一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法技术

本发明专利技术设计一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法，采用六偏磷酸钠对魔芋精粉的主要成分魔芋葡甘露聚糖进行酯化改性，合成酯化魔芋葡甘露聚糖，并对制备的酯化魔芋葡甘露聚糖进行表征，从而推断其化学结构；本发明专利技术进一步将合成的酯化魔芋葡甘露聚糖作为饲料霉菌毒素吸附剂，对常见的霉菌毒素进行吸附研究。与现有技术相比，本发明专利技术制备方法简单，便于操作，可以应用于规模化生产，具有良好的社会经济效益；将酯化的魔芋葡甘露聚糖用于饲料霉菌毒素吸附剂，其吸附效果明显优于目前常用的吸附剂霉可吸，这对植物源酯化葡甘露聚糖在饲料添加剂中的应用具有非常重要的意义。

Preparation method of feed mildew toxin adsorbent

Preparation method of feed mycotoxin adsorbent of the invention design, using six sodium hexametaphosphate of konjac powder is the main component of konjac glucomannan was modified, esterification synthesis of konjac glucomannan, and characterized the preparation of esterified konjac glucomannan, and its chemical structure is inferred from the invention; the synthesis of esterified Konjac Glucomannan as feed mycotoxin adsorbent, the adsorption of common mycotoxins. Compared with the prior art, the invention has simple preparation method, easy to operate, can be applied to large-scale production, has good economic and social benefits; the esterification of konjac glucomannan for feed mycotoxin adsorbent, the adsorption effect is better than the commonly used adsorbent by suction, it is very important to the the application of plant source of esterified glucomannan in feed additive.

【技术实现步骤摘要】
一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法
本专利技术涉及饲料添加剂领域，尤其涉及一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法。
技术介绍
霉菌毒素中毒能引起动物生长发育迟缓，免疫力下降，器官机能障碍；导致人畜急慢性中毒死亡；此外，霉菌毒素对动物有致畸、致癌、致突变的影响，对养殖业和人类健康造成了巨大威胁，因此霉菌毒素的脱毒势在必行。目前，酯化葡甘露聚糖作为霉菌毒素吸附剂的应用越来越广泛，市场上使用的酯化葡甘露聚糖是从酵母培养物细胞壁中提取的甘露聚糖基础上，经酯化改性合成的霉菌毒素吸附剂-霉可吸，因其安全无毒，吸附霉菌毒素能力强，吸附范围广，因此是一种广泛应用的霉菌毒素解毒剂；魔芋葡甘聚糖主要来源于草本植物魔芋的提取物，属于水溶性离子型天然聚多糖，对高血压、糖尿病、肥胖症、便秘等有很好的预防和治疗作用，并有一定的抗癌效果，因而被广泛应用于食品、医药、化工、纺织、环保、高分子材料等领域，但是将来源于魔芋的葡甘露聚糖进行酯化并作为饲料霉菌毒素吸附剂方面应用的还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种饲料霉菌毒素吸附剂-酯化魔芋葡甘露聚糖的制备方法，利用植物源葡甘露聚糖制备酯化魔芋葡甘露聚糖，并研究该酯化魔芋葡甘露聚糖对多种饲料霉菌毒素的吸附能力；本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：本专利技术提供一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法，应用六偏磷酸钠对魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖进行酯化改性合成酯化魔芋葡甘露聚糖，具体步骤如下：A）不同六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响将1g六偏磷酸钠溶于等质量的蒸馏水中，分别按照六偏磷酸钠与魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:6、1:6.5、1:7、1:7.5、1:8称取魔芋葡甘露聚糖加入六偏磷酸钠溶液中，充分搅拌混匀，每组设置三个重复。在不同温度、不同pH和不同反应时间条件下反应。反应完成后，产物用60%乙醇洗涤3遍，后用无水乙醇洗涤脱水一遍。60℃干燥24h后用星式球磨仪磨碎，用钼黄比色法检测产物中磷的含量；B）不同pH值对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7，用盐酸调整各组pH值至2.0、2.5、3.0、3.5、4.0；C）不同反应温度对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7，用盐酸调pH值为3.0，反应温度为50、55、60、65、70、80℃；D）不同反应时间对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7。用盐酸调pH值为3.0，于60℃分别反应60、80、100、120、140min；E）正交试验选择A）-D）法每个单因素水平试验适宜参数附近的三个水平，进行四因素三水平正交试验L9(34)，按此条件制备的酯化魔芋葡甘露聚糖经60%乙醇洗涤3遍，用无水乙醇洗涤脱水一遍后，60℃干燥24h，用星式球磨仪磨碎，用钼黄比色法检测产物中磷的含量；F）酯化魔芋葡甘露聚糖最佳洗涤次数的确定将按照E）正交试验得到的最佳合成条件制备酯化魔芋葡甘露聚糖，与60%的乙醇的质量比为1:5加入60%的乙醇洗涤产物，用钼黄比色法检测洗涤液中磷的含量；根据本方法的优选实施方式，六偏磷酸钠酯化合成酯化魔芋葡甘露聚糖的条件是六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖质量比1:6.5、pH值3.0、反应温度75℃、反应时间130min，洗涤7次；本专利技术的另一目的是对利用六偏磷酸钠法制备的酯化魔芋葡甘露聚糖进行表征，推断其化学结构，结果如下：采用凝胶色谱法对酯化魔芋葡甘露聚糖分子量做了相关研究，结果表明：酯化魔芋葡甘露聚糖分子量为1.78×106；采用PMP柱前衍生化HPLC法分析酯化魔芋葡甘露聚糖单糖组分，结果表明：D-甘露糖:D-葡萄糖为1.91:1；采用红外光谱法和固体NMR法研究酯化魔芋葡甘露聚糖，结果表明：在酯化魔芋葡甘露聚糖的C6、C3、C2位都发生了酯化反应，结合上了PO3-和（PO3-）6，结合程度C6>C3>C2；本专利技术的有益效果是：将来源于魔芋的葡甘露聚糖制备成酯化魔芋葡甘露聚糖，其制作方法简单，便于操作，可以应用于规模化生产，具有良好的社会经济效益；酯化魔芋葡甘露聚糖吸附霉菌毒素的效果，优于目前常用的吸附剂霉可吸，这对植物源酯化魔芋葡甘露聚糖在饲料添加剂中的应用具有非常重要的意义；本专利技术提供一种酯化魔芋葡甘露聚糖的用途，将六偏磷酸钠法制备合成的酯化魔芋葡甘露聚糖用于饲料霉菌毒素添加剂，吸附黄曲霉毒素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和伏马菌素B1，技术方案如下：1）酯化魔芋葡甘露聚糖对黄曲霉毒素体外吸附能力的测定称取由六偏磷酸钠法制备合成的酯化魔芋葡甘露聚糖、霉可吸、魔芋葡甘露聚糖0.1g，溶于50mL浓度为1mg/L的黄曲霉毒素溶液中，并设50mL浓度为1mg/L的黄曲霉毒素溶液为对照组，充分混匀后，在温度为37℃，转速为300r/m的摇床中反应8h。反应结束后，各组3000r/m离心10min，取上清液稀释后，按照霉菌毒素酶联免疫试剂盒的说明检测黄曲霉毒素的含量；2）酯化魔芋葡甘露聚糖对呕吐毒素体外吸附能力的测定方法同1），对照组溶液是50mL浓度为1mg/L的呕吐毒素溶液；3）酯化魔芋葡甘露聚糖对玉米赤霉烯酮体外吸附能力的测定方法同1），对照组溶液是50mL浓度为1mg/L的玉米赤霉烯酮溶液；4）酯化魔芋葡甘露聚糖对伏马菌素B1体外吸附能力的测定方法同1），对照组溶液是50mL浓度为1mg/L的伏马菌素B1溶液；根据本专利技术的优选实施方式，六偏磷酸钠法制备合成的酯化魔芋葡甘露聚糖吸附霉菌毒素的效果优于霉可吸和魔芋葡甘露聚糖，是一种优良的霉菌毒素吸附剂；附图说明；图1酯化魔芋葡甘露聚糖的红外光谱图图2魔芋葡甘露聚糖的红外光谱图图3魔芋葡甘露聚糖和酯化魔芋葡甘露聚糖凝胶色谱图图4魔芋葡甘露聚糖和酯化魔芋葡甘露聚糖水解液HPLC图谱图5魔芋葡甘露聚糖和酯化魔芋葡甘露聚糖的CP/MAS13CNMR波谱图6魔芋葡甘露聚糖和酯化魔芋葡甘露聚糖的CP/MAS31PNMR波谱具体实施方式；通过下列实施例将能更好的理解本专利技术；实施例1：将六偏磷酸钠溶于等质量的蒸馏水中，按照六偏磷酸钠与魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:6.5称取魔芋葡甘露聚糖加入六偏磷酸钠溶液中，充分搅拌混匀，在pH值3.0，反应温度75℃的情况下反应130min后，产物用60%乙醇洗涤3遍，再用无水乙醇洗涤脱水一遍，60℃干燥24h后用星式球磨仪磨碎，然后与60%的乙醇的质量比为1:5加入60%的乙醇洗涤产物洗涤7次，制得酯化魔芋葡甘露聚糖；实施例2：对利用六偏磷酸钠法制备的酯化魔芋葡甘露聚糖进行表征，推断其化学结构。步骤如下：步骤一、IR图谱测试样品烘干，采用样品与溴化钾压片的方法，应用FT-TR光谱仪，在400~4000cm-1区间扫描，测得魔芋葡甘露聚糖和酯化魔芋葡甘露聚糖的红外光谱；步骤二、凝胶色谱条件WatersUltrahydrogelLinear水溶性凝胶色谱柱（300mm×7.8mm），流动相为水，流量为1mL/min，增益为1db，漂移管温度为80℃，喷雾器温度为30℃，氮气压力为30psi，进样量20μL。将葡聚糖加流动相配制成1mg/mL的标准溶液，然后经0.22本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法，其特征在于利用六偏磷酸钠对魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖进行改性合成酯化魔芋葡甘露聚糖，并将合成的酯化魔芋葡甘露聚糖作为饲料霉菌毒素吸附剂应用。

【技术特征摘要】
1.一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法，其特征在于利用六偏磷酸钠对魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖进行改性合成酯化魔芋葡甘露聚糖，并将合成的酯化魔芋葡甘露聚糖作为饲料霉菌毒素吸附剂应用。2.根据权利要求1所述的一种饲料霉菌毒素吸附剂的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：A）不同六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响分别按照六偏磷酸钠与魔芋精粉中的魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:6、1:6.5、1:7、1:7.5、1:8称取魔芋葡甘露聚糖加入水中，充分搅拌混匀，每组设置三个重复；在不同温度、不同pH和不同反应时间条件下反应；反应完成后，产物用60%乙醇洗涤3遍，后用无水乙醇洗涤脱水一遍，60℃干燥24h后用星式球磨仪磨碎，用钼黄比色法检测产物中磷的含量；B）不同pH值对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7，用盐酸调整各组pH值至2.0、2.5、3.0、3.5、4.0；C）不同反应温度对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7，用盐酸调pH值为3.0，反应温度为50、55、60、65、70、80℃；D）不同反应时间对酯化魔芋葡甘露聚糖合成的影响方法同A），六偏磷酸钠与魔芋葡甘露聚糖的质量比为1:7；用盐酸调pH值为3.0，于60℃分别反应60、80、100、120、140min；E）正交试验选择A）-D）法每个单因素水平试验适宜参数附近的三个水平，进行四...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱连勤，朱风华，陈甫，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37