山奈酚在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了山奈酚在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。山奈酚存在于多种可食植物(包括水果、蔬菜和豆类)及传统中药(菊花、覆盆子、菟丝子、黄芪和银杏叶等)中。通过观察山奈酚对过氧化氢(H

Kaempferol in preparation for prevention and treatment of drug application in retinal injury disease

The present invention discloses the preparation of kaempferol in the prevention and treatment of drug application in retinal injury disease. Kaempferol in a variety of edible plants (including fruits, vegetables and legumes) and traditional Chinese medicine (chrysanthemum, raspberry, dodder, Astragalus and gingko biloba) in. Through the observation of kaempferol on hydrogen peroxide (H

【技术实现步骤摘要】
山奈酚在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用
本专利技术涉及一种天然植物单体新的药理作用，具体的涉及山奈酚在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病的保健品或新药中的应用，为眼科相关疾病的预防和临床治疗开拓新的方法和思路。
技术介绍
视网膜色素上皮细胞(RPE)具有复杂的生物学功能，为感觉层视网膜的外层细胞提供营养、吞噬和消化光感受器细胞外节盘膜，维持新陈代谢等重要功能。RPE与脉络膜最内层的玻璃膜(Bruch膜)粘连极紧密，与脉络膜毛细血管层共同组成一个统一的功能单位，即RPE-玻璃膜-脉络膜毛细血管复合体，对维持光感受器微环境有重要作用。RPE细胞的损伤可引起该复合体的损害，进一步引起很多眼底病的发生，如年龄相关性黄斑变性，视网膜色素变性和各种脉络膜视网膜病变等。年龄相关性黄斑变性(age-relatedmaculardegeneration，AMD)是一种随着年龄增长发病率逐渐升高的眼部退行性病变，能造成进行性的、不可逆的中心视力丧失。在发达国家中，AMD己经成为老龄人口视力丧失的主要原因，大型的流行病学调查显示，西方国家43岁以上人群中AMD的患病率为1.7％-15.6％。世界卫生组织的调查报告表明，全球盲人中大约有8.7％为AMD导致的不可逆盲。全世界大约有3000万AMD患者，每年大约有50万人因AMD而致盲。在我国，由于老龄化进程加快，AMD患者也逐年增多，在部分地区，50岁以上人群中AMD的患病率可以达到15.5％以上，而且患病率和致盲率随年龄增加而增加。随着社会经济水平和医疗事业的发展，白内障和角膜病等可逆性致盲性眼病己经得到了有效地控制，但是AMD作为一种不可逆的致盲性眼病，其发病率逐年上升，己经成为了一项不可忽视的公共卫生问题。氧化应激是多种AMD的危险因素中可能的共同作用机制。AMD是与年龄相伴随的疾病，随着年龄增长，衰老细胞中产生过多的活性氧产物，造成机体氧化系统与抗氧化系统之间的不平衡，从而造成组织损伤和功能缺失。环境因素如紫外线照射增多、吸烟等也是与AMD相关的危险因素，这两者都己被证明可以造成活性氧的增多，从而造成视网膜组织的氧化应激。其他因素如抗氧化维生素摄入不足以及肥胖等也可以造成视网膜组织氧化应激水平的增加，相关的临床试验结果则证实了抗氧化维生素与AMD的关系。综上所述，氧化应激是AMD的重要发病机制之一。AMD是一种退行性改变的致盲疾病，虽然进展缓慢，但一旦发展成渗出型AMD(湿性AMD)则可在短期内对视力造成极大的损害。因此，当前对渗出型AMD的治疗主要是针对脉络膜新生血管(CNV)。视网膜光凝术是一种最早用于治疗AMD的方法，此外还有经瞳孔温热疗法(Transpupillarythermotherapy,TTT)、光动力疗法(Photodynamictherapy，PDT)、手术治疗和近年来成为研究热点的抗血管内皮生长因子(VEGF)药物治疗。虽然这些治疗均取得一定效果，但黄斑区位置特殊，多数治疗只能针对已形成的CNV，并且费用昂贵，因此寻找另一种可预防AMD的发生、可逆转AMD的发展、价格经济和副作用少的新疗法变得很必要。越来越多研究表明植物提取物对预防和逆转AMD有显著效果。在当前众多的植物提取物研究中，学者们对类胡箩卜素特别是叶黄素和玉米黄质尤为关注。Nidhi等研究证实在日常饮食中多摄取类胡萝卜素，尤其是叶黄素和玉米黄质有助于减低患AMD的风险。但这些植物提取物对RPE细胞损伤的保护作用弱，有效药物浓度高，药效低，因此寻求优于叶黄素的更强有效的药物治疗AMD变得十分必要。山萘酚(Kaempferol)属于黄酮醇类化合物，主要来源于姜科植物山奈的根茎，并大量存在于水果蔬菜和豆类中(如、西兰花、卷心菜、甘蓝、豆类、韭菜、番茄、树莓、草莓和葡萄等)，另外还存在于某些传统中草药(例如菊花、覆盆子、菟丝子、黄芪、银杏等)中。近年来，人们对于山奈酚的抗癌方面做了大量研究，并证实一定浓度山奈酚有诱导肺癌、胃癌、食管癌、肝癌细胞凋亡的作用。关于山奈酚对氧化应激状态下的视网膜色素上皮细胞的影响国内外尚未有相关报道，山奈酚是否有可能通过减少视网膜色素上皮细胞的氧化应激损伤来延缓AMD的发生和发展，还有待于研究。
技术实现思路
本专利技术的目的是通过证实山奈酚对于氧化应激状态下的视网膜色素上皮细胞的保护作用，并通过细胞凋亡途径来研究山奈酚保护作用的分子机制，为开发山奈酚未知的生物活性及将来的临床治疗作用提供新的理论支持。本专利技术采用的技术方案是：山奈酚单用或与抗视网膜损伤保护药物联合在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。上述的应用，所述的视网膜损伤性疾病包括视网膜色素上皮细胞损伤引起的视网膜损伤性疾病。上述的应用，所述的视网膜损伤性疾病包括氧化应激损伤视网膜色素上皮细胞引起的视网膜损伤性疾病。上述的应用，所述的视网膜色素上皮细胞为ARPE-19。上述的应用，所述的视网膜损伤性疾病包括年龄相关性黄斑变性疾病、视网膜色素变性疾病和脉络膜视网膜病变疾病。上述的应用，所述的抗视网膜损伤保护药物为叶黄素，胡萝卜素，花青素，槲皮素，枸杞多糖和黄芪多糖。上述的应用，有效剂量20nM-50nM。本专利技术的有益效果是：本专利技术通过对山奈酚对于氧化应激状态下的视网膜色素上皮细胞的保护作用，并通过细胞凋亡途径来研究山奈酚保护作用的分子机制，通过研究发现，山奈酚对氧化应激损伤的ARPE-19人视网膜色素上皮细胞具有保护作用，而对正常的ARPE-19细胞没有表现出明显的毒性作用，对RPE细胞损伤的保护作用更强，而且药效较高，未来可能成为临床上治疗AMD的一种强有效的药物。而且可以通过与现有的治疗眼部疾病的药物(如叶黄素，胡萝卜素，花青素，槲皮素，枸杞多糖，黄芪多糖等)联合，达到治疗和预防RPE细胞损伤引起的包括年龄相关性黄斑变性疾病、视网膜色素变性疾病和脉络膜视网膜病变疾病。附图说明图1是本专利技术的实验机理示意图。图2A是不同浓度的过氧化氢(H2O2)对ARPE-19细胞模型建立图。图2B是不同浓度的山奈酚对ARPE-19细胞毒性图。图2C是不同浓度的山奈酚对氧化应激损伤的ARPE-19细胞存活率的影响图。图2D是不同浓度的叶黄素对氧化应激损伤的ARPE-19细胞存活率的影响图(阳性药对照)。图3A是流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI法检测山奈酚(20nM，50nM)对H2O2诱导的APRE-19细凋亡的影响图。图3B是流式细胞术检测的各实验组ARPE-19细胞凋亡率(％)图。图4A是山奈酚(20nM，50nM)对H2O2氧化应激损伤的各实验组ARPE-19细胞的ROS活性检测图。图4B是山奈酚(20nM，50nM)对H2O2氧化应激损伤的各实验组ARPE-19细胞的SOD活性检测图。图5A是山奈酚(20nM，50nM)对H2O2氧化应激损伤的ARPE-19细胞的BaxmRNA表达水平。图5B是山奈酚(20nM，50nM)对H2O2氧化应激损伤的ARPE-19细胞的Bcl-2mRNA表达水平。图5C是山奈酚(20nM，50nM)对H2O2氧化应激损伤的ARPE-19细胞的Caspase-3mRNA表达水平。图6A是Westernblot检测各实验组细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
山奈酚单用或与抗视网膜损伤保护药物联合在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.山奈酚单用或与抗视网膜损伤保护药物联合在制备预防和治疗视网膜损伤性疾病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的视网膜损伤性疾病包括视网膜色素上皮细胞损伤引起的视网膜损伤性疾病。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的视网膜损伤性疾病包括氧化应激损伤视网膜色素上皮细胞引起的视网膜损伤性疾病。4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张东蕾，杜威威，何伟，何向东，
申请(专利权)人：何伟，
类型：发明
国别省市：辽宁,21