源自植物材料的ACE抑制肽制造技术

制备含血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）抑制肽的水解物的方法，包括：　　　　将基本不含油的种子粗粉或细粉与有机溶剂接触，　　　　从所述的有机溶剂中分离出所述的粗粉或细粉，及　　　　利用至少一种蛋白水解酶处理所述的粗粉或细粉来产生含ＡＣＥ抑制肽的水解物。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】源自植物材料的ACE抑制肽专利
本专利技术涉及从植物来源获得具有高度特异活性的ACE抑制肽组合物的改进方法。 专利技术背景 高血压或血压过高在北美是一种常见的健康问题，其中每四个成年人就有一个患 高血压。由于高血压是无症状的，因此在考虑高血压之前，可能已经发生了不可逆的心血管 并发症。 在血压调节中发挥主要生理作用的一种酶是血管紧张素转化酶(ACE :肽酰二肽 水解酶，EC 3， 4， 15， 1) 。 ACE利用将非活化的十肽血管紧张素I转化为血管收縮性盐储留肽 血管紧张素II的能力(Skeggs et al. ，1956)通过肾素血管紧张素系统，以及利用失活血 管舒张剂和促钠尿排泄九肽、血管舒缓激肽(bradykinin)的能力(Yang et al. ， 1970)通 过血管舒缓素-激肽系统(kallikrein-kinin system)参与血压的增加。 因此抑制ACE活性提供了降低血压的手段。 Ferreira(1965)发现了第一个强力和特异的ACE活性抑制剂，他证明巴西箭蛇 (Brazilian arrowhead viper)毒液的提取物Bothrops iararaca能够加强平滑肌的收缩 并引起由血管舒缓激肽诱导的低血压和毛细血管通透性增加。随后从一些蛇的毒液中分离 了所谓的"血管舒缓激肽增强因子"(BPF' s)，并发现其为短肽，且是ACE的强力抑制剂。 也已经制备了一类合成的ACE抑制剂，并已上市销售，第一个产品为卡托普利 (c即topril) (D-2-甲基-3-巯基氧丙基-L-脯氨酸)。尽管许多这类药物对于降低高血压 的作用是无可估量的，但长期应用会伴随一些不需要的副作用。因此仍需要新的控制高血 压的治疗剂。 已知通过对多种来源的蛋白进行蛋白水解消化可获得ACE抑制肽，该蛋白的来源 包括鱼(例如欧洲专利第1094071号)、动物奶蛋白(例如公开号为WO 99/65326的国际申 请)以及植物(例如，Kawakami et al. ， (1995) ;Yano et al. ， (1996) ;Pedroche et al.， (2002) ;Wu et al. ， (2002))。多数所描述的用于从植物蛋白中获得ACE抑制肽的方法在水 解之前均包括对所述蛋白进行初步纯化的步骤，其增加了所述方法的成本和复杂性并因此 增加了产品的成本。 因此仍需要从植物材料中制备ACE抑制剂组合物的改进方法和高特异活性的ACE抑制肽的其它来源。 专利技术概述 根据本专利技术的一个实施方案，本专利技术涉及制备含血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽 的水解物方法，包括 将基本不含油的种子粗粉(meal)或细粉(flour)与有机溶剂接触， 从所述的溶剂中分离出所述的粗粉或细粉，及 用至少一种蛋白水解酶处理所述的粗粉或细粉来产生含ACE抑制肽的水解物。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及从亚麻或油菜籽中制备含ACE抑制肽的 水解物的方法，包括 用至少一种蛋白水解酶处理基本不含油的亚麻子粗粉或基本不含油的油菜种子 粗粉来产生含ACE抑制肽的水解物。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及通过上述方法制备的含ACE抑制肽的水 解物。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及通过部分蛋白水解消化亚麻粗粉或油菜 籽粗粉制备的含ACE抑制肽的水解物。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及通过干燥本专利技术的水解物制备的粉末。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及包含本专利技术水解物的可食用产品。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及包含肽Val-Ser-Val和Phe-Leu中至少 一种和药物可接受的载体的药物组合物。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及序列式Val-Ser-Val的肽。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及序列式Phe-Leu的肽。 根据本专利技术的另一实施方案，本专利技术涉及抑制哺乳动物的ACE活性的方法，包括对所述哺乳动物给予有效剂量的本专利技术水解物或粉末或可食用产品或组合物。 这种对ACE活性的抑制可用于降低所述哺乳动物中已升高的血压。因此本专利技术提供用于治疗包括人类的哺乳动物个体的血压升高的方法和组合物。 本专利技术还提供本专利技术的水解物或粉末或可食用产品或组合物用于制备治疗包括人类的哺乳动物个体的血压升高的药剂的用途。 附图的概述 参考附图本专利技术对一些实施方案进行了描述，其中 图l所示为对于多种作用于油菜籽粗粉的蛋白水解酶，作为孵育时间(X轴)函数 的ACE抑制活性(Y轴)。 图2所示为对于多种作用于油菜籽粗粉的蛋白水解酶，作为孵育时间(X轴)函数 的水解程度(DH-Y轴)。 图3所示为从S印hasil肽C18 12ii ST4. 6/250柱获得的部分(fraction)在 214nm(mAU)处的吸光度。 专利技术的详细描述 本专利技术提供用于从诸如粗粉和细粉的植物材料中制备ACE抑制组合物的改进的 方法和新的来源，而不需首先从所述的植物中分离出高度富集或纯化的蛋白部分。 本专利技术使用的"粗粉"指磨碎的油提取后的油料种子的非油部分，而"细粉"指磨碎 的诸如谷类(cereal)和豆类(legume)的非产油植物的种子。本专利技术方法可应用于例如油 料种子粗粉，该油料种子粗粉可通过诸如对油料种子进行轧胚或压榨(e邓elling)，并对所 产生的粗粉进行脱脂和溶剂提取的常规方法来制备；以及用于细粉，该细粉可从诸如谷类、 假谷类(pseudocereals)和豆类的非油料种子中获得。 本专利技术所用"水解物"指将种子粗粉或细粉蛋白水解或部分蛋白水解后获得的消 化混合物。 根据本专利技术的实施方案，本专利技术人发现，在蛋白水解消化产生ACE抑制肽之前用 有机溶剂提取种子粗粉或细粉，得到具有增强的ACE抑制活性的水解物。通过采用有机溶 剂提取步骤，本专利技术人能够克服将植物材料直接进行蛋白水解消化时所遇到的低产率和低ACE抑制活性的问题。表1显示，对于所检验的大多数植物材料，在蛋白水解消化前对所述粗粉或细粉进行有机溶剂提取能改进所述水解物的IC50和蛋白含量。 欲进行处理的植物材料可来自油料种子，例如亚麻、油菜籽/油菜籽(canola/rapeseed)、大豆、棉籽、向日葵、花生或芥菜(mustrad);来自豆类(legume)种子，例如大豆(soybeans)、豌豆(peas)、扁豆(lentils)、豆(bean)或鹰嘴豆(chichpeas)的种子；或来自谷类，例如小麦、燕麦、大麦、黑麦或诸如芥麦的假谷物。 对于油料种子，例如油菜籽、亚麻和大豆，可通过将种子用常规的脱脂和油类提取 方法处理可得到基本不含油的种子粗粉，诸如压榨、用溶剂提取进行压榨、以及轧胚和溶剂 提取的油类提取方法，如商品植物油工业实践中所采取的方法。所产生的材料通常含有少 于1%的脂肪。种子诸如谷类和假谷类(例如，小麦、燕麦、黑麦、荞麦)是天然的基本不含 油的，并且不需要脱脂。 土壤植物材料可以颗粒的形式存在，其通过将全种子或脱脂粗粉进行粗碾磨，随 后进行过筛，根据大小将颗粒分为粗(10-20目)、中(20-40目)或细(40-80目)颗粒；或 者所述的土壤植物可以为细粉形式，其通过碾磨成非常细的颗粒来制备，使97%的所述产 物能够通过100目筛子。在制备所述的细粉本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建平，阿利斯特·D·缪尔，罗蒂米·E·阿吕科，
申请(专利权)人：加拿大农业及农业食品部，
类型：发明
国别省市：