阿马多瑞反应化合物及产物，其生产方法和用途技术

式为Ｒ↓［１］－ＮＨ－Ｒ↓［２］（Ｒ↓［１］和Ｒ↓［２］的定义详见权利要求书）的新的阿马多瑞反应化合物。式为Ｒ↓［１］′－ＮＨ－Ｒ↓［２］′（Ｒ↓［１］′和Ｒ↓［２］′的定义详见权利要求书）的化合物及该些化合物的组合物，它们是用于生产药物制剂，该制剂与人的白细胞接触产生干扰素和其他的组织介素（ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ）。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及新的阿马多瑞反应化合物和产物，其生产方法以及这些化合物和产物的新用途。所说化合物和产物至少有部分经过如以下反应系统的阿马多瑞氏重排和/或美拉德反应 阿马多瑞反应产物是已知的，它们是反应产物，例如，氨基酸或肽与糖、寡糖或多糖经过阿马多瑞氏重排的产物(J.Biol.Soc、215(1955)Henri Borsook等人)。所以，在DE-3-3914354中描述了从燕麦种子提取的氨基酸和糖的水溶性糖蛋白。还有，EP-A-406087描述了衍生自革兰氏阳性细菌的细胞壁的水溶性多糖-糖肽复合物，而且J.Boil.Chem.1985，260/9指出由蛋白质的游离氨基与糖反应生成的阿马多瑞反应产物已用NMR-光谱学作了说明。本专利技术现在描述如同权利要求1描述的具体的新的阿马多瑞氏重排的化合物。优选和改进的方案是在权利要求2至4中描述。在生物活性物质试验反应中上述化合物还原铁氰化钾。所说活性物质是由糖和氨基酸反应生成的。本专利技术还涉及如权利要求11至17描述的上述化合物的新用途，同时，是一般的糖和氨基酸的阿马多瑞反应产物的新用途。过去没有人就生物活性试验过阿马多瑞产物提取物提纯的各种步骤(为了除去惰性物质(ballast substances和杂质)。来源于天然的免疫刺激药物，如槲寄生属(mistletoe)提取物，泥炭提取物等，已确知其缺点在于处理大量材料需昂贵的费用，且只获得几克的活性物质;不能控制杂质，因而可能导致毒性和副作用，由于复杂性质和几乎不能重现的组分，当实际使用时还存在给药问题。来源于人造的同性质的产物或产物混合物，如干扰素或其他遗传工程方法则费用更昂。而且，对于渗入人的细胞壁来说，人的干扰素的分子量通常都太大，因此，所施药剂只有小部能有效地起作用。而遗传工程的产物通常也有副作用，有些甚至有毒性。而且，它们之中有些只在一天能有效地起作用，而第二天则不起作用，其原因至今未明。现在，意想不到地发现几乎任何经过至少部分阿马多瑞氏重排的简单氨基酸/糖复合物没有显示以上所说的缺点，相反，有意想不到的免疫活性。因此，它们可用于药物的配方和美容剂。这些低分子容易渗入细胞壁，实际上起了营养物的作用。它们诱导包括肿瘤坏死因子的天然干扰素和其他组织介素(cytokines)的形成。即使给药后三天，它们仍然显示生物活性的刺激效果。该效果随着阿马多瑞氏重排的复合物的增加而增大，再随着复合物的分解的增大而减小。单糖也可用多糖代替，最好是低分子量的，尤其是分子量小于1000道尔顿的多糖代替，例如葡聚糖，其反应相似。多糖显示生物活性，且它们变成寡糖后可保留一些生物活性。在此之前，人们对这些化合物的生物活性了解甚少。今发现这些物质的混合物与人的白细胞接触产生干扰素和其他的组织介素。这叫做多细胞激活性(poly clonal activation)。在这些化合物影响下，试验产生的物质和检验生物活性是可能的。所说生物活性是以与特殊的组织介素有关的国际单位表示的。这些化合物在纯物质浓度在1-100μg/ml的范围内有特别高的生物活性。在分子里，氨基酸的特性比分子里糖部分的性质更重要。在经过阿马多瑞氏重排的L-天门冬氨酸与葡萄糖或半乳糖的反应产物，当与人的白细胞接触，并在37℃，于5%CO2的气氛下，在组织培养介质中培育20小时将可产生30-1000抗病毒单位的干扰素。该干扰素是以用人的癌细胞的生物检定测量的。在这些化合物的影响下，肿瘤坏死的化合物也可产生。具有上述意想不到的用途的产物的通式为R1′代表衍生自单糖、寡糖和多糖的1-氨基-1-去氧-2-酮糖残基，所说多糖最好是低分子量的，尤其是分子量小于1000道尔顿的;R2′代表氨基酸残基或肽残基，所说肽残基，最好是低分子量的，尤其是分子量小于1000道尔顿的。因此，生物活性化合物包括上述的特殊的阿马多瑞氏重排的化合物或不同氨基酸化合物的N-取代的衍生物和一种的单糖、寡糖或多糖，或一种氨基酸化合物的N-取代的衍生物和多种的单糖、寡糖和/或多糖，或这些衍生物的其他任何组合，它们中的每一个组合都有足够的生物活性。所说多糖最好是低分子量的，尤其是分子量小于1000道尔顿的。在上式中，优选的R1′可以是选自D-型单糖残基，尤其是(但不是唯一)选自以下化合物的残基D-型葡萄糖、木糖、半乳糖、鼠李糖、果糖、甘露糖、6-去氧-葡萄糖、葡糖胺和半乳糖胺;R2′可以是选自L-型氨基酸的或所说氨基酸的任何组合的其他的肽的残基，所说氨基酸为丝氨酸、甘氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、蛋氨酸、酪氨酸、羟脯氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、赖氨酸和亮氨酸。本专利技术还涉及如权利要求5所描述的上述的化合物和产物的生产方法，借此产生下式的一种中间体，该式为其中R′是直碳链的C1-1-去氧残基或单糖或寡糖或多糖的任一种0-桥型。R″代表氨基酸残基或肽残基，所说中间体是至少有部分经过阿马多瑞氏重排和/或经过美拉德反应。该反应是连续加热反应混合物，最好在压力下，且同时或随后除去溶剂。该方法的优选方案是在权利要求6至10中描述。在某些情况下，尤其是当使用含有两个羧基的氨基酸时，在该方法中加入缓冲盐是有利的，所说缓冲盐如碳酸氢钠，其摩尔比最好为1∶1。已发现阿马多瑞产物较易分解，且分解产物有暗褐色和焦油般的性质，但组成未明的化合物已失去它们的生物活性。所以，最好在反应混合物变为淡橙棕色时就停止阿马多瑞氏重排反应。值得注意的是，当原不透明的氨基酸溶液变为清澈时(阿马多瑞氏重排之前)生成的中间体反应物易水解，即该反应是可逆的。随着重排的增加，可逆性减小，即产物变为更稳定，且颜色逐渐由淡黄色变为淡橙色，最后，当阿马多瑞氏重排象是完成时则变为橙棕色。由重排反应中取出并试验(按下文所述的各种方法)的样品证实随着阿马多瑞氏重排处理，生物活性增大，而进一步加热导致分解时，生物活性减小。所说分解，其征兆是颜色变为暗褐色。如果反应混合物含有别的酮基和/或含硫的氨基酸，如半胱氨酸时，铁氰化物迅速还原，且会发生颜色变化;否则，它在3至5分钟内就会发生，这是对阿马多瑞氏重排发展程度的一种很好检查方法。未反应的糖只在半个小时或几个小时后将显示颜色变化。分离纯阿马多瑞氏重排产物是按已知方法进行的，该方法是基于将混合物装于强阳离子交换剂(如Amberlite(R)或Dowex(R))，以水连续地洗涤，在减压下蒸发洗出液的已选择的确定部分，将纯化合物置于无水甲醇中结晶(J.E.Hodge and B.E.Fisher，Methods in Carbohydrate Clemistry，Vol.Ⅱ，Reactions of Carbohydrates，1963 Academic Press，N.Y.London，1963，Page 105-106;or Borsook at al.as quotedearlier)。按照本专利技术的方法，所有上述的衍生自单糖和氨基酸化合物的优选的残基保持不变。此外，优选的糖作用物的混合物包括D-型的葡萄糖、木糖、半乳糖、鼠李糖和果糖，它们的重量比为20∶10∶4∶1∶1，而优选的氨基酸作用物包括L-型的丝氨酸、甘氨酸、组氨酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式所示的一种阿马多瑞氏重排的化合物Ｒ↓［１］－ＮＨ－Ｒ↓［２］其中Ｒ↓［１］包括衍生自糖残基的１－氨基－１－去氧－２－酮糖，所说糖残基最好是Ｄ－型的糖残基，该糖残基选自以下的糖的残基：葡萄糖、木糖、半乳糖、鼠李糖、果糖、甘露糖、２－去氧－葡萄糖、６－去氧－葡萄、葡糖胺和半乳糖胺；Ｒ↓［２］包括氨基酸残基或肽残基，该肽残基最好是低分子量的，尤其是分子量小于１０００道尔顿的，最好是Ｌ－型的，选自下列的氨基酸：丝氨酸、甘氨酸、脯氨酸、组氨酸、精氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、天门冬酰胺、蛋氨酸、酪氨酸、羟脯氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、赖氨酸和亮氨酸。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：JZ米奥杜祖斯基，K维基韦兹，A英格罗特，
申请(专利权)人：托夫企业公司，
类型：发明
国别省市：LI[列支敦士登]