乙酰胺类化合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种乙酰胺类化合物及其用途。本发明专利技术公开了一类结构新颖的N‑(4‑取代苯乙基)酰胺类化合物。通过体外活性测试实验表明该类化合物对半胱氨酸蛋白酶(FP‑2)和二氢叶酸还原酶(DHFR)具有酶抑制活性，且经杀疟实验结果表明：该类化合物对野生、耐药疟原虫都具有抑制作用。

Acetamide compounds and uses thereof

The present invention relates to a acetamide compound and uses thereof. The invention discloses a novel structure of N (4 replaced Ben Yiji) amide compounds. Show that this kind of compounds on cysteine protease by in vitro activity test (FP 2) and dihydrofolate reductase (DHFR) enzyme inhibitory activity, and kill malaria by experimental results show that the compounds have inhibitory effect on wild and resistant plasmodium.

【技术实现步骤摘要】
乙酰胺类化合物及其用途
本专利技术涉及一种乙酰胺类化合物及其用途，具体地说，涉及一种N-(4-取代苯基)乙酰胺类化合物及其用途。
技术介绍
疟疾是世界上最严重的流行病之一。有100多个国家和地区的大约30亿人口受到疟疾的威胁，全球每年患疟疾的人有3.5～5亿，每年死于疟疾的患者为150～270万，其中约一半为儿童，90％的病例发生在非洲和亚洲的贫困国家。在我国流行疟区主要包括海南和云南等19个省市，自治区，约数百万人发病。虽然目前已存在有效的抗疟疾药物，但疟疾患者的死亡率逐年上升，主要原因是疟原虫对有限的抗疟药物很快适应，产生了严重的抗药性。疟疾防治在很大程度上还依赖于化学药物的预防和治疗。近70多年来，只有少数药物适用于临床，而抗药性疟原虫株日渐增多。随着生物化学、分子生物学和分子药理学等相关学科的不断发展，揭示了许多酶和受体在生物体内的生物化学过程中的作用，以在生物体内起关键性作用的酶，作为药物作用靶点进行新药设计已经成为新药研究开发的发展趋势。新型抗疟原虫药物的设计是以一种在疟原虫生命周期中起重要作用的半胱氨酸蛋白酶(falcipain)为靶点，推动这个发展过程的是人们对木瓜蛋白酶半胱氨酸蛋白酶这个药物靶标认识的不断深入。疟原虫通过消化红细胞，作为主要的氨基酸来源用于自身的蛋白质合成。已知在血红蛋白的降解过程中，有三种疟原虫蛋白酶起重要的作用。其中PlasmepainI和II属天门冬氨酸蛋白酶，falcipain属半胱氨酸蛋白酶。天门冬氨酸蛋白酶抑制剂主要作用于分瓣原虫和红细胞破裂；半胱氨酸蛋白酶抑制剂主要作用于原虫营养体，特异性地作用于疟原虫生命周期中红细胞降解的第一步，使疟原虫因缺少合成自身蛋白的自由氨基酸而死亡。而临床上广泛应用的抗疟药氯喹则通过抑制游离血红素的聚合，使疟原虫被游离原血红素释放的大量游离基杀死。显然半胱氨酸蛋白酶抑制剂杀死疟原虫的机制和氯喹不同。因此选择半胱氨酸蛋白酶作为抗疟新药研究的靶点，可望克服抗疟药物的耐药性问题。半胱氨酸蛋白酶是Mr约为21,000～30,000的蛋白质，在pH4～6.5时具有最高水解活性，它的活性部位具有半胱氨酸残基，原虫的半胱氨酸蛋白酶属于木瓜蛋白酶家族。已知的疟原虫半胱氨酸蛋白酶有四个亚型，falcipain-1，falcipain-2A，falcipain-2B和falcipain-3。Falcipain-1是第一个表达得到的疟原虫半胱氨酸蛋白酶，其生物学研究表明，它对疟原虫的无性生殖阶段并无影响，但能显著的影响卵囊的功能。falcipain-2A和falcipain-2B具有97％的同源性，氨基酸序列的7位有所不同。通过寡核苷酸探针的监测发现，falcipain-2BmRNA的表达水平比falcipain-2A低。然而falcipain-2A和falcipain-2B在疟原虫营养体晚期其表达的时间依赖性和峰值极为相似，这表明两种不同的亚型具有相似的生物学功能。falcipain-3与falcipain-2(FP-2)在催化域有66.6％的同源性，但是它们表达的阶段有所不同。falcipain-2在营养体阶段表达达到最高峰，而falcipain-3在更为成熟的疟原虫阶段表达达到高峰。falcipain-3的晶体结构还未见报道。在这几种亚型中falcipain-2的研究最多，因此其抑制剂的开发亦受到更为广泛的关注。除了对半胱氨酸蛋白酶falcipain-2有抑制作用，对二氢叶酸还原酶(dihydrofolatereductase，DHFR)也有抑制作用。二氢叶酸还原酶(DHFR)是核酸代谢中关键的酶之一，是癌症，抗疟，抗菌药物治疗中的主要靶酶，近年来得到广泛的研究。二氢叶酸还原酶抑制剂能选择性的与二氢叶酸还原酶结合，抑制其催化还原活性，使二氢叶酸不能顺利转变为四氢叶酸，而后者变成辅酶F后，可为胸腺嘧啶、嘌呤、丝氨酸、蛋氨酸等体内生物合成提供一碳单位。如果阻碍叶酸代谢过程，将干扰DNA和蛋白质的合成，最终导致细胞死亡。二氢叶酸还原酶(dihydrofolatereductase，DHFR)几乎存在于所有生物的细胞内，在药物研发领域已成为抗疟、抗癌、抗菌药物治疗中的主要靶酶之一，近年来因其广泛的生物活性倍受关注。因此，可通过抑制falcipain-2(FP-2)和DHFR来抑制疟原虫的生长、繁殖，筛选出强效的FP-2&DHFR双重抑制剂来治疗疟疾。
技术实现思路
本专利技术的专利技术人设计、并合成了一类N-(4-取代苯乙基)酰胺类化合物。通过体外活性测试表明：该类乙酰胺类化合物对半胱氨酸蛋白酶(falcipain-2，FP-2)和二氢叶酸还原酶(DihydrofolateReductase，DHFR)具有酶抑制活性。并且杀疟实验结果表明：该类乙酰胺类化合物对野生、耐药疟原虫都具有抑制作用。本专利技术一个目的在于，提供一种结构新颖的乙酰胺类化合物；本专利技术所述的乙酰胺类化合物，为式I所示化合物、或其在药学上可接受的盐：式I中：R1为式A或B所示基团：R2为由苯基取代的C1～C4的直链或支链烷基，C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基，或取代的C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基；其中，所述杂环基的杂原子为氮(N)、氧(O)或/和硫(S)，所述取代的C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基的取代基选自下列基团中一种或两种以上(含两种，下同)：C1～C4的直链或支链烷基，卤代的C1～C4的直链或支链烷基，C1～C4的直链或支链烷氧基，卤素(F、Cl、Br或I)，硝基(NO2)或n为1或2。本专利技术另一个目的在于，揭示上述乙酰胺类化合物一种用途。即：式I所示化合物、或其在药学上可接受的盐在制备半胱氨酸蛋白酶(FP-2)和二氢叶酸还原酶(DHFR)抑制剂中的应用；及式I所示化合物、或其在药学上可接受的盐在制备治疗疟疾(特别是由疟原虫引起的疟疾)的药物中的应用。本专利技术还有一个目的在于，提供一种制备式I所示化合物的方法。所述方法包括如下步骤：(1)由4-溴苯乙胺与羧酸(R2COOH)反应，制备式II所示化合物的步骤；(2)由式II所示化合物制备式III所示化合物的步骤；(3)由盐酸胍与2-氯-5-硝基苯甲腈反应，得到式IV所示化合物的步骤；(4)由式IV所示化合物经催化加氢反应，得到式V所示化合物的步骤；和，(5)由式III所示化合物与式V所示化合物反应，得到目标物(式I所示化合物)的步骤。其中，R2的定义与前文所述相同。附图说明图1.紫外检测法测试抑制二氢叶酸还原酶(DHFR)的活性数据的原理示意图；图2.为化合物IA-10和化合物IA-14对恶性疟原虫(3D7C8)生长抑制曲线(体外)；图3.化合物IA-10和化合物IA-14对氯喹抗性恶性疟原虫(Dd2)生长抑制曲线(体外)；图4.为化合物IA-10和化合物IA-14对恶性疟原虫(3D7C8)生长抑制曲线(体内)。具体实施方式在本专利技术一个优选技术方案中，R1为式A所示基团；R2为由苯基取代的C1～C4的直链或支链烷基，呋喃基，噻吩基，环己基，苯基，吡啶基，萘基，或取代的环己基或苯基；所述取代的环己基、苯基或芴基的取代基选自下列基团中一种或两种以上：C1～C4的直链或支链烷基，氟代的C1～C4的直链或支链烷基，C1～本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种乙酰胺类化合物，为式I所示化合物、或其在药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.一种乙酰胺类化合物，为式I所示化合物、或其在药学上可接受的盐：式I中：R1为式A或B所示基团：R2为由苯基取代的C1～C4的直链或支链烷基，C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基，或取代的C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基；其中，所述杂环基的杂原子为氮、氧或/和硫，所述取代的C4～C10的环烷基、杂环基或芳环基的取代基选自下列基团中一种或两种以上：C1～C4的直链或支链烷基，卤代的C1～C4的直链或支链烷基，C1～C4的直链或支链烷氧基，卤素，硝基或n为1或2。2.如权利要求1所述的乙酰胺类化合物，其特征在于，其中，R1为式A所示基团；R2为由苯基取代的C1～C4的直链或支链烷基，呋喃基，噻吩基，环己基，苯基，吡啶基，萘基，或取代的环己基或苯基；所述取代的环己基、苯基或芴基的取代基选自下列基团中一种或两种以上：C1～C4的直链或支链烷基，氟代的C1～C4的直链或支链烷基，C1～C4的直链或支链烷氧基，卤素，硝基或n为1或2。3.如权利要求2所述的乙酰胺类化合物，其特征在于，其中，R2为苄基，苯乙基，2-呋喃基，2-噻吩基，环己基，4-吡啶基，2-萘基，或取代的环己基或苯基；所述取代的环己基或苯基的取代基选自下列基团中一种或两种以上：甲氧基，叔丁基，三氟甲基，卤素，硝基，或n为1或2。4.如权利要求3所述的乙酰胺类化合物，其特征在于，其中R2为苄基，苯乙基，4-叔丁基环己基，2-氟-苯基，3-氟苯基，4-氟-苯基，3-甲氧基-苯基，4-甲氧基-苯基，4-硝基-苯基，4-三氟甲基-苯基，3,4-二甲氧基-苯基，3,5-二甲氧基-苯基，3-氯-4-甲氧基-苯基，5.如权利要求4所述的乙酰胺类化合物，其特征在于，所述乙酰胺类化合物为下列化合物中一种：N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-硝基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧芑-6-甲酰胺，N-(4-((((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)苯并[d][1,3]间二氧杂环戊烯-5-甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3,4-二甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2-氟苯甲酰胺，4-氯-N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-2-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3-氟苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-对甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-3-对甲氧基苯甲酰胺，3-氯-N-(4-(((2,4-二氨基喹唑啉-6-基)氨基)甲基)苯乙基)-4-对甲氧基苯甲酰胺，N-(4-(((2,4-...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱进，黄瑾，陈文华，姚雪，凌大正，王曼炯，蒋华良，李剑，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：上海,31