制备无菌高分子量透明质酸制剂的方法技术

一种制备含有规定浓度的高分子量透明质酸盐（ＨＡ）的随时可用的无菌水性药物制剂的方法，包括下列步骤：提供含有浓度低于规定最终浓度的高分子量ＨＡ的水性制剂；将所述水性制剂通过孔径小于０．４５μｍ的过滤器；真空煮沸去掉水分，浓缩所述水性制剂，直至达到规定最终浓度。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种制备无菌高分子量透明质酸盐作为最终药用制剂的方法。盐形式的透明质酸可以包括例如透明质酸钠、透明质酸钾、透明质酸镁、透明质酸钙或其它透明质酸盐透明质酸是一种生物来源的粘多糖，其在自然界广泛分布。例如，已知透明质酸存在于各种动物组织例如脐带、滑液、玻璃体液、公鸡冠和各种结缔组织例如皮肤和软骨中在化学上，透明质酸是一种氨基葡聚糖，它由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基葡萄糖的交替重复单元组成，形成了分子量至多13×106道尔顿的直链。在本专利技术的含义中，高分子量透明质酸是平均分子量不低于0.5×106道尔顿的透明质酸。透明质酸或其盐的药学应用在文献中有大量描述。由于透明质酸是一种非免疫原性物质，具有粘弹性和亲水性，多年来，它被用作眼玻璃体或关节液的代替物或在眼外科中用作支持介质，就像例如Balazs的US-A-4,141,973中公开的那样。在关节液中，粘性透明质酸溶液作为润滑液给细胞提供保护环境，由于这个原因，它被用于炎性膝关节的治疗。EP-A-0 781 547公开了用于眼外科的以透明质酸钠为基础的眼科制剂。EP-A-0 719 559公开了在依靠准分子激光器进行的治疗性光角膜切除术中，透明质酸钠粘溶液用作封闭液。EP-A-0 875 248公开了透明质酸或其药学可接受的一种盐在制备用作关节内灌洗液的水溶液中的用途。Chemedica S.A.的EP-A-0 698 388公开了含有透明质酸盐作为粘度增稠剂的用作人工泪液的眼科制剂。透明质酸或其盐的药学应用需要高纯度的无菌产品。可以从动物或微生物来源例如脐带、公鸡冠或从链球菌A和C中提纯透明质酸，就像Balazs的US-A-4,141,973、Romeo等人的US-A-5,559,104和WO 00/4925中公开的那样。透明质酸的工业提纯运作通常产生干粉形式的透明质酸盐，例如透明质酸钠。纯化的药用级干粉可以用于制备例如用于各种药学用途例如关节间注射液、滴眼液或玻璃体液代替物的水性药物制剂。制备随时可用的药物制剂的普通工业方法包括将给定重量的透明质酸钠与精确体积的水、以及根据具体情况而定的盐例如氯化钠和缓冲液例如磷酸盐缓冲液和其它赋形剂混和。由于药用制剂的浓度和组成应该保持在精确的给定范围之内，制剂的各个组分要仔细度量。然后将制剂灌装到容器例如注射器和随时可用的给定剂量的小瓶中。装入容器后，通常在大约121℃用高压灭菌器将制剂灭菌十五分钟或更久。使用加热灭菌透明质酸带来的一个问题是已知对形成HA的分子链的断裂有影响，从而降低HA的平均分子量。透明质酸的高分子量是一种重要的药理学性质。在很多制药申请中，不希望制剂中含有低分子量透明质酸，例如由于US 4,141,973中报道的低分子量HA的炎性作用，以及高分子量HA有益的reological性质的丧失。为了补偿给定浓度制剂中的HA在上述灭菌法中的降解，最初用于制备制剂的透明质酸或其盐具有的平均分子量要高于最终制剂需要的最低平均分子量。由于当需要的平均分子量增加时，来源于起始原料的透明质酸的产量降低了，这无论如何是不经济的。另一种已知的透明质酸灭菌方法是过滤。这项技术被用在制备浓缩形式、通常是干粉形式的纯化透明质酸盐的传统工业运作中，由此通过过滤器过滤低浓度的水溶液，随后干燥。在例如欧洲专利申请EP 867453和PCT申请WO 00/44925中描述了这种灭菌步骤。在这些申请中，也公开了用于灭菌的孔径小至0.22μm的过滤器。基于已知的最小细菌缺陷假单胞菌，0.22μm孔径的过滤器具有1比107个细菌的细菌竞争性，而0.45μm孔径的过滤器具有1比104个细菌的细菌竞争性(也基于缺陷假单胞菌)。由于这个原因，小于0.45μm孔径的过滤器被考虑用来灭菌。在传统工业运作中，过滤灭菌法已知不用于制备随时可用的高粘度药物制剂，因为高粘度水性药物制剂中需要的HA浓度通常为1到2％wt/v，不是所有的透明质酸都通过0.22μm的过滤器。由于这导致了浓度变化和/或透明质酸损失，过滤灭菌法用来制备随时可用的高粘度药物制剂是有问题的。在US 5,093,487中，描述了过0.22μm过滤器灭菌的、含有高分子量透明质酸钠的随时可用的水性药物制剂的制备。然而该专利中描述的灭菌方法依赖于透明质酸水性制剂通过0.22μm过滤器的次数，以致于不可逆转地降低了透明质酸的粘度。根据该出版物，考虑到由多次通过过滤器导致的透明质酸粘度的降低，含有1％或更高浓度HA的水性药物制剂的灭菌是有可能的。该申请中还表明，粘度降低却并没有降低HA的分子量。不想对上述出版物中报道的结果的准确性提出见解，对于很多制药申请例如关节内申请来说，HA粘度降低是不希望的。本专利技术的一个目的是获得含有透明质酸盐的随时可用的无菌水性药物制剂，它是无菌的、生产节省的，尤其在工业条件下。提供制剂成分的浓度具有狭窄规定公差的制剂是有利的。通过制备权利要求1的高分子量透明质酸的无菌药用制剂的方法已经实现了本专利技术的目的。此处公开的是制备含有规定最终浓度的高分子量透明质酸盐(HA)的随时可用的无菌水性药物制剂的方法，包括下列步骤-提供含有浓度低于规定最终浓度的高分子量HA的水性制剂；-使所述水性制剂通过孔径小于0.45μm的过滤器；-真空煮沸去掉水分，浓缩所述水性制剂，直至达到规定的最终浓度。有利地，作为分子量的函数，过滤之前水性制剂降低的浓度减小了粘度，使得全部HA通过过滤器并被灭菌成为可能，接下来的真空煮沸确保了HA的热依赖性降解基本上没有发生。该方法很适用于工业环境，是非常经济的，它允许含有HA的药物制剂的随时可用剂量能被装到无菌容器中，而不用进一步灭菌。另一个优点是，该制剂是微生物稳定的，在用作药物制剂前可以保持数个星期。HA水溶液的粘度是一种性质，它取决于几个参数，例如分子量、浓度、温度、盐的浓度和质量、pH以及用于溶液的剪切速率。较高的分子量和浓度增大粘度，而较高的剪切速率和盐减小粘度。关于温度，HA具有滞后行为，就像M.Cardones等人在″HysteresisBehavior of Sodium Hyalurona te Solutions during Heating andCooling″，Clear Solutions Biotech，Inc.，Technical Rep 01中报道的那样。升高或降低温度会不规律地增大和减小粘度。在60℃和70℃之间，可能得到溶液的最低粘度。因此，这种滞后性质可以用于减小或增大溶液的粘度，但必须考虑到HA链的降解与温度以及该温度的持续时间成比例。在过滤后的浓缩步骤过程中，当达到随时可用药物制剂的规定浓度时，为了停止真空煮沸，可以实时监控HA浓度。监控或测量过程可以有利地用带有放在制剂中的感应柱的分光光度计来进行，紫外线(UV)范围内的放射吸收与HA浓度成比例。本专利技术特别有利的特征是，它不需要混和精确量的水和透明质酸来获得规定浓度，也不需要确保在整个过程中一直保持该浓度。相反，最初HA和水混合物具有比最终制剂低的近似浓度，从而简化了程序。在浓缩步骤使用的真空优选低于200毫巴绝对压力，优选在30到60毫巴的范围内，例如40毫巴，由此，沸腾温度大约为26到28℃。在该压力下，工业装置可靠地运行是本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制备含有规定浓度的高分子量透明质酸盐（ＨＡ）的无菌的随时可用的水性药物制剂的方法，包括下列步骤：－提供含有浓度低于规定浓度的高分子量ＨＡ的水性制剂；－将所述水性制剂通过孔径小于０．４５μｍ的过滤器；－真空煮沸去掉 水分，浓缩所述水性制剂，直至达到规定最终浓度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：S卡里诺，
申请(专利权)人：梅迪多姆实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]