制备与树脂结合的环状肽的方法技术

本发明专利技术涉及以片段为基础固相合成与树脂结合的环状肽甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关蛋白类似物的方法，所述类似物含有至少一个在两个不相邻的氨基酸残基侧链之间的桥，本发明专利技术还涉及该方法所用的肽片段。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及以片段为基础制备与树脂结合的环状肽甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关蛋白类似物的方法，所述类似物含有至少一个在两个不相邻的氨基酸残基侧链之间的桥。更具体地讲，本专利技术涉及固相合成所述环状肽类似物的方法以及该方法所用的肽片段。
技术介绍
环状肽亚单位存在于多种具有有用的生物学活性的肽中，包括甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关的蛋白类似物、血管活性肽类似物、缩胆囊肽类似物、肿瘤坏死因子(TNF)衍生的肽、降钙素类似物、促生长素抑制素类似物、细胞粘着调节剂、生长激素释放因子(GRF)类似物、缓激肽拮抗剂、酪氨酸活化基元类似物(TAM模拟物)和糊精激动剂。特别感兴趣的是环状肽甲状旁腺激素(hPTH)类似物和甲状旁腺激素相关蛋白(hPTHrP)类似物。人甲状旁腺激素(hPTH)为钙体内稳态的主要调节物，是一个84个氨基酸的蛋白质。甲状旁腺激素相关蛋白(hPTHrP)为与hPTH具有N末端同源性的139-171个氨基酸的蛋白质。hPTH和hPTHrP的N末端片段，尤其是由氨基酸1-34组成的那些保留了亲代激素的全部生物学活性。hPTH(1-34)具有下面的氨基酸序列Ser-Val-Ser-Glu-Ile-Gln-Leu-Met-His-Asn-Leu-Gly-Lys-His-Leu-Asn-Ser-Met-Glu-Arg-Val-Glu-Trp-Leu-Arg-Lys-Lys-Leu-Gln-Asp-Val-His-Asn-Phe. hPTHrP(1-34)具有下面的氨基酸序列 Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala. hPTH的生物学活性反映在第二信使系统的活化中G-蛋白偶联的腺苷酸环化酶(AC)活性和G-蛋白偶联和未偶联蛋白激酶C(PKC)活性。就人和卵巢切除的大鼠中的骨形成而言，N末端片段hPTH(1-34)OH和hPTH(1-34)NH2已分别被证实是合成代谢的。这种骨生长的增加已证实与腺苷酸环化酶活性的刺激相偶联。这些N末端片段的类似物对于治疗与骨细胞钙调节相关的生理疾病具有显著的治疗功效包括低血钙；骨质疏松；骨质减少；和与骨质疏松和骨质减少相关的疾病，如甲状旁腺功能亢进、甲状旁腺功能减退和库欣综合症；糖皮质激素和免疫抑制诱导的骨质减少；骨折和骨再折术恢复。还已证实从hPTH(1-34)的N末端缺失多达6个氨基酸残基明显降低得到的类似物刺激腺苷酸环化酶的能力，同时对受体结合几乎没有影响。因此，在N末端截短高达6个氨基酸残基的hPTH(1-34)类似物抑制PTH的作用，可用于治疗特征为PTH过量的疾病，如甲状旁腺过量亢进和与甲状旁腺功能减退相关的高血钙危象、恶性高血钙疾病、肾衰竭和高血压。hPTH(1-27)-(1-34)的无环类似物公开在美国专利号4,086,196中。hPTH(1-34)和hPTHrP(1-34)的无环类似物公开在美国专利号5,589,452中。hPTH(1-34)公开在美国专利号4,656,250中。hPTH(1-34)和其N末端截短衍生物公开在美国专利号4,771,124和4,423,037中。PTH(1-34)的其它无环类似物公开美国专利号5,723,577和5,434,246，WO 97/02834、EPA561412-A1、EPA 747817-A2、WO-94/02510、WO 9603437和WO9511988-A1中。hPTH(1-28)NH2至hPTH(1-31)NH2和hPTH(1-28)NH2至hPTH(1-33)NH2的类似物描述在美国专利号5,556,940中。包括PTH的N末端截短类似物的PTH受体的无环拮抗剂公开在美国专利号5,446,130、5,229,489、4,771,124和4,423,037中。公开了hPTH和hPTHrP的单环和双环类似物。环(Lys26-Asp30)hPTH(1-34)NH2和环(Lys27-Asp30)hPTH(1-34)NH2公开在美国专利号5,556,940中。Barbier等(药物化学杂志1997，40，1373)描述了环(Lys26-Asp30)hPTH(1-31)NH2、环(Glu22-Lys26)hPTH(1-31)NH2和环(Lys27-Asp30)hPTH(1-31)NH2。hPTH(1-34)或hPTHrP(1-34)的单环和双环衍生物公开在专利文件WO96/40193、DE19508672-A2和A.Bisello等，生物化学1997，36，3293中。M.Chorev等，生物化学1991，30，5698公开了一种PTH受体的可能的拮抗剂，环(Lys13-Asp17)hPTH(7-34)NH2。且Kanmera等，“肽化学1993Okada，Y.，编蛋白质研究基础，Osaka，1994，321-324”描述了hPTHrP的一系列含酰胺的类似物。WO 98/51324公开了式I的环肽化合物X-A10-A11-A12-A13-A14-A15-A16-A17-A18-A19-A20-A21-A22-A23-A24-A25-A26-A27-YI或其可药用盐或前药，其中X选自(a)R1a-A0-A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-，(b)R1a-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-，(c)R1b-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-，(d)R1a-A4-A5-A6-A7-A8-A9-，(e)R1a-A5-A6-A7-A8-A9-，(f)R1a-A6-A7-A8-A9-，(g)R1a-A7-A8-A9-，(h)R1a-A8-A9-，(i)R1a-A9-，和(j)R1a-；Y选自 (a)-R3，(b)-A28-R3，(c)-A28-A29-R3，(d)-A28-A29-A30-R3，(e)-A28-A29-A30-A31-R3，(f)-A28-A29-A30-A31-A32-R3，(g)-A28-A29-A30-A31-A32-A33-R3，和(h)-A28-A29-A30-A31-A32-A33-A34-R3；R1a为H、烷基、芳烷基或-COR2；R1b为R1a或下式的基团 或 R2为烷基、链烯基、炔基、芳基或芳烷基；R3为式A35-OR4或A35-NR4R5的基团；R4和R5彼此独立地为H或低级烷基；R6和R9彼此独立地为H或烷基；R7为烷基；R8为H、烷基或COR2；R10为H或卤素；R11为烷基或芳烷基；m为1，2或3；n为3或4；A0不存在或为1-6个氨基酸残基的肽；A1为Ser、Ala、Gly或D-Pro或其等同的氨基酸；A2为Ala、Val或Gly或其等同的氨基酸； A3为Ala、Ser、Gly或D-Pro或其等同的氨基酸；A4为Glu、Ala或Gly或其等同的氨基酸；A5为Ile、His、Ala或Gly或其等同的氨基酸；A6为Ala、Gln、Gly或D-Pro或其等同的氨基酸；A7为Ala、Leu、本文档来自技高网...

【技术保护点】
选自下列的肽：环（Ｌｙｓ↑［１８］－Ａｓｐ↑［２２］）Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｐ（Ｏ ｔＢｕ）－Ｖａｌ－ＮＨ－树脂，环（Ｌｙｓ↑［１８］－Ａｓｐ↑［２２］）Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－Ｌｅｕ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｔｒｐ（ Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－ＮＨ－树脂，环（Ｌｙｓ↑［１８］－Ａｓｐ↑［２２］）Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ） －Ｉｌｅ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｌｅｕ－Ｎｌｅ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－Ｌｅｕ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－Ｓｅｒ（ＯｔＢｕ）－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－Ｖａｌ－ＮＨ－树脂，Ｆｍｏｃ环（Ｌｙｓ－Ａｓｐ）Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－ＯＢｚ ｌ，Ｆｍｏｃ环（Ｌｙｓ－Ａｓｐ）Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－ＯＨ，Ｆｍｏｃ环（Ｌｙｓ－Ａｓｐ）Ｌｙｓ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－Ａｒｇ（Ｐｍｃ）－Ｖａｌ－Ａｓｐ－氯代三苯甲基树脂。...

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：AW斯莱迪斯基，JJ曼西尔，
申请(专利权)人：阿温蒂斯药物制品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]