一种纤细裸藻的培养方法技术

本发明专利技术公开了一种纤细裸藻的培养方法，它包括如下步骤：对纤细裸藻进行异养培养，在指数生长期中期，放料部分纤细裸藻，再补充部分营养物和水，继续培养。本发明专利技术的有益效果是能够快速、高产的培养出利用率高的纤细裸藻，极大的降低了纤细裸藻的生产成本。

【技术实现步骤摘要】
一种纤细裸藻的培养方法
本专利技术涉及生物
，特别是一种适用于对纤细裸藻进行培养的方法。
技术介绍
纤细裸藻属于裸藻门裸藻属，细胞多为纺锤形，少数为圆柱形，无细胞壁，表质软，形状易变，直径50μm，是地球上最早的生命之一，出现在5多亿年前，基因始终没有变化，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，同时又可以进行化能异养。纤细裸藻由于具有富含丰富的营养物质，并且具有可进行化能异养培养的培养模式所具有的得天独厚的优势，因此是一种兼具营养价值与工业化潜能的藻种。纤细裸藻的主要培养方式有自养、混养和异养。目前规模化培养多采用自养，但自养存在培养密度低、生长周期长、生产效率低、占地面积大、采收困难等不利影响。而采用廉价、适宜和广泛使用的有机碳源葡萄糖为唯一碳源的培养条件下，纤细裸藻的异养培养不受光照、温度等环境和气候条件影响，生长速率快，培养密度高，生产过程容易控制，产率可大幅提高。目前已有的异养培养方式主要为分批培养、流加分批培养和间歇式补料分批培养。其中分批培养是最普遍采用的培养方式。但分批培养存在培养过程中延滞期较长，培养达到稳定期后藻细胞老化生长减缓，以及培养末期葡萄糖浓度较高造成浪费的问题，使培养产率降低。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种培养周期短、高产率、碳源利用率高的纤细裸藻的培养方法。本专利技术的技术方案是，一种纤细裸藻的培养方法，其步骤包括：对纤细裸藻进行异养培养，在指数生长期中期，放料部分纤细裸藻，再补充部分营养物和水，继续培养。在指数生长中期，每天进行“放料纤细裸藻，纤细裸藻的选取量为1/2（占培养液体积的50%），再补充营养物和水，营养物和水的选取量为1/2（占培养液体积的50%），继续培养”的操作一次，直到培养周期结束。所述异养培养液的组成包括：葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE微量元素液组成包括H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H2O0.06g/L。所述异养培养液pH值在3.0~6.0。所述补充营养物的组成包括每1000mL培养液中添加葡萄糖4-5g，酵母粉4-5g/L，K2HPO30.05g，KH2PO30.01g，MgSO4·7H2O0.02g，TE微量元素液0.5mL。所述异养培养过程中纤细裸藻的接种量为培养液10％的体积占比。所述异养培养过程中培养温度25-28℃，通空气量1.0L/min，加入0.05％的有机硅消泡剂。所述指数生长期中期为自接种培养的第三天至第四天。优选的，每次放料1/2（占总培养体积的1/2）的纤细裸藻。本专利技术的有益效果是能够快速、高产的培养出利用率高的纤细裸藻，极大的降低了纤细裸藻的生产成本。附图说明图1是本专利技术的通气自养与异养生长曲线示意图，图2是本专利技术的对数期补料生长曲线示意图。具体实施方式：结合以上附图详细描述实施例，实施例1通气自养培养：在1000mL的培养瓶中，进行通气自养培养，培养条件为：纤细裸藻接种密度为0.33g/L；异养培养基的组成包括：NaNO31.5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE溶液配方为H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H2O0.06g/L；培养温度28℃，通空气量1.0L/min，加入0.05％的有机硅消泡剂。结果显示如图1所示。外加碳源葡萄糖通气异养培养在1000mL的培养瓶中，进行外加碳源葡萄糖通气异养培养，培养条件为：纤细裸藻接种密度为0.33g/L；异养培养基的组成包括：葡萄糖20g/L，NaNO31.5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE溶液配方为H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H2O0.06g/L；培养温度25℃，通空气1.0L/min，加入0.05％的有机硅消泡剂。结果显示如图1所示。由图1可知，采用通气自养培养的纤细裸藻，第8天通气自养培养的纤细裸藻进入稳定期，随后培养结束；采用外加碳源葡萄糖通气异养培养的纤细裸藻，培养开始后第2天纤细裸藻进入指数生长期，第6天通气异养培养的纤细裸藻进入稳定期，随后培养结束。实施例2通气自养培养：在1000mL的培养瓶中，进行通气自养培养，培养条件为：纤细裸藻接种密度为0.33g/L；异养培养基的组成包括：NaNO31.5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE溶液配方为H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H2O0.06g/L；培养温度25℃，通空气量1.0L/min，加入0.05％的有机硅消泡剂。结果显示如图1所示。外加碳源葡萄糖通气异养培养在1000mL的培养瓶中，进行外加碳源葡萄糖通气异养培养，培养条件为：纤细裸藻接种密度为0.33g/L；异养培养基的组成包括：葡萄糖20g/L，NaNO31.5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE溶液配方为H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H2O0.06g/L；培养温度28℃，通空气1.0L/min，加入0.05％的有机硅消泡剂。结果显示如图1所示。由图1可知，采用通气自养培养的纤细裸藻，第8天通气自养培养的纤细裸藻进入稳定期，随后培养结束；采用外加碳源葡萄糖通气异养培养的纤细裸藻，培养开始后第2天纤细裸藻进入指数生长期，第6天通气异养培养的纤细裸藻进入稳定期，随后培养结束。实施例3外加碳源葡萄糖通气异养培养，在指数期前期放料补液培养。在1000mL的培养瓶中，进行外加碳源葡萄糖通气异养培养，培养条件为：纤细裸藻接种密度为0.33g/L；异养培养基的组成包括：葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE溶液配方为H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纤细裸藻的培养方法，其特征在于：培养步骤包括：对纤细裸藻进行异养培养，在指数生长期中期，放料部分纤细裸藻，再补充部分营养物和水，继续培养。

【技术特征摘要】
1.一种纤细裸藻的培养方法，其特征在于：培养步骤包括：对纤细裸藻进行异养培养，在指数生长期中期，放料部分纤细裸藻，再补充部分营养物和水，继续培养。2.如权利要求1所述的一种纤细裸藻的培养方法，其特征在于：在指数生长中期，每天进行“放料纤细裸藻，纤细裸藻的选取量为占培养液体积的50%，再补充营养物和水，营养物和水的选取量为占培养液体积的50%，继续培养”的操作一次，直到培养周期结束。3.如权利要求1所述的一种纤细裸藻的培养方法，其特征在于：所述异养培养液的组成包括：葡萄糖20g/L，酵母粉5g/L，K2HPO30.3g/L，KH2PO30.2g/L，MgSO4·7H2O0.1g/L，TE微量元素液1mL/L，其余为水，其中TE微量元素液组成包括H3BO32.81g/L、MnCl2·4H2O1.82g/L、ZnSO4·7H2O0.23g/L、Na2MoO4·2H2O0.34g/L、CuSO4·5H2O0.05g/L以及Co(NO3)2·6H...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洋，徐瑶，王中杰，
申请(专利权)人：河南师范大学，
类型：发明
国别省市：河南,41