经修饰的生物相关物质、其制备方法、及中间体技术

一种经修饰的生物相关物质，其中在分子中结合至少一个由以下化学式（１）表示的聚亚烷基二醇氧基：　　　　＊＊＊　　（１）　　　　式中，Ｒ是具有１至２４个碳原子的烃基，ＯＡ↑［１］和ＯＡ↑［２］为具有２至４个碳原子的氧化烯基，Ｒ和ＯＡ↑［２］在一个分子中是彼此相同或不同，ｎ和ｍ为加入的氧化烯基的摩尔平均数，ｎ表示０至１０００，以及ｍ表示１０至１０００。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及通过与聚亚烷基二醇衍生物结合而被修饰的生物相关物质、其制备方法、以及作为中间体的活性聚亚烷基二醇衍生物。
技术介绍
近来，已广泛研究了大量的具有生理活性的蛋白质、多肽、合成化合物、以及从自然资源提取的化合物，以及其在药品中的应用。然而，当向体内给药时，这些生理活性物质在血液内具有较短的半衰期，因此很难获得足够的药理效应。这是因为这些进入到体内的生理活性物质通常被肾中的肾小球过滤以及被肝和脾中的巨噬细胞摄取，而从体内被清除。因此，试图通过把这些生理活性物质封入在脂质体或聚合物微团中或通过用聚乙二醇(其是两亲聚合物)进行的化学修饰来增加其分子量从而改善在体内的状态。聚乙二醇由于空间排斥效应，表现出较低的与其他生物成分的相互作用，因此，用聚乙二醇修饰的蛋白质或酶等多肽，表现出以下效应避免通过肾中的肾小球的过滤以及生物反应如免疫反应，以致它们比那些未修饰物质在血液中获得更长的半衰期。此外，它们还具有降低的毒性和抗原性，并进一步增强具有高疏水性的难溶化合物的溶解性。至今，在用聚乙二醇修饰生理活性物质的情况下，尤其是在修饰低分子量药物或肽的情况下，出现这样的问题很少的活性官能团可以用于用聚乙二醇进行的修饰。此外，当为了获得用聚乙二醇修饰的足够效应而用许多聚乙二醇分子来修饰肽或药物时，肽或药物的活性部位则被阻断，因而可产生以下问题不能充分地表现出其自身的功能和功效并且在水中不可能获得足够的溶解度。为了解决这类问题，已试图利用支链聚乙二醇衍生物来减少用聚乙二醇修饰的数目。在特公昭61-42558号公报中披露了聚乙二醇修饰L-天冬酰胺酶。然而，作为活性聚乙二醇衍生物的原料的氰尿酰氯具有三个活性部位，因而很难在其中选择性地引入两个聚乙二醇链。因此，很难合成高纯度聚乙二醇修饰L-天冬酰胺酶。并且，在特开平10-67800号公报中披露了聚乙二醇修饰干扰素α。然而，此物质具有三个尿烷和酰胺键，包括干扰素α和聚乙二醇氧基之间的键合。这些键在贮藏期间或在碱性条件下的反应期间易于水解，因而产生以下问题支链聚乙二醇部分被分解成单链。这是因为，通过某种方法已产生作为中间体材料的聚乙二醇衍生物，其中两个单甲氧基聚乙二醇和赖氨酸的在α-位和ε-位氨基通过尿烷键结合，然后赖氨酸的羧基残基被转化成琥珀酰亚胺酯。此外，为了制备聚乙二醇修饰干扰素α，会产生以下问题由于经过两个单甲氧基聚乙二醇的末端羟基的活化作用、与赖氨酸的结合、赖氨酸的羧基残基的活化作用、以及与干扰素α的结合等多个步骤而产生的杂质多。因此，希望开发由高度稳定键形成的生物相关物质、其制备方法、以及可以以简便方式和高纯度制备并具有较高的稳定性的支链活性聚亚烷基二醇衍生物。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供具有支链聚亚烷基二醇氧基的生物相关物质，其由稳定键形成并很难分解为单链；以及其制备方法。本专利技术的第二个目的是提供具有反应基的聚亚烷基二醇衍生物，该反应基可以在甘油骨架1位的伯碳与生物相关物质结合，并在2位和3位具有聚亚烷基二醇链。由于为解决上述问题而进行广泛研究的结果，本专利技术者已发现一种新颖的具有支链聚亚烷基二醇氧基的生物相关物质、其制备方法、以及作为其中间体的聚亚烷基二醇衍生物，因而完成本专利技术。即，本专利技术涉及经修饰的生物相关物质，其中在分子中结合有至少一个聚亚烷基二醇氧基，其由以下化学式(1)表示 (式中，R是具有1至24个碳原子的烃基，OA1和OA2各自为具有2至4个碳原子的氧化烯基，在一个分子中R和OA2是彼此相同或不同，n和m各自为加入的氧化烯基的摩尔的平均数，n表示0至1000，以及m表示10至1000。)此外，本专利技术涉及用于经修饰的生物相关物质的中间体，其由以下的化学式(2)表示 (式中，R、OA1、OA2、n、以及m和上述相同，而X表示能够与生物相关物质起化学反应的官能团。)此外，本专利技术涉及制备经修饰的生物相关物质的方法，其中在分子中结合有至少一个由化学式(1)表示的聚亚烷基二醇氧基，包括上述中间体与生物相关物质结合的步骤。此外，本专利技术涉及作为化学式(2)的化合物的原料的化学式(p)的化合物以及其制备方法。本专利技术的经修饰的生物相关物质是通过稳定键形成并很难分解为单链。此外，本专利技术可以提供具有反应基的聚亚烷基二醇衍生物，该反应基可以在甘油骨架1位的伯碳与生物相关物质结合，并在2位和3位具有聚亚烷基二醇链。附图说明图1说明OVA和被修饰OVA的聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验结果。图2是说明在化合物p-8的加速老化试验之前GPC测量的结果的图。图3是说明在化合物p-8的加速老化试验之后GPC测量的结果的图。图4是说明在化合物p-10的加速老化试验之前GPC测量的结果的图。图5是说明在化合物p-10的加速老化试验之后GPC测量的结果的图。图6是通过用化合物(p31)修饰Humanin获得的化合物的电泳结果。图7是通过用化合物(p32)或(p35)修饰胰岛素获得的化合物的电泳结果。具体实施例方式本专利技术的经修饰的生物相关物质是将生物相关物质与至少一个由上述化学式(1)表示的聚亚烷基二醇氧基结合的物质。在化学式(1)的聚亚烷基二醇氧基中R是具有1至24个碳原子的烃基，而具体的烃基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、庚基、2-乙基己基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、油基、十九烷基、二十烷基、二十一烷基、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基、苄基、羟甲苯基、丁基苯基、以及十二烷基苯基，该烃基优选为具有1至10个碳原子的烃基，更为甲基或乙基，最优选为甲基。OA1和OA2各自表示具有2至4个碳原子的氧化烯基。具体地说，包括氧化乙烯基、氧化丙烯基、氧化亚丙基、氧-1-乙基乙烯基、氧-1，2-二甲基乙烯基、以及氧化四亚甲基等。这些氧化烯基彼此可以相同或不同，并以任意形状或块状加入。一般来说，碳原子越少，则亲水性越高，该基团优选为氧化乙烯基或氧化丙烯基，更优选为氧化乙烯基。m和n各自为加入的氧化烯基的摩尔平均数。m表示10至1000，优选20至800，更优选50至800，最优选100至800。n表示0至1000，优选0至500，更优选0至200，最优选0至50。在一个优选实施例中，n是0。在另一个优选实施例中，n是1至50。在后一种情况下，n特别优选为1至3。用聚亚烷基二醇氧基对生物相关物质的修饰数目并没有特定限制，但优选为1至100，更优选为1至20。本专利技术所说的“生物相关物质”是指与生物有关的物质。这些与生物有关的物质包括以下物质。(1)磷脂、糖脂、以及糖蛋白等动物细胞构成材料动物细胞构成材料是构成细胞膜等的成分，并不特别限制其种类，例如包括磷脂、糖脂、以及糖蛋白等。更具体的磷脂例如包括磷脂酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、心磷脂、磷脂酰丝氨酸、以及磷脂酰肌醇。此外，还包括其溶血甘油磷脂异构体。这些磷脂可以是那些衍生自天然物质的磷脂如蛋黄或大豆等，或可以是合成物。脂肪酸的成分并不特别限制但优选包括具有12至22个碳原子的脂肪酸。这些脂肪酸可以是饱和脂肪酸或可以是那些含有不饱和键的脂肪酸。更具体的糖脂例如包括神经酰胺、脑苷脂、鞘氨醇、神经节苷脂、以及甘油基糖脂等。此外，还包括脂肪本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：中本宪一郎，大桥俊辅，山本裕二，坂上研二，伊藤智佳，安河内徹，
申请(专利权)人：日油株式会社，
类型：发明
国别省市：