嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂、其制备方法及应用技术

本发明专利技术属于药物化学领域，公开了嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂、其制备方法及应用。本发明专利技术将嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物与LSD1化合物结合制备系列具有抗肿瘤活性化合物。合成方法可行，收率高。该类化合物的结构通式为：

LSD1 inhibitors of pyrimidine 1,2,4 - three azole, process for their preparation and their use

The invention belongs to the field of medicinal chemistry, and discloses a LSD1 inhibitor of pyrimidine - 1,2,4 - three azole, a preparation method and an application thereof. The present invention combines a pyrimidine 1,2,4 - three azole compound with a LSD1 compound to prepare a series of antineoplastic compounds. The synthesis method is feasible and the yield is high. The general formula of the compound is:

【技术实现步骤摘要】
嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂、其制备方法及应用
本专利技术属于药物化学领域，具体涉及一类嘧啶并1,2,4–三氮唑结构单元的化合物、制备方法及其在制备以组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶(以下简称LSD1)为靶标的抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
肿瘤是严重威胁着人类疾病，尽管已上市的抗肿瘤药物很多，但这些药物中依然存在一些不足，比如产生较大毒副作用、靶向性弱以及容易产生耐药性等。靶向药物不仅效果好而且副作用比常规的治疗方法小得多，因此，其研发越来越受到重视。共价修饰在表观遗传中非常重要，组蛋白共价修饰包括组蛋白磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化等，目前对组蛋白修饰机制中的乙酰化与甲基化研究比较多。组蛋白甲基化在2004年之前被认为永久不可逆的，LSD1是被首次发现可逆催化去除组蛋白H3K4和H3K9的单、双甲基化，进而调节组蛋白与其他蛋白的相互作用。LSD1在肿瘤细胞中表达量明显高于正常细胞，包括前列腺癌、肺癌、乳腺癌、膀胱癌、神经母细胞瘤、眼癌等。实验证明，一方面可以通过RNAi技术在细胞水平降低LSD1表达量；另一方面，利用小分子抑制剂在细胞水平降低LSD1的活化能抑制细胞增殖；同时诱导一些细胞分化相关基因的表达。LSD1抑制剂作为表观遗传学用于阐述生物学功能的研究工具，因此，其可以作为用于肿瘤预防和治疗的表观遗传学药物，已引起科学界的研究热潮。另外，已有报道证实，嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物有广泛的生物活性，例如抗肿瘤、抗炎、抗病毒以及抗菌等。但是将嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物与LSD1相联系起到抗肿瘤作用的报道很少，所以该方向具有非常重要的研究价值。
技术实现思路
本专利技术的目的一方面在于提供该类化合物的制备方法，及其在LSD1抑制剂和抗肿瘤药物中的应用；另一方面是提供嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物，为寻找针对LSD1为靶点的新型抗肿瘤药物开辟新途径。本专利技术所涉及的结构通式为：R为下列基团：此类嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物的制备路线如下：(1)化合物3的制备方法：丙酮中，将2-氨基-5-巯基-1，2，4-三氮唑(1)在碱性条件下与苄氯(2a)或2-氯甲基苯并咪唑(2b)反应，薄层色谱监测反应体系，待反应完全，所得产物经抽滤，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得化合物3a或3b。所用的碱为三乙胺或碳酸钾、碳酸钠中的一种，反应温度60-70℃。(2)化合物4的制备方法：冰醋酸中，将化合物3加入反应瓶中，随后缓慢滴加乙酰乙酸乙酯，反应温度110-120℃。薄层色谱监测反应体系，待反应完全，将体系倒入冰水中，清洗，干燥，得到化合物4a或4b。(3)化合物5的制备方法：将化合物4加入至反应瓶中，缓慢滴加三氯氧磷，反应温度80-90℃。薄层色谱监测反应体系，待反应完全，将反应体系缓慢滴加入冰水中，经清洗，萃取，干燥，抽滤，得化合物5a或5b。(4)化合物6的制备方法：乙醇中，将化合物5加入反应瓶后，加入R-H，常温反应。薄层色谱监测反应体系，待反应完全，固体析出，抽滤，滤饼，得化合物6。R基团同上。本专利技术优点：将嘧啶并1,2,4–三氮唑类化合物与LSD1化合物结合制备系列具有抗肿瘤活性化合物。合成方法可行，收率高，总收率达69％以上。将该类化合物可以应用于以组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶(以下简称LSD1)为靶标的抗肿瘤药物中，为针对LSD1为靶点的新型抗肿瘤药物开辟了新途径。具体实施方式为了对本专利技术进行更好的解释，实施例如下：实施例1化合物3a的制备将2-氨基-5-巯基-1，2，4-三氮唑(1g，8.61mmoL)和碳酸钠(1.37g,12.92mmoL)加入至反应瓶中后，加入20mL丙酮，缓慢滴加苄氯(1.13mL，9.47mmoL)在60℃下回流反应，TLC监测反应。反应结束后，直接抽滤，滤液经柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得到纯品。产率67.57％，白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.41-7.18(m,5H),4.34(s,2H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ152.19,147.08,136.55,128.79,128.43,127.48,35.41.HRMS(ESI):m/zcalcdforC9H9N4S(M-H)-,205.0548；found,205.0548.化合物4a的制备将化合物3a(1g，4.85mmoL)加入至反应瓶，加入冰醋酸20mL后，缓慢滴加乙酰乙酸乙酯(612.57μL，4.85mmoL)在120℃加热回流，TLC监测反应。反应结束后，将反应体系，投入冰水中，有大量白色固体析出，直接抽滤得白色固体。将固体置于60℃烘箱中干燥6h得纯品化合物4a。产率84.83％，白色固体。熔点240-245℃。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.17(s,1H),7.44(d,J＝7.1Hz,2H),7.32(t,J＝7.3Hz,2H),7.26(d,J＝7.2Hz,1H),5.80(s,1H),4.43(s,2H),2.29(s,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ161.92,154.75,151.09,150.63,137.35,128.77,128.38,127.22,98.46,34.48,18.43.HRMS(ESI):m/zcalcdforC13H11N4OS(M-H)-,271.0654；found,271.0660.化合物5a的制备将化合物4a(1.12g，4.11mmoL)加入至反应瓶中，缓慢滴加20mL三氯氧磷，在90℃加热回流，TLC监测反应。反应结束后，将反应体系小心缓慢滴加入冰水中，期间会放出大量的热，会有淡黄色固体析出即化合物Ⅳ，用二氯甲烷萃取，无水硫酸镁干燥2h后，抽滤，浓缩得纯品化合物5a。产率91.98％，浅绿色固体。HRMS(ESI):m/zcalcdforC13H12ClN4S(M-H)-,291.0471；found,291.0463.化合物6a的制备将化合物5a(150mg，515.87μmoL)和3,4,5-三甲氧基苯胺(94.51mg，515.87μmoL)加入反应瓶中，加入2mL乙醇，常温反应，TLC监测反应进行。反应结束后，有大量固体析出。直接抽滤，得滤饼。将滤饼置于60℃烘箱干燥6h后得纯化合物6a。白色固体。熔点：196-207℃。产率79.12％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.95(s,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,2H),7.32(t,J＝7.4Hz,2H),7.26(d,J＝7.2Hz,1H),6.76(s,2H),6.40(s,1H),4.54(s,2H),3.78(s,6H),3.69(s,3H),2.40(s,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ164.46,164.00,155.76,153.24,145.14,138.02,135.67,132.32,128.90,128.43,127.21,102.55,89.64,60.08,56.02,34.49,24.66.HRMS(ESI):m/zcalcdforC22H22N5O3S(M-H)-,436.1443；found,436.本文档来自技高网...

【技术保护点】
嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂，其特征在于，其结构通式如通式I或通式II：

【技术特征摘要】
1.嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂，其特征在于，其结构通式如通式I或通式II：R为下列基团其中之一：2.制备如权利要求1所述的嘧啶并1,2,4–三氮唑类的LSD1抑制剂的方法，其特征在于，通过如下步骤实现：(1)化合物3的制备方法：丙酮中，将2-氨基-5-巯基-1，2，4-三氮唑(1)在碱性条件下与苄氯(2a)或2-氯甲基苯并咪唑(2b)于60-70℃下反应，薄层色谱监测反应体系，待反应完全，所得产物经抽滤，柱层析得化合物3a或3b；所用的碱为三乙胺或碳酸钾、碳酸钠中的一种；(2)化合物4的制备方法：冰醋酸中，将化合物3a或3b加入反应瓶中，随后缓慢滴加乙酰乙酸乙酯，反应温度110-120℃，薄层色谱监测反应体系，待反应完全，将体系倒入冰水中，经抽滤，清洗，干燥，得到化合物4a或...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宏民，王帅，余斌，赵丽杰，郑甲信，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南,41