从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法技术

本发明专利技术公开一种从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：向带鱼鱼穈漂洗液中添加壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺构成的复合絮凝剂，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；然后向上清液中加入作为絮凝剂的阴离子聚丙烯酰胺，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；两次的沉淀合并、干燥得到蛋白质。本发明专利技术具有工艺简便、处理成本低、周期短等优点，对于降低带鱼鱼穈漂洗液的化学需氧量(COD)，保护环境具有重要意义。

Method for recovering protein from hairtail fish rinse in a kind of millet

The invention discloses a method for recovering protein from hairtail fish rinse in a kind of millet, which is characterized in that: the addition of composite flocculant of chitosan and cationic polyacrylamide to constitute a kind of millet rinse fish hairtail, mixing, centrifugation supernatant and collect the precipitate; then to supernatant was added as anionic polyacrylamide, mixed evenly, the supernatant was collected and the centrifugal precipitation; precipitation combined, two times of drying to obtain protein. The invention has the advantages of simple process, low cost and short cycle time, to reduce the chemical oxygen demand of the rinsing liquid amount of a kind of millet hairtail fish (COD), has important significance to protect the environment.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体是指一种利用壳聚糖-阳离子聚丙烯酰胺、阴离子聚丙烯酰胺等絮凝剂从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法。技术背景带鱼又名刀鱼、牙带鱼，是鱼纲鲈形目带鱼科动物，是我国沿海产量较高的一种经济鱼类。带鱼蛋白质是一种全价蛋白质，含有人体必需的八种氨基酸，营养丰富。带鱼鱼肉呈白色，是加工制备鱼穈的良好原料。鱼糜是将鱼经过采肉、漂洗、精滤、脱水搅拌及冻结加工得到的产品，是制备鱼穈制品如：鱼丸、鱼香肠、鱼卷等的原料。鱼糜制品没有腥味、富弹性、风味独特、营养丰富且价格便宜，深受大众喜爱。在鱼穈加工过程中，漂洗是一道关键的工序，直接关系到鱼穈的凝胶强度和白度，对提高鱼糜制品质量及保藏性能起到重要作用。漂洗一般是加入3～5倍左右鱼肉重量的水，慢速搅拌，使水溶性蛋白等充分溶出后静置，使鱼肉充分下沉，回收上层鱼油，倾去漂洗液，再按上述比例加水，重复漂洗1～3次；由此可见，漂洗工序用水量很大，造成占鱼肉蛋白30％～40％的水溶性蛋白质进入漂洗液，形成大量富营养加工废水，有研究表明，鱼穈漂洗液的化学需氧量(COD)高达8000-10000mg/L，如果不加处理就排放将对环境产生严重污染。因此，从鱼穈漂洗液中回收蛋白质，对于降低COD，保护环境具有重要意义。目前从鱼糜漂洗液中回收蛋白质的常见方法主要有：加热法、等电点沉淀法、絮凝法等。加热法耗能高，不符合节能减排的要求，并增加了企业的成本。等电点沉淀法是通过调解漂洗液的pH至水溶性蛋白质的等电点附近使之沉淀。由于鱼穈漂洗液中蛋白质的等电点一般在pH4.2～5.5，等电点法沉淀蛋白后的漂洗液呈强酸性，如果直接排放将造成水体酸化污染环境。絮凝法是向鱼糜漂洗液中加入一定量的絮凝剂，使蛋白质发生脱稳并凝聚成大颗粒沉降下来，达到回收蛋白质的目的；絮凝法具有操作过程简单，成本低廉等优点，是一种优良的蛋白质回收方法。由于鱼糜漂洗液中含有多种蛋白质，而传统的絮凝法往往仅仅收集单一等电点的蛋白质，造成其中还含有大量的未被回收的蛋白质，这部分鱼糜漂洗液排放到环境中，会造成化学需氧量高、对环境产生严重污染。但是目前尚还未有人针对带鱼鱼穈漂洗液中不同等电点的蛋白质进行絮凝法回收的报道。
技术实现思路
本专利技术针对现有技术的上述不足，提供一种采用不同的絮凝剂、针对不同等电点的蛋白质进行回收，以最大限度回收蛋白质，降低鱼穈漂洗液的COD，保护环境的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其中向带鱼鱼穈漂洗液中添加壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺构成的复合絮凝剂，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；然后向上清液中加入作为絮凝剂的阴离子聚丙烯酰胺，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；两次的沉淀合并、干燥得到蛋白质。本专利技术上述的带鱼鱼穈漂洗液，其具体的制备方法为：将带鱼鱼肉(去头、尾和内脏)绞碎，然后将鱼肉加入到作为漂洗液的4℃、0.3％(质量百分比浓度)NaCl溶液中，先慢速搅拌5～15分钟，再静置10～30分钟后用多层纱布(多层纱布可以是3-6层)过滤，得到鱼穈漂洗液，上述漂洗过程重复1～3次，合并多次漂洗过滤的滤液得到鱼穈漂洗液。本专利技术上述的壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺在带鱼鱼穈漂洗液中的浓度分别为1.0g/L～3.0g/L、0.02g/L～0.08g/L。上述的壳聚糖是先用乙酸配制成质量浓度为1％的壳聚糖溶液的形式加入到带鱼鱼穈漂洗液中的。上述的阳离子聚丙烯酰胺是先用水配制成质量浓度为0.025％的阳离子聚丙烯酰胺溶液的形式加入到带鱼鱼穈漂洗液中的。本专利技术上述加入到上清液的阴离子聚丙烯酰胺在上清液中的浓度为0.025g/L～0.075g/L。本专利技术上述的阴离子聚丙烯酰胺是先用水配制成溶液质量浓度为0.025％的阴离子聚丙烯酰胺溶液的形式加入到上清液中的。本专利技术上述的离心，具体的为：在3500～4000rpm、1～5℃下离心10～15分钟，然后取上清液并收集沉淀。本专利技术上述的干燥，具体是将沉淀置于50～60℃、0.08～0.1MPa条件下干燥12～24小时，然后经粉碎即得回收后的蛋白质。本专利技术上述从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，具体步骤包括：(1)将带鱼鱼肉绞碎(去头、尾和内脏，手工采肉)称量重量；用4℃，0.3％NaCl溶液作为漂洗液，漂洗时控制鱼肉和NaCl溶液的重量比为1:3～5，将鱼肉加入到上述的NaCl溶液中，先慢速搅拌5～15分钟，再静置10～30分钟后用多层纱布(多层纱布可以是3-6层)过滤，重复漂洗1～3次，得到鱼穈漂洗液；(2)向步骤(1)制备的鱼穈漂洗液中加入1.0g/L～3.0g/L壳聚糖和0.02g/L～0.08g/L阳离子聚丙烯酰胺，搅拌均匀，然后静置30～120分钟得到混合物；(3)将步骤(2)所得的混合物进行离心，3500～4000rpm、1～5℃、10～15分钟，取上清液并收集沉淀；(4)向步骤(3)所得的上清液中加入0.025g/L～0.075g/L阴离子聚丙烯酰胺，搅拌均匀，然后静置30～120分钟得到混合物；(5)将步骤(4)所得的混合物进行离心，3500～4000rpm、1～5℃、10～15分钟，取上清液并收集沉淀；(6)收集步骤(3)和步骤(5)得到的沉淀，50～60℃，0.08～0.1MPa，干燥12～24小时后，经粉碎即得回收后的蛋白质。本专利技术采用常规的双缩脲法检测鱼穈漂洗液和上清液的蛋白质浓度，并根据下述公式计算蛋白质回收率。本专利技术的蛋白质回收率为85～95％。R(％)：蛋白质回收率；C0：鱼糜漂洗液蛋白质浓度；V0：鱼糜漂洗液体积C：最终得到的上清液蛋白质浓度；V：最终得到的上清液体积本专利技术具有以下显著优点和有益效果：(1)本专利技术针对带鱼鱼穈漂洗液中不同等电点的蛋白质进行絮凝法回收，申请人前期研究发现，带鱼鱼穈漂洗液中的蛋白质的等电点为pH4～6和pH9～10，采用先添加复合絮凝剂(壳聚糖-阳离子聚丙烯酰胺)回收等电点为pH4～6的蛋白质，再添加阴离子聚丙烯酰胺回收等电点为pH9～10的蛋白质；与仅针对蛋白质等电点在酸性pH或碱性pH的回收法相比，本专利技术实现了带鱼鱼穈漂洗液蛋白质的最大限度的回收。(2)本专利技术先采用复合絮凝剂(壳聚糖-阳离子聚丙烯酰胺)对等电点在pH4～6的蛋白质进行絮凝回收，与仅使用一种絮凝剂(壳聚糖或阳离子聚丙烯酰胺)相比，提高了蛋白质的回收率。(3)本专利技术利用向鱼穈漂洗液中添加壳聚糖-阳离子聚丙烯酰胺、阴离子聚丙烯酰胺等絮凝剂的方法回收蛋白质，具有工艺简便、处理成本低、周期短等优点，对于降低带鱼鱼穈漂洗液的化学需氧量(COD)，保护环境具有重要意义。具体实施方式下面给出4个优选实施例，但本专利技术不仅局限于以下实施例。实施例1：将带鱼去头、尾和内脏，手工采肉，绞碎，称取鱼肉1kg，用4℃，0.3％NaCl溶液作为漂洗液，漂洗时控制鱼肉和漂洗液的比例为1:3，即将1kg鱼肉加入到3kg漂洗液中，先慢速搅拌7分钟，再静置12分钟后用四层纱布过滤，重复漂洗1次，得到鱼穈漂洗液；向鱼穈漂洗液中加入1.0g/L壳聚糖(用乙酸配制成溶液，浓度为1％，)和0.02g/L阳离子聚丙烯酰胺(用水配制成溶液，浓度为0.025％)本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：向带鱼鱼穈漂洗液中添加壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺构成的复合絮凝剂，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；然后向上清液中加入作为絮凝剂的阴离子聚丙烯酰胺，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；两次的沉淀合并、干燥得到蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：向带鱼鱼穈漂洗液中添加壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺构成的复合絮凝剂，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；然后向上清液中加入作为絮凝剂的阴离子聚丙烯酰胺，混合均匀、离心取上清液并收集沉淀；两次的沉淀合并、干燥得到蛋白质。2.根据权利要求1所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述的带鱼鱼穈漂洗液，其具体的制备方法为：将带鱼鱼肉绞碎，然后将鱼肉加入到作为漂洗液的4℃、0.3％NaCl溶液中，先慢速搅拌5～15分钟，再静置10～30分钟后用多层纱布过滤，得到鱼穈漂洗液，上述漂洗过程重复1～3次，合并多次漂洗过滤的滤液得到鱼穈漂洗液。3.根据权利要求1所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述的壳聚糖和阳离子聚丙烯酰胺在带鱼鱼穈漂洗液中的浓度分别为1.0g/L～3.0g/L、0.02g/L～0.08g/L。4.根据权利要求3所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述的壳聚糖是先用乙酸配制成质量浓度为1％的壳聚糖溶液的形式加入到带鱼鱼穈漂洗液中的。5.根据权利要求3所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述的阳离子聚丙烯酰胺是先用水配制成质量浓度为0.025％的阳离子聚丙烯酰胺溶液的形式加入到带鱼鱼穈漂洗液中的。6.根据权利要求1所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述加入到上清液的阴离子聚丙烯酰胺在上清液中的浓度为0.025g/L～0.075g/L。7.根据权利要求6所述的从带鱼鱼穈漂洗液中回收蛋白质的方法，其特征在于：所述的阴离子聚丙烯酰胺是先用水配制成溶液质量浓度为0.025％...

【专利技术属性】
技术研发人员：靳挺，武玉学，
申请(专利权)人：浙江大学宁波理工学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33