【技术实现步骤摘要】
本专利技术总的涉及蛋白质纯化。具体说，本专利技术涉及使用离子交换层析从包含多肽和至少一种污染物的组合物中纯化多肽(例如抗体)。
技术介绍
对于生物技术产业来说，蛋白质的大规模、经济的纯化是一个日逾重要的问题。通常，使用经过基因工程改造能产生感兴趣的蛋白质的哺乳动物或细菌细胞系，通过插入一种含有该蛋白质基因的重组质粒，经过细胞培养来产生蛋白质。由于所用的细胞系是活的有机体，它们必须用含有糖、氨基酸和生长因子，通常由动物血清制备物提供的复合生长培养基来喂养。从喂养给细胞的化合物混合物中和从细胞本身的副产品中，将所需蛋白质分离出来，达到足够作为人治疗用的纯度，是一种艰难的挑战。从细胞碎片中纯化蛋白质的程序首先由蛋白表达的位点所决定。可使一些蛋白质直接从细胞分泌到周围的生长培养基中；其它蛋白质则在细胞内产生。对于后一种蛋白质，纯化过程的第一步涉及裂解细胞，这可通过不同方法完成，包括机械剪切、渗透压休克或酶处理。这些破坏方法使细胞的全部内容物释放到组织匀浆中，并额外产生了由于其体积小难于除去的亚细胞片段。通常须通过差速离心或过滤除去它们。在蛋白质产生过程中，由于细胞自...
【技术保护点】
一种从包含多肽和污染物的组合物中纯化该多肽的方法，其特征在于，该方法包括依次进行的下列步骤： （ａ）用加样缓冲液使多肽结合到离子交换材料上，其中加样缓冲液处于第一导电率和ｐＨ下； （ｂ）用第二导电率和／或ｐＨ的中间缓冲液洗涤离子交换材料，从而从离子交换材料上洗脱下污染物； （ｃ）用第三导电率和／或ｐＨ的洗涤缓冲液洗涤离子交换材料，其中从中间缓冲液到洗涤缓冲液的导电率和／或ｐＨ的变化，和从加样缓冲液到中间缓冲液的导电率和／或ｐＨ的变化方向相反；和 （ｄ）用第四导电率和／或ｐＨ的洗脱缓冲液洗涤离子交换材料，从而从离子交换材料上洗脱下多肽。
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：CD贝斯，GS布兰克，
申请(专利权)人：基因技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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