催产素拮抗剂及其组合物和用途制造技术

由下式代表的催产素拮抗剂： ＊＊＊ 其中（Ｓ）Ｐｍｐ为β，β－（３－硫代－１，５－亚戊基）－β－巯基丙酸，Ｄ－Ｔｒｐ为右旋色氨酸Ｉｌｅ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｐｅｎ（Ｐｅｎ＝青霉胺）、Ｐｒｏ和Ａｒｇ分别为左旋的异亮氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、脯氨酸和精氨酸。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种作为催产素拮抗剂具有高活性并且对加压素具有很轻拮抗作用的新的化合物。专利技术背景在美国，未足月分娩是导致产前发病和产前死亡的主要因素，目前采用的防止未足月分娩的一些方法并不总是有效的并经常伴有明显的副作用。由于子宫是催产素的靶器官并且推测催产素是引起未足月分娩的一个重要因素，所以开发一种强力催产素拮抗剂将能够成功地防止末足月分娩并极少伴有副作用。催产素(OT)和抗利尿激素(ADH)，也称加压素，在结构上是类似的。他们比较结构如下所示 催产素(OT) 加压素(ADH)文献中已报道了在合成用于治疗高血压的ADH拮抗剂和合成催产素拮抗剂方面的各种研究结果。1960年，Law，H·D·和V·DuVigneaud在J.Am.Chem.Soc，824579中首次报道合成了一种催产素拮抗剂(2-O-甲基酪氨酸-OT)。1967年，Chan，Fear和DuVigneaud在Endocrinology，811267中报道了1-L-青霉胺-催产素和1-脱氨基青霉胺-催产素的合成。这是第一次研究显示了一种催产素拮抗剂在麻醉大鼠中对子宫收缩的体内抑制效果以及对催产素的反应。1980年，Sawyer等人在Endocrinology，10681中报道了一种结合Law和DuVigneaud拮抗剂及Chan等人的拮抗剂两个重要特性的催产素拮抗剂的合成。这种新的拮抗剂是(1-脱氨基青霉胺，2-O-甲基酪氨酸)催产素。经催产素生物检定测得这种新的拮抗剂的pA2为7.8。pA2是将对拮抗剂的反应降至1/2时的拮抗剂摩尔浓度的负对数，其定义见Schild，British J.Pharmacology2189(1947)。1983年，Manning等人在J.Med.Chem.，261607-161中报道合成了一些ADH拮抗剂。已证实这些拮抗剂的一种是具有潜在的抗催产素活性的pA2为8.2的精氨酸加压素，或者换句话说其比Sawyer等人在1980年报道的拮抗剂的强度高2.5倍(见第1610页，表I，化合物1号)。这一催产素拮抗剂可以被称为催产素。Wilson和Flouret在Abstract for Society forthe Study of Reproduction Meeting July14-17，1986中披露了一种相关的催产素拮抗剂，催产素。1981年Melin等人，Endocrinology，88173，开发了一种用于抑制未足月分娩的催产素拮抗剂，他们合成了pA2为7.2的1-脱氨基乙基催产素。他们还证实这一化合物在大鼠中能在体内抑制子宫收缩，而对于人类，在体内和体外均可抑制子宫收缩(Akerland等人，Obstet.and Gynecol.，62309，1983。1985年Akerland等人在Obstet.and Gynecol.Scand.，64499中报道合成了pA2为8.3的1-脱氨基加压素，他们在体外条件下于人体子宫组织上测试了这一化合物并证实其抑制子宫收缩。美国专利4,597,901公开了一族加压素拮抗剂，其中催产素和加压素中均存在半胱氨酸-1并被β，β-环戊二烯并亚甲基-β-巯基丙酸取代。加压素的其它氨基酸被取代，由此产生的一组化合物被称为加压素拮抗剂，其生物学活性为利尿的。本专利技术的概述本专利技术包括一种为催产素的类似物的催产素拮抗剂。在本专利技术的化合物中，催产素的半胱氨酸-1被β，β-(3-硫代-1，5-亚戊基)-β-巯基丙酸所取代。另外左旋酪氨酸-2被右旋色氨酸取代，青霉胺在6位被1-半胱氨酸取代以及左旋精氨酸在8位被左旋亮氨酸取代。由此得到的化合物催产素据信是新的并现具有显著的特性，其作为催产素拮抗剂是高活性的。同时，虽然这种新化合物与文献中描述的加压素和加压素拮抗剂的结构类似，但其展现了极小的ADH拮抗作用。当这两种拮抗作用以比值表达时，本专利技术的化合物具有非常高的抗催产素/抗ADH活性比。这种性质的结合特别有利于治疗用途，可以获得有效的抗催产素效果而仅具有最小的抗ADH副作用。因此本专利技术的化合物在对体内催产素进行反应时适合用于子宫肌肉的收缩，从而可用于防止未足月分娩。本专利技术的详细描述本专利技术的催产素拮抗剂由下式代表 其中Pmp为β，β-(3-硫代-1，5-亚戊基)-β-巯基丙酸，D-Trp为右旋色氨酸。Ile、Gln、Asn、Pen(Pen＝青霉胺)、Pro、Arg分别为左旋的异亮氨酸、谷氨酰胺、天门冬酰胺、脯氨酸和精氨酸。以下将描述通过生物检测而证实的本专利技术的新化合物的显著特性。催产素生物检测用于催产素生物检测程序的流程方法是从Sawyer等人发表在Endocrinology，10681(1980)上的论文中所描述的方法衍生而来的，而Sawyer等人的方法又是基于Munsick，Brit。J.Pharmacol.，3328(1960)和Holton，Brit.J.Pharmacol，3328(1948)的报道。Schild，British J.Phar.macology，2189(1947)描述了用于pA2估值(estimates)的分析计算。本程序与本领域其他人报道的那些程序的主要区别在于将收缩面积求积分，而大多数其它技术是计算幅度。虽然积分法的pA2估值比用收缩幅度作为终点所报道的pA2估值大约低一个数量级，但积分法提供了更一致和更可靠的结果。方法1.动物处于自然发情期的纯种大鼠(Holtzman)的子宫的一块1.5cm的部分用于检测。2.缓冲液/检测浴所用缓冲液为Munsick缓冲液，这一缓冲液含有可降低pA2估值的0.5mM Mg++，但所报道的结果与体内试验数据(Sawyer等，1980)的相关性更好。用95％氧气和5％二氧化碳连续向缓冲液充气，以使pH为7.4。检测浴的温度为37℃，使用了含有保温水夹套和加入及排放缓冲液的入口和出口管的10ml检测浴。3.多种波动描记器/传感器用于检测的该块子宫组织的一端被固定；另一端与Statham Strain Gauge Forcc Transducer连接，后者与Grass PolygraphModel79相接以监控收缩。4.检测程序(a)将所述的组织放入检测浴中平衡1小时，其间每15分钟用新鲜缓冲液洗一次，全程均保持组织上的张力为1克。(b)最初用10nM催产素刺激组织以使组织“适应”并用4mMKCl刺激以确定最大收缩反应。(c)随后用催产素确定累加剂量反应曲线，并用相当于最大反应的约80％时的催产素浓度估算拮抗剂的pA2。(d)将组织在催产素(Calbiochemical，San Diego，California)中暴露1分钟后洗去催产素，在加入下一剂量兴奋剂或拮抗剂之前有3分钟间隔。当测试拮抗剂时，在给予兴奋剂之前5分钟给予拮抗剂，兴奋剂的给予时间为1分钟。用7P10 Grass Integrator对所有反应求积分。这就是本程序与文献中的其它程序的主要区别，后者通常测量收缩的幅度作为反应。相当于最大反应的80％时的单一浓度的催产素被用来测试拮抗剂，使用了三种不同浓度的拮抗剂，其中两种将使对兴奋剂的反应降低不超过50％，而另一种将使所述反应降低超过50％(理论上这种关系应为25％、50％、和75％)。对于三点检测，每本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：乔治·弗洛里特，莱尔德·威尔逊，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：