一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法技术

本发明专利技术公开了一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，选用Zn溶液：0.1‑3x10

Method for testing calcium ion content in calcium magnesium coexisting water

The invention discloses a method for testing the content of calcium magnesium coexisting ions in water, the solution of Zn: 0.1 3x10

【技术实现步骤摘要】
一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法
本专利技术属于水族养殖领域，特别涉及一种水族箱中水体钙离子的测试方法。
技术介绍
水族在水族箱饲养过程中会产生一定的钙离子，钙离子会对水族生产产生较大的影响，需要随时测试和去除钙离子，而测试钙离子含量是一个非常重要的步骤，就目前来说，钙离子测试基本采用EDTA滴定法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法等，这些方法都可以满足一定的测试需求，但也都存在较大的缺陷，EDTA滴定法测试准确性差、灵敏度差、精准度低，而原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法都需要用到非常精密的设备，设备成本高，对于大多数企业和使用者来说的无法实现的，不便于推广使用。本专利技术要解决的技术问题是提供一种测试准确性好、灵敏度高、精准度好、设备简单成本低、易于实现及广泛推广使用的钙离子测试方法。
技术实现思路
为解决上述现有技术测试准确性差、灵敏度低、精准度差、设备成本高、不易实现无法推广使用等问题，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，测试方法包括以下步骤，1）备料Zn溶液：0.1-3x10-2M，EGTA溶液：0.1-3x10-2M，Zn-EGTA溶液用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度，PAN乙醇溶液0.1-3x10-3M，缓冲溶液：1-2M硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH，Ca标准溶液：10-100ug/mL；2）混料至比色管移取一定量钙标准溶液于25mL比色管中，准确加入2-10mLZn-EGTA溶液，1-3mLPAN溶液，1-4mL缓冲溶液；3）吸光度测量用水定容到25mL，摇匀，室温放置10-30min显色，放入比色皿中，与波长500-600nm的空白试剂为参比测量吸光度；4）标准曲线建立根据标准钙溶液建立标准曲线；5）钙含量测算将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或者全自动生化分析仪器下，检测主波长500-600nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小。本专利技术的有益效果在于：采用Zn-EGTA竞争法测定离子钙，测试精准度高，灵敏度好，设备简单成本低，普通光谱仪即可，操作非常简单简便，易于实现和广泛推广使用。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术技术方案作进一步的详细描述，以使本领域的技术人员可以更好的理解本专利技术并能予以实施，但所举实施例不作为对本专利技术的限定：一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，测试方法包括以下步骤，1）备料Zn溶液：0.1-3x10-2M，EGTA溶液：0.1-3x10-2M，Zn-EGTA溶液用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度，PAN乙醇溶液0.1-3x10-3M，缓冲溶液：1-2M硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH，Ca标准溶液：10-100ug/mL；2）混料至比色管移取一定量钙标准溶液于25mL比色管中，准确加入2-10mLZn-EGTA溶液，1-3mLPAN溶液，1-4mL缓冲溶液；3）吸光度测量用水定容到25mL，摇匀，室温放置10-30min显色，放入比色皿中，与波长500-600nm的空白试剂为参比测量吸光度；4）标准曲线建立根据标准钙溶液建立标准曲线；5）钙含量测算将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或者全自动生化分析仪器下，检测主波长500-600nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小。选用与钙、镁生成的络合物稳定性差别较大的EGTA（乙二醇二乙醚二胺四乙酸）与锌配制成络合竞争剂,使钙与锌络合竞争,其反应式为：Ca2++Zn2+-EGTA=Ca2+-EGTA+Zn2+，然后以PAN（1-2-吡啶偶氮-2-萘酚）为显色剂,以吸光度法进行测定，通过实验选定体系显色酸度为pH4-7,波长500-580nm，钙量在1-8ug/mL范围符合比尔定律。其中需要用到的几种主要试剂如下：Zn溶液：0.1-3x10-2MEGTA溶液：0.1-3x10-2MZn-EGTA溶液用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度；PAN乙醇溶液0.1-3x10-3M；缓冲溶液：1-2M硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH；Ca标准溶液：10-100ug/mL。为了更好的说明此测试方法，下面以几个具体实施例来具体说明：实施1前期曲线制备，曲线建立一次，日后在同样波长下，不必再次建立；1.移取0，1，2，3，4，5mL钙标准溶液（20ug/mL）于10mL比色管中，准确加入1mL溶液A，其中含2x10-2M1:1Zn-EGTA，pH62M硼酸缓冲溶液。加入1mL2x10-3MPAN溶液。其中PAN溶液现用现配；2.用水定容到10mL，摇匀。室温放置10min显色，放入比色皿中，于波长525nm以试剂空白为参比测量吸光度；3.根据标准钙溶液建立标准曲线；测量：1.将某品牌矿泉水进行直接测量；2.8mL矿泉水加入1mL溶液A，1mL2x10-3MPAN溶液；2.将最终反应物置于可见光分光光度计下，检测主波长525nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小，测量其钙离子含量为64ug/mL。实施2前期曲线制备，曲线建立一次，日后在同样波长下，不必再次建立；1.移取0，1，2，3，4，5mL钙标准溶液（20ug/mL）于10mL比色管中，准确加入1mL溶液A，其中含2x10-2M1:1Zn-EGTA，pH62M硼酸缓冲溶液；2.加入250mgPAN-NaCl混合物，其中PAN：NaCl为1:249，即1gPAN和249gNaCl混合均匀，PAN-NaCl混合后，PAN形成钠盐，其溶解性大大增加，不需要酒精即可溶解于水中；3.用水定容到10mL，摇匀。室温放置10min显色，放入比色皿中，于波长570nm以试剂空白为参比测量吸光度；4.根据标准钙溶液建立标准曲线；测量：1.取福建厦门九龙江河口海水1ml；2.加入1mL溶液A，纯水补齐10ML，摇匀；3.加入250mgPAN-NaCl混合物，溶解；4.室温放置20min显色，放入比色皿中，于波长570nm以试剂空白为参比测量吸光度，其钙离子含量为26ug/mL,换算为真实钙含量为260mg/L，低于常见海水400mg/mL浓度，符合河口海水特征。实施3前期曲线制备，曲线建立一次，日后在同样波长下，不必再次建立；1.移取0，1，2，3，4，5mL钙标准溶液（20ug/mL）于10mL比色管中，准确加入1mL溶液A，其中含2x10-2M1:1Zn-EGTA，pH62M硼酸缓冲溶液；2.加入100mgPAN-NaCl混合物，其中PAN：NaCl为1:99，即1gPAN和99gNaCl混合均匀，PAN-NaCl混合后，PAN形成钠盐，其溶解性大大增加，不需要酒精即可溶解于水中；3.用水定容到10mL，摇匀；室温放置10min显色，放入比色皿中，于波长570nm以试剂空白为参比测量吸光度；4.根据标准钙溶液建立标准曲线；测量：1.取家庭海水水族箱中的海水0.2mL；2.加入1mL溶液A，纯水补齐10ML，摇匀；3.加入250mgPAN-NaCl混合物，溶解；4.室温放置20min显色，放入比色皿中，将最终反应物置于分光光度计下，检测主波长525nm处吸光度，测算出离子钙含量的大小；5.其钙离子含量为7.2ug/mL,换算为真实钙含量为360mg/L，低于海水观赏本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，其特征在于：测试方法包括以下步骤，1）备料 Zn溶液：0.1‑3x10

【技术特征摘要】
1.一种钙镁共存水体中钙离子含量测试方法，其特征在于：测试方法包括以下步骤，1）备料Zn溶液：0.1-3x10-2M，EGTA溶液：0.1-3x10-2M，Zn-EGTA溶液用Zn溶液和EGTA溶液按等体积混合稀释至需要浓度，PAN乙醇溶液0.1-3x10-3M，缓冲溶液：1-2M硼酸溶液，pH5-10，采用NaOH调节pH，Ca标准溶液：10-100ug/mL；2）混料至比色管移取一定量钙标准溶液于25m...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦骥，
申请(专利权)人：厦门澳汤维尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35