人B细胞特异性膜分子CD20的12氨基酸模拟表位及其用该模拟表位构建的多肽表位疫苗制造技术

本发明专利技术公开了一种人Ｂ细胞特异性表达膜分子ＣＤ２０的１２个氨基酸的模拟表位及其用该模拟表位构建的多肽表位疫苗，利用已由美国ＦＤＡ批准上市的用于Ｂ淋巴细胞型白血病及淋巴瘤治疗的人鼠嵌合单克隆抗体Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ作为配体在噬菌体１２随机呈现肽库中筛选出ＣＤ２０分子的模拟表位，Ｇｌｎ－Ａｓｐ－Ｌｙｓ－Ｌｅｕ－Ｔｈ－Ｇｌｎ－Ｔｒｙ－Ｐｒｏ－Ｌｙｓ－Ｔｒｙ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ，该表位能够特异性的被美罗华单抗所识别，化学合成该１２氨基酸的模拟表位并与匙孔嗜血蓝蛋白（ＫＬＨ）进行化学偶连，得到构建成功的疫苗。由它构建的蛋白疫苗能够在小鼠体内诱导出针对天然ＣＤ２０分子的抗血清，该抗血清具有相似与美罗华杀伤ＣＤ２０＋细胞的作用。进一步制备能够应用于人体的ＣＤ２０分子的自体疫苗，从而以主动免疫方式来替代或补充单抗被动免疫治疗，克服单抗治疗缺陷打下基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药生物
，具体涉及噬菌体随机呈现肽库的筛选、被筛选噬菌体的亲和性检测和测序、多肽的合成与偶连、动物免疫实验、诱导抗血清的体外活性检测等技术。进一步涉及一种人B细胞特异性膜分子CD20的12氨基酸模拟表位及其用该模拟表位构建的在体内能够诱导出针对CD20分子的自身抗体的多肽表位疫苗。
技术介绍
1.CD20分子及其单克隆抗体的相关研究1.1CD20分子CD20分子是一个表达于95％以上正常或恶化的B细胞表面的标志性分子，是治疗B细胞淋巴瘤时的理想靶抗原。编码CD20的基因位于11号染色体的t(11；14)(q13；q32)区域，它是由297个氨基酸组成的分子量约为33kD的非糖基化磷蛋白，起始表达于pre-B细胞阶段，直至浆细胞期消失。单核细胞、静息以及活化的T细胞及非淋巴细胞均不表达CD20分子。CD20分子是一个四次穿膜蛋白，氨基端和羧基端都位于质膜内侧，位于第三和第四跨膜区之间的由43个氨基酸残基组成的环区，构成了其主要的抗原表位，也是各种单抗分子作用的靶位。CD20分子与其抗体结合后内化作用不明显，也没有明显的CD20分子脱落现象，在人体血清中无游离的本文档来自技高网...

【技术保护点】
人Ｂ细胞特异性膜分子ＣＤ２０的１２氨基酸模拟表位，其特征在于，以人鼠嵌合单克隆抗体Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ作为配体，在噬菌体随机呈现１２肽库中筛选得到与人鼠嵌合单克隆抗体Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ高亲和力的三种ＣＤ２０分子的模拟表位，其氨基酸序列分别为：ＧｌｎＡｓｐＬｙｓＬｅｕＴｈｒＧｌｎＴｒｙＰｒｏＬｙｓＴｒｙＬｅｕＧｌｕ；ＨｉｓＧｌｕＧｌｕＡｓｎＡｓｐＬｅｕＡｒｇＴｒｙＴｒｙＰｈｅＩｌｅ Ｈｉｓ；ＡｓｎＭｅｔ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张英起，李萌，颜真，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]