含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体及其合成方法技术

含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体及其合成方法，属于医药和化学合成技术领域。本发明专利技术具有右式结构，先量取肝癌靶向多肽：３－马来酰胺苯甲酸－Ｎ－琥珀酰亚胺酯ＭＢＳ偶联剂∶含胺基聚氧乙烯－二乙三胺五乙酸嵌段聚合物∶溶剂＝１∶０．１～０．２∶１．１～３．３∶２００～４０００重量比，然后加入反应器中，在－４℃～室温条件下反应２～７２小时，制得含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品；将该粗制品透析，冻干，得到黄色固体粉末为本发明专利技术的含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体。合成路线和产物提纯步骤简单；产率高；用它制备的造影剂能满足静脉注射；在体内停留时间长；易溶于水，可在体内降解毒性低；广泛应用于磁共振成像和血池的造影剂；具有生物活性和靶向性，有利于医疗诊断，且对肝癌检测效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体，本专利技术进一步涉及上述含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体的合成方法，属于医学科学和化学合成

技术介绍
在生命科学领域，靶向多肽及靶向药物是否对特殊器官或病变部位具有靶向性，基因治疗方法的早期安全性评估等方面都需要更科学的检测跟踪方法。由于磁共振成像进行检测跟踪可以无需杀死实验动物和长时间跟踪而被广泛采用。一方面具有靶向性、半衰期长、弛豫率高的造影剂可以使待检测器官成像清晰，对临床磁共振检测和病情的诊断有益而成为近年来的研究热点。另一方面，大多数多肽、蛋白质、DNA等生化药物具有非常快的代谢速度(plasma clearance)，并且能够被免疫，所以需要经常注射这种必不可少的关键药剂，以确保其在病人血液中维持稳定的药理学浓度。目前，磁共振成像造影剂一般为顺磁性金属离子的配合物，其配体多为含多氨基和多羧基的线形和环状小分子化合物，所以半衰期较短，常常为了获取清晰图象而增加用量或者短时间内重复给药等。美国专利US 4 647 447是将二乙三胺五乙酸配合物，与葡甲胺成盐，制成钆喷酸葡胺造影剂，在临床上广泛应用。虽然它与人体有较好的生物相容性，但是钆喷酸葡胺分子量小，排泄太快，消除半衰期约20～100分钟，这种造影剂没有组织和器官选择性，且几乎完全通过肝排泻，对肝胆系统的造影效果不理想。由于代谢速度过快，颅脑及脊髓磁共振成像，需在30分钟内再次给药；判断病人是属于成人病变还是肿瘤复发，需要增加用量；增加了该药物用量，就增加了人体排毒量，也就提高了负作用的几率。而且，钆喷酸葡胺造影剂不能通过完整的血脑屏障，也不能进入毛细血管屏障的其它组织，如脊髓、眼及睾丸等。作成口服剂使用时不能被胃粘膜所吸收，更不能进入红细胞或附着于血红蛋白上，因而只限于在血浆中运输。钆喷酸葡胺不适于在心脏和血管疾病的成像中应用，而通常要用所谓的血池成像对比度增强剂才行。总之，至今为止，还没有一种配体可以使制成关键药剂或造影剂能同时满足具有靶向性、半衰期长、弛豫率高等特性要求的。
技术实现思路
本专利技术的目的是公开一种含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体，用这种配体制备靶向药物或造影剂具有靶向性、半衰期长、弛豫率高，用量很少而图象清晰，并且毒性低，对肝癌进行检测的效果好。本专利技术的另一个目的是提供上述配体的合成工艺。为了达到上述目的，本专利技术经过长期对带有端官能团的聚氧乙烯的性能研究发现，靶向药物可以与高分子造影剂通过共价键结合，这样高分子既延长造影剂的半衰期、又延长了靶向药物的半衰期、同时又可以进行跟踪监测。聚氧乙烯及其衍生物(PEG)具有两亲性、无毒、免疫原性低、生物相容性好、种类多等优点，常用于蛋白质、多肽生物药物制备、西药添加剂和制备生物医用材料。用PEG改性造影剂，有聚氧乙烯的所有优点。带有端官能团的聚氧乙烯有许多功能，例如双端胺基的聚氧乙烯改性的造影剂，其端基为胺基，可以进行药物的化学修饰。而对于用于多肽等的修饰，要求的实验条件温和。本专利技术提供的一种含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体，具有如下结构 式中，R3代表3-马来酰胺苯甲酸-N-琥珀酰亚胺酯(MBS)偶联剂残基-肝癌靶向多肽，结构式为 式中R4代表巯基参与反应的肝癌靶向多肽，肝癌靶向多肽次序为FAM-A-G-K-G-T-P-S-L-E-T-T-P-C-COOH，其中FAM代表连接到多肽胺基端的罗丹明荧光素C21H12O7。R2代表聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物链段，结构式为 式中，R1代表聚氧乙烯，结构式为-CH2CH2-(OCH2CH2)n-n代表22～500的整数。本专利技术的含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体可溶于N，N-二甲基甲酰胺，或二氯甲烷，或氯仿，或二氧六环，或二甲基亚砜，或蒸馏水，或磷酸PBS缓冲溶剂，为黄色固体粉末。本专利技术要解决的第二个技术问题是提供一种含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体的合成方法第一步 制备含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品先量取肝癌靶向多肽∶3-马来酰胺苯甲酸-N-琥珀酰亚胺酯MBS偶联剂∶含胺基聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物∶溶剂＝1∶0.1～0.2∶1.1～3.3∶200～4000重量比，然后将它们加入反应器中，在-4C°～室温条件下，反应2～72小时，制得含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品；第二步 制备含有多肽的聚氧乙烯配体的精制品将第一步制得的含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品透析，冻干，得到黄色固体粉末为本专利技术的含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体；上述的溶剂为N，N-二甲基甲酰胺，或二氯甲烷，或氯仿，或二氧六环，或二甲基亚砜，或蒸馏水，或磷酸PBS缓冲溶剂；上述含胺基聚合物是端胺基聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物，分子式为NH2-R2-NH2，结构式为 式中，R1代表聚氧乙烯，结构式为-CH2CH2-(OCH2CH2)n-n代表22～500的整数。上述第一步制备含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品的方法也可以按如下三步进行A、先制备含有偶联剂的聚氧乙烯配体粗制品；在反应器中加入端胺基聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物、溶剂、偶联剂，在-4C°～室温反应0.5～72小时，端胺基聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物∶溶剂∶偶联剂的重量比为1∶10～1670∶0.06～6；B、将A制得的含有偶联剂的聚氧乙烯配体粗制品的提纯透析，冻干，制得含有偶联剂的聚氧乙烯配体的精制品；C、制备含有多肽的聚氧乙烯改性的配体在第二步得到的产物中加入肝癌靶向多肽和溶剂，先量取含有偶联剂的聚氧乙烯配体的精制品∶肝癌靶向多肽∶溶剂的重量比为1∶0.06～1.3∶43～1010，在-4C°～室温反应1～72小时，制得含有多肽的聚氧乙烯配体的粗制品。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为1.由于本专利技术的含肝癌靶向多肽的聚氧乙烯配体是大分子，因此具有两亲性、无毒、免疫原性低、生物相容性好、种类多、稳定、不易粘附于血管壁、半衰期长。2.由于本专利技术的含多肽的聚氧乙烯配体是通过易降解的肽键连接，所以该大分子可以在生物体内降解，毒性小。3.由于本专利技术的含多肽的聚氧乙烯配体含有二乙三胺五乙酸，所以可以用作合成造影剂的配体，用它为配体作成的造影剂半衰期长、弛豫率高，可以在计量很小情况下，在体内停留时间延长，使待检测器官成像清晰，而且由于含有酯基可以在体内降解，毒性小。4.由于本专利技术的含多肽的聚氧乙烯配体的半衰期长，因此可以在一段时间内确保其在病人血液中维持稳定的药理学浓度，可以用于血池造影剂。5.由于含多肽的聚氧乙烯配体中有靶向多肽，通过多肽，可以粘附于肝癌细胞，对肝癌进行检测及治疗。6.含多肽的聚氧乙烯配体再接钆，可作为造影剂，靶向肽的半衰期也延长了，同时可以进行磁共振跟踪监测。7.合成本专利技术的含多肽的聚氧乙烯配体的工艺路线简单，操作条件温和，产物提纯步骤简单，产物产率高。附图说明图1是本专利技术实施例4的含有多肽的聚氧乙烯配体的精制品的核磁共振氢谱(1H NMR)。具体实施例方式本专利技术的原料端胺基聚氧乙烯-二乙三胺五乙酸嵌段聚合物需自行合成。合成方法见中国专利技术专利申请《端胺基嵌段聚氧乙烯改性的钆配合物及其合成方法》，申请号为200510024217.7。上述方法中的原料肝癌靶向多肽的制备见中国专利技术专利申请《体内筛选法得到的肝癌组织特异性粘附肽及其用途》，申请号为2本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有肝癌靶向肽的聚氧乙烯配体，其特征在于，该配体具有以下结构：＊＊＊式中，Ｒ↓［３］代表ＭＢＳ偶联剂加肝癌靶向肽，Ｒ↓［２］代表聚氧乙烯－二乙三胺五乙酸嵌段聚合物链段。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋春梅，薛海丽，庄小璐，钱旻，杜冰，余亦华，彭敏，柴继峰，余磊，谢美然，黄明德，杨东丽，
申请(专利权)人：华东师范大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]