本发明专利技术涉及一种糖肽复合物免疫强化饲料添加剂，其主要成分为灵芝或／和云芝的发酵液。该发酵液是将灵芝或／和云芝的菌丝体接种于改良马铃薯葡萄糖琼脂的斜面培养基上；然后接入液体培养基Ａ制备摇瓶种子液；再接入液体培养基Ｂ制备一级发酵种子液；最后接入液体培养基Ｃ深层发酵而得。将该发酵液经过进一步加工，分别得到本发明专利技术提供的糖肽复合物免疫强化饲料添加剂ＰＳＰｃ－１（结晶精制品）、ＰＳＰｃ－２（吸附粉剂）、ＰＳＰｃ－３（液剂）和ＰＳＰｃ－４（菌丝体粉剂）。该饲料添加剂不会造成抗生素残留，可促进动物生长或提高生产效率，刺激免疫系统发育，增强免疫力和抗病力，且热稳定性好，不容易失活，是一种无毒害、无残留、安全、高效、低成本的糖肽复合物免疫强化饲料添加剂。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种饲料添加剂及其制备方法，具体地说是涉及一种用灵芝和云芝发酵生产的糖肽复合物免疫强化饲料添加剂及其制备方法和用途。
技术介绍
饲料添加剂在畜禽养殖的促生长、防病和提高生产效率等方面起着不可或缺的作用。早期的饲料添加剂主要是抗生素，其在动物疾病的预防以及促生长方面发挥了重要作用，但科学研究也发现，抗生素的药物残留危害公众的健康，并对我国畜产品的出口都带来很大的负面影响。随着人们食品安全意识的提高，迫切需要使用绿色饲料添加剂来生产绿色畜产品、无公害食品、无抗食品或安全食品。关于绿色饲料添加剂的研究和开发，国外早在30多年前已着手，而国内只在近些年才启动。在开发抗生素类饲料添加剂替代品的过程中，我国科学工作者先后开发成功了微生物添加剂(益生素)、酶制剂、益生元或化学益生素(寡聚糖)、酸化剂及中药草(或植物提取物)饲料添加剂等，它们各有优缺点。酶制剂及益生素的弱点是热稳定性差，容易失活，无论是在制粒、膨化等热处理条件下还是长期存放都会引起失活。酸化剂的添加比例大(1％～3％)、成本高，制作复合预混料时易破坏维生素活性，且功能有限(主要调整肠道pH值，抑制某些有害微生物的生长繁殖)。益生元或化学益生素多为选择性地刺激动物肠道有益菌增加的聚糖类，如甘露寡聚糖、蔗糖寡籽寡聚糖、果寡聚糖等，与微生态制剂有异曲同工之处，其优势在于制作配方时无任何配伍禁忌，能耐受高压、高温等所有贮运、饲料极端加工条件等不利因素，所以粉料、颗粒料、膨化料均可使用。但是益生元或化学益生素存在成本高，功效较弱的弊端。中草药制剂多为粗制品，效果不稳定，某些制剂尚存在毒副作用，还存在加工成本高、大量应用时资源有限等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服已有技术的饲料添加剂易造成抗生素残留、热稳定性差、容易失活、添加比例大、成本高、某些制剂尚存在毒副作用的缺陷，特别是克服某些抗生素引起动物免疫功能明显抑制，抗病力下降，容易引起继发感染的缺点，从而提供一种无毒、无害、无残留、安全、高效、低成本、能明显促进动物免疫系统发育，增强动物免疫力，提高抗病力的糖肽复合物免疫强化饲料添加剂。本专利技术的另一目的在于提供一种所述糖肽复合物免疫强化饲料添加剂的制备方法。本专利技术的再一目的在于提供一种所述糖肽复合物免疫强化饲料添加剂的用途。本专利技术的目的是通过如下的技术方案实现的本专利技术提供的糖肽复合物免疫强化饲料添加剂，其主要成分为灵芝或/和云芝的发酵液，经过进一步后加工，分别得到PSPc-1(结晶精制品)、PSPc-2(吸附粉剂)、PSPc-3(液剂)和PSPc-4(菌丝体粉剂)。本专利技术提供的灵芝或/和云芝的发酵液，由如下的步骤制得1)斜面培养活化将灵芝或/和云芝的菌丝体接种于改良马铃薯葡萄糖琼脂(PGA)的斜面培养基上，在25～32℃下培养4～10天，直至菌丝体长满斜面；所述的改良马铃薯葡萄糖琼脂(PGA)的斜面培养基由下述方法制得马铃薯200～300克去皮切小片状或小块状，加入500ml沸水中煮沸30分钟后用4层纱布过滤，在滤汁中加入20克葡萄糖、2克酵母粉，然后加水定容至1000ml，分装，灭菌，备用；2)制备摇瓶种子液将步骤1)得到的长满菌丝体的琼脂斜面培养基接入液体培养基A中，在25～35℃、转速80～200转/分钟的摇床上培养2～5天，得到灵芝或/和云芝的摇瓶种子液；所述液体培养基A为按下述物料与水的重量体积比(W/V)配制的混合液葡萄糖4.0％，蛋白胨0.2％，KH2PO40.1～0.2％，MgSO4·7H2O 0.05～0.1％，VB10.002～0.005％，121℃灭菌30分钟，冷却到25℃，备用；3)制备一级发酵种子液将步骤2)制备的摇瓶种子液按5～20％的体积比接入液体培养基B，在25～35℃、转速80～200转/分钟的摇床上培养2～7天，得到灵芝或/和云芝的一级发酵种子液；所述液体培养基B为按下述物料与水的重量体积比(W/V)配制的混合液葡萄糖0.5～1.0％，豆粕2.0～4.0％，玉米5.0～10.0％，饲料级酵母粉0.5～1.5％，KH2PO40.1～0.2％，MgSO4·7H2O 0.05～0.1％；或者是豆粕1.0～2.0％，玉米5.0～10.0％，麦麸0.5～1.5％，饲料级酵母粉0.5～1.5％，KH2PO40.1～0.2％，MgSO4.7H2O 0.05～0.1％，121℃灭菌30分钟，冷却到25℃，备用；4)深层发酵将步骤3)制备的一级发酵种子液按5～20％的体积比接入液体培养基C，在25～35℃发酵2～7天，得到灵芝或/和云芝的发酵液；所述液体培养基C为按下述比例料水重量体积比(W/V)配制的混合液豆粕1.0～2.5％或/和鱼粉0.5～1.0％，玉米5.0～10.0％，麦麸0.5～2.0％，饲料级酵母粉0.5～1.5％，KH2PO40.1～0.2％，MgSO4·7H2O 0.05～0.1％，121℃灭菌30分钟，冷却到25℃，备用。用常规的苯酚-硫酸法测定该灵芝或/和云芝的发酵液中的糖肽复合物(polysaccharide-peptide complex，PSPc)的含量，达到2.0g/L以上。对此PSPc进行鉴别该糖肽复合物无臭、无甜味，有吸水性，冷水中溶解度较小，能溶于热水中，溶液呈弱酸性，不溶于乙醇等有机溶剂中；与百酮试剂作用后溶液呈蓝绿色，与苯酚-硫酸反应呈桔红色，与冰醋酸-浓硫酸反应呈紫红色，与硫酸-酸酐反应呈红色；在浓硫酸作用下与α-萘酚反应，在多糖溶液与硫酸界面出现紫色环，搅拌后溶液呈紫色。本专利技术提供一种糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-1(结晶精制品)，其为将灵芝或/和云芝的发酵液进一步浓缩及提取，具体步骤如下将上述灵芝或/和云芝的发酵液离心弃渣，取上清液在50～80℃减压浓缩至原体积的40～60％，然后再加入1～3倍体积的95％以上的酒精，搅拌后静置沉淀，离心分离，回收酒精上清液(可反复利用)，将乳白色纤维状沉淀物干燥后，即制得糖肽复合物(polysaccharide-peptide complex，PSPc)的提取物，其纯度达95％以上，即为糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-1(结晶精制品)。本专利技术提供另一种糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-2(吸附粉剂)，其为将灵芝或/和云芝的发酵液进一步浓缩后与载体混合，具体步骤如下将上述灵芝或/和云芝的发酵液在均质机中均质后，在50℃减压浓缩至原体积的50％，按发酵液体积与混合载体的重量比＝0.5～0.8∶1的比例混合均匀，于60～80℃下干燥(如流化干燥床)，粉碎到80目，即得到糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-2(吸附粉剂)；所述的混合载体(吸附剂)为按下述重量比例配制的混合物轻质CaCO340～60wt％、玉米芯粉20～50wt％、玉米蛋白粉10～30wt％；该添加剂中PSPc的有效含量不低于4.0g/kg(吸附粉剂)。本专利技术提供再一种糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-3(液剂)，其为将灵芝或/和云芝的发酵液添加辅料制得，具体步骤如下将上述灵芝或/和云芝的发酵液加入0.1～0.5v％的稳定剂，所述的稳定剂为选自醋酸、丙酸、柠檬酸中的一种或几种的混合物，制得糖肽复合物免疫强化饲料添加剂PSPc-3(液剂)；该添加剂中P本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种灵芝或／和云芝的发酵液，由如下的步骤制得： １）斜面培养活化：将灵芝或／和云芝的菌丝体接种于改良马铃薯葡萄糖琼脂的斜面培养基上，在２５～３２℃下培养４～１０天，直至菌丝体长满斜面； ２）制备摇瓶种子液：将步骤１）得到的长满菌丝体的琼脂斜面培养基接入液体培养基Ａ中，在２５～３５℃、转速８０～２００转／分钟的摇床上培养２～５天，得到灵芝或／和云芝的摇瓶种子液； ３）制备一级发酵种子液：将步骤２）制备的摇瓶种子液按５～２０％的体积比接入液体培养基Ｂ，在２５～３５℃、转速８０～２００转／分钟的摇床上培养２～７天，得到灵芝或／和云芝的一级发酵种子液； ４）深层发酵：将步骤３）制备的一级发酵种子液按５～２０％的体积比接入液体培养基Ｃ，在２５～３５℃发酵２～７天，得到灵芝或／和云芝的发酵液。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：张日俊，王铮，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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