联产DHA和EPA,该菌株培养发酵的EPA和DHA的含量分别达到4.68%和51.3%,分别比原始菌株分别提高了69.9%和14.3%,发酵生产效率高且成本较低。

A bacterium strain for cracking down on fungi, construction method and application thereof

The present invention discloses a strain Schizochytrium strain, construction method and application thereof, the strain of the invention is classified and named Schizochytrium (Schizochytrium sp.) HX RS, accession number CCTCC NO:M2017046. The replacement of domain splitting acyltransferase strain Schizochytrium sp. PKS enzyme in the acyltransferase function domain from Shewanella PKS enzyme, and by plate screening and high speed low temperature acclimation and screening, the strain of the invention can be combined DHA and EPA, the content of EPA and DHA strains fermentation reached 4.68% and 51.3% respectively, compared to the original strain were increased by 69.9% and 14.3%, the fermentation of high production efficiency and low cost.

【技术实现步骤摘要】
一株裂殖壶菌菌株、其构建方法及应用
本专利技术属于生物化工领域,具体涉及利用微生物产油脂的方法,特别涉及一株可发酵共产DHA、EPA的裂殖壶菌菌株。
技术介绍
EPA和DHA是对人类生长和发育非常重要的omega-3长链多不饱和脂肪酸,具有降血脂和提高智力等功效,同时它们还可以用于预防和治疗一些疾病,例如高血压、动脉硬化、心血管疾病、老年痴呆、抗炎、抗癌等。这些脂肪酸能通过激活核过氧化物酶体增殖活化受体(PPARs)来降低血清中甘油三酯的水平,以此来调节油脂在许多组织中的运输、储存和代谢。人体很难通过自身合成来满足机体对EPA和DHA的需求,需要从食物中摄取。目前,主要从深海鱼类中获得所需的EPA和DHA,但是鱼油的可持续供应受地域和气候,还有鱼类疾病及对鱼类过度捕捞的影响,鱼油的产量和质量不稳定。其次,海洋污染日益严重,鱼类体内污染物质残留严重,如甲基水银等,纯化工艺复杂,成本高。鱼油存在特有的腥味、易于氧化且杂质较多,难以满足食品添加剂行业的需求。因此,寻找一种新的EPA和DHA来源已经成为单细胞油脂的研究焦点。目前常用的DHA生产菌为裂殖壶菌,EPA生产菌分别为Shewanel本文档来自技高网...
一株裂殖壶菌菌株、其构建方法及应用

【技术保护点】
一株裂殖壶菌菌株,其特征在于,其分类命名为裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)HX‑RS,保藏编号为CCTCC NO:M2017046。

【技术特征摘要】
1.一株裂殖壶菌菌株,其特征在于,其分类命名为裂殖壶菌(Schizochytriumsp.)HX-RS,保藏编号为CCTCCNO:M2017046。2.权利要求1所述菌株的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)以裂殖壶菌(Schizochytriumsp.)HX-308为原始菌株,敲除原始菌株基因组中的酰基转移酶域(AT),并引入外源菌株的酰基转移酶域(AT),构建重组菌株;所述外源菌株为希瓦氏菌(Shewanellasp.)SCRC-2738;(2)将步骤(1)构建的重组菌株在含有博莱霉素抗性的平板上进行筛选,将筛选的重组菌转接入摇瓶,转速180-250rpm,温度18-25℃下驯化,筛选出生长速度快,不饱和脂肪酸含量高的菌株。3.根据权利要求2所述的构建方法,其特征在于,所述步骤(1)中,敲除原始菌株基因组中的酰基转移酶域(AT)的方法为,以酰基转移酶域(AT)上下游区域作为同源重组片段,以博莱霉素抗性基因表达框作为筛选标志,对...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄和任路静陈胜兰耿灵君纪晓俊胡学超
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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