一种高纯度花椒麻味物质的制备方法技术

本发明专利技术属于花椒的精深加工与利用领域，具体涉及一种从花椒油树脂中提取制备高纯度花椒麻味物质的方法。本发明专利技术所提供的制备方法，包括如下步骤：以花椒油树脂为原料，加入硅胶，充分搅拌，混合均匀；所得混合物乙醚提取，然后固液分离；所得固相物甲醇浸提，然后固液分离，所得液相物脱溶，获得花椒麻味物质粗提物；所得粗提物中石油醚浸提，回流浸提，然后固液分离，所得固相物再加入一定量石油醚继续回流浸提，然后固液分离；所得液相物置于低温环境冷冻结晶，即得花椒麻味物质。本发明专利技术所提供的从花椒油树脂中提取制备高纯度花椒麻味物质的方法避免了传统层析柱过程，制备量不受限制，便于实现规模化生产，且制备获得的花椒麻味物质的纯度很高。

Method for preparing high purity Zanthoxylum bungeanum flavour substance

The deep processing and utilization of the invention belongs to the field of Chinese prickly ash, in particular relates to a method for extracting from oleoresin in preparation of high purity numb taste substances. The preparation method provided by the invention comprises the following steps: to pepper oil resin as raw material, adding silica gel, stir evenly mixed; the mixture of ether extraction, and solid-liquid separation; the solid phase methanol extraction, and solid-liquid separation, the liquid phase precipitation, get numb taste components of crude extract; the crude extract of petroleum ether extraction, reflux extraction, and solid-liquid separation, the solid phase by adding a certain amount of petroleum ether to reflux extraction, and solid-liquid separation; in low temperature freezing crystallization liquid phase is obtained, numb taste components. The present invention provides from the oleoresin extraction method for preparation of high purity numb taste components to avoid the traditional chromatography process, the preparation is not restricted, easy to realize large-scale production, the purity of numb taste components and the preparation was very high.

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度花椒麻味物质的制备方法
本专利技术属于花椒的精深加工与利用领域，具体涉及一种从花椒油树脂中提取制备高纯度花椒麻味物质的方法。
技术介绍
花椒作为我国重要的药食两用材料，已具有两千多年的历史，其以独特的辛麻味，广泛用于川菜及火锅等烹调中，被誉为“八大调味品”之一。花椒麻味物质是一类以山椒素及其同系物为代表的不饱和脂肪酸酰胺类物质，具有强烈的刺激性，是花椒产生麻味的物质基础，也是衡量花椒品质的重要指标之一。此外，花椒麻味物质还具有麻醉、镇痛、抗癌、抗自由基、降低血清胆固醇等生理活性，因此具有广阔市场前景。但是，由于花椒麻味物质成分复杂，且其具有的不饱和双键结构极不稳定，暴露于空气中几分钟内即氧化成黄色粘稠状物质，成为了制约大规模制备高纯度花椒麻味物质的技术瓶颈。因此未见有市售的花椒麻味物质标准品，给花椒及其制品中麻味物质的定量评价带来了一定困难，同时也限制了其在保健食品级医药领域的应用。花椒麻味物质提取制备的方法较多，主要有水提法、柱层析法、超临界二氧化碳法、分子印迹技术等，但他们在工业应用中均存在一定的局限性。例如CN1305742A提供了一种采用高温高压水煮发提取制备花椒麻味物质的方法，但该法所提取得到山椒素等麻味物质，还含有茵芋碱、青椒碱等生物碱类杂质，纯度低，无法作为花椒麻味物质标准品。CN102690208A提供了一种从花椒油中提取羟基山椒素的方法，该法获得的花椒麻味物质虽纯度高，但其对设备要求高、规模小，仅限于实验性研究，难以实现规模化生产。CN1488289A公布了一种采用超临界二氧化碳技术分离纯化花椒麻味物质的方法，该法对设备要求高，且操作繁琐，所获得的花椒麻味物质仍然无法作为标准品。采用硅胶吸附结合溶剂提取法分离纯化花椒麻味物质，与文献报道及公开的专利相比，直接采用硅胶吸附样品后，并根据花椒麻味物质的化学性质，采用不同极性的溶剂进行洗脱、除杂，避免了传统方法的成本高、规模小、分离时间长等限制。此种方法提取制备花椒麻味物质具有操作简便，无需专门的设备、上样量不受限制，且纯度高，非常适合工业化大规模生产。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种大规模高纯度花椒麻味物质的制备方法，用于解决现有技术中的问题。所述大规模高纯度花椒麻味物质的制备方法以花椒油树脂为原料，采用硅胶吸附后，再依次加入无水乙醚去杂、甲醇洗脱、石油醚纯化，冷冻结晶、氮气干燥，获得高纯度花椒麻味物质，可为花椒麻味物质生理功效评价及品质评价提供标准品，并可适用于工业化生产。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，包括如下步骤：1)以花椒油树脂为原料，加入硅胶，充分搅拌，混合均匀；本专利技术中的花椒油树脂可使用各种市售的花椒油树脂，一般是采用萃取法从花椒属植物(拉丁名：ZanthoxylumL.)果实中提取的含有全部风味特征的油状制品。优选的，所述步骤1中，花椒油树脂中花椒麻味物质的含量为20～30wt％。花椒麻味物质是花椒属植物中呈现麻味的所有物质的总称，主要是由一类不饱和脂肪族酰胺组成，是花椒属植物呈现麻味的物质基础，其含量的检测方法可参照DB50/T321-2009。优选的，所述步骤1中，硅胶为薄层层析用硅胶。本专利技术中的薄层层析用硅胶可使用市售的薄层层析用硅胶。薄层层析用硅胶一般是白色粒状粗孔硅胶，不溶于水和有机溶剂，在空气中吸潮，现有技术中一般是将粗孔硅胶粉碎至40～200目，经筛选，盐酸浸泡，水洗，烘干(含水量≤5％)制得。优选的，所述步骤1中，花椒油树脂与硅胶的质量之比为1：1～3。优选的，所述步骤1中，所述硅胶为经活化的硅胶，活化硅胶的具体方法为：100～120℃活化0.5～1.5h。2)在步骤1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分离；优选的，所述步骤2中，乙醚为无水乙醚。优选的，所述步骤2中，乙醚与步骤1所得混合物的比例为每4～8ml乙醚对应1g混合物。优选的，所述步骤2中，提取的具体条件为：密闭环境静置1.5～2.5h，静置过程中间歇搅拌，在本专利技术一实施例中，每隔20～40min搅拌一次。优选的，所述步骤2中，固液分离后固相物进一步干燥除去残留的乙醚。本领域技术人员可选择合适的条件对所得固相物进行干燥以除去残留的乙醚，在本专利技术一实施例中，将固相物置于通风处以挥干残留的乙醚。3)将步骤2分离所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分离，所得液相物脱溶，获得花椒麻味物质粗提物；优选的，所述步骤3中，甲醇与固相物的比例为每2～6ml甲醇对应1g固相物。优选的，所述步骤3中，浸提的具体条件为：浸提温度为45～55℃，浸提时间为6～12h。本领域技术人员可选择合适的方法和条件对步骤3中的液相物脱溶，在本专利技术一实施例中，使用真空条件下蒸发回收溶剂(减压蒸馏)的方式进行脱溶，具体条件为：温度：40～50℃；真空度：0.03～0.08MPa。脱溶过程中回收的溶剂可循环再使用。4)在步骤3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分离，所得固相物再加入一定量石油醚继续回流浸提12～18h，然后固液分离；所述步骤4中，在步骤3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提0.5h左右的目的是去除生物碱、多酚等杂质。优选的，所述步骤4中，石油醚为30～60℃沸程的石油醚。优选的，所述步骤4中，在步骤3所得粗提物中加入石油醚浸提时，石油醚与固相物的比例为每1～3ml石油醚对应1g固相物。优选的，所述步骤4中，所得固相物再加入一定量石油醚继续回流浸提时，石油醚与固相物的比例为每1～3ml石油醚对应1g固相物。5)将步骤4所得液相物置于低温环境冷冻结晶，分离出结晶物并干燥即得所述花椒麻味物质。优选的，所述低温环境冷冻结晶时的温度为-80℃～-18℃。本领域技术人员可选择合适的条件对所得结晶物进行干燥，在本专利技术一实施例中，将结晶物通入低温高纯氮气干燥以获得最终的晶体产物。通过本专利技术所提供的高纯度花椒麻味物质的制备方法制备获得的花椒麻味物质其HPLC-MS鉴定其分子量为263及289，鉴定为山椒素类成分(图1)，其纯度大于97％(图2)。目前发现的花椒麻味物质至少有25种以上，来源于于国内外不同花椒品种和产地，本专利技术主要以我国大量栽培和种植的红花椒(红椒，ZanthoxylumbungeanumMaxim.)和青花椒(ZanthoxylumschinifoliumSieb.etZucc)为原料的，其中,(2E,4E,6Z,10E)-2’-羟基-N-异丁基-2,4,6,10-十二烷四烯酰胺、(2E,4E,6E,10E)-2’-羟基-N-异丁基-2,4,6,10-十二烷四烯酰胺、(2E,4E,6Z,10E,12E)-2’-羟基-N-异丁基-2,4,6,10,12-十四烷五烯酰胺根据这三种成分是最大量的麻味成分，是主体成分，因此，用本方法能简单快速获得高纯度的花椒麻味成分，且制备获得的这三种物质对花椒麻味物质具有很强的代表性，可以用于花椒属植物的品质评定。如上所述，本专利技术的一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，该方法包括花椒麻味物质的吸附、无水乙醚脱油、脱色、甲醇洗脱、石油醚纯化、冷冻结晶以及氮气干燥工段。具有以下有益效果：(1)本专利技术提供的一种高纯度花椒麻味物质的提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，包括如下步骤：1)以花椒油树脂为原料，加入硅胶，充分搅拌，混合均匀；2)在步骤1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分离；3)将步骤2分离所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分离，所得液相物脱溶，获得花椒麻味物质粗提物；4)在步骤3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分离，所得固相物再加入一定量石油醚继续回流浸提12～18h，然后固液分离；5)将步骤4所得液相物置于低温环境冷冻结晶，分离出结晶物并干燥即得所述花椒麻味物质。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，包括如下步骤：1)以花椒油树脂为原料，加入硅胶，充分搅拌，混合均匀；2)在步骤1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分离；3)将步骤2分离所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分离，所得液相物脱溶，获得花椒麻味物质粗提物；4)在步骤3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分离，所得固相物再加入一定量石油醚继续回流浸提12～18h，然后固液分离；5)将步骤4所得液相物置于低温环境冷冻结晶，分离出结晶物并干燥即得所述花椒麻味物质。2.如权利要求1所述的一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，花椒油树脂中花椒麻味物质的含量为20～30wt％；和/或，所述步骤1中，硅胶为薄层层析用硅胶；和/或，所述步骤1中，花椒油树脂与硅胶的质量之比为1：1～3；和/或，所述步骤1中，所述硅胶为经活化的硅胶，活化硅胶的具体方法为：100～120℃活化0.5～1.5h。3.如权利要求1所述的一种高纯度花椒麻味物质的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘雄，游玉明，阚建全，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆,50