新的聚(乙二醇)修饰的化合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及含有肽部分和聚（乙二醇）部分的基于肽的化合物，其中聚（乙二醇）部分（优选线性的）具有２０Ｋ道尔顿（优选２０到６０Ｋ道尔顿）的分子量。肽部分可以是单体的、二聚体的或者寡聚体的。此类基于肽的化合物可以任选包括连接体部分和／或间隔臂部分。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】1.相关申请的交叉参考本申请根据35U.S.C§119(e)要求2003年5月12日提交的共同待决的美国临时专利申请序号60/470,246的优先权。将该优先权申请的内容完整并入本公开作为参考。1.专利
本专利技术涉及用聚(乙二醇)或者“PEG”修饰基于肽的化合物。具体地，本专利技术涉及用PEG，优选20到60K道尔顿的线性PEG部分修饰的肽单体、二聚体和寡聚体。此外，本专利技术涉及使用此类PEG修饰的化合物的新的治疗方法。2.专利技术背景近年来，随着蛋白质研究的发展，已经发现了具有多种作用的许多肽。随着基因重组技术和肽的有机合成方法的发展，已经可能大量得到这些生理学活性肽和它们的结构上类似的化合物。许多具有特定活性的这些肽非常适宜用作药物。这些肽的实例包括结合红细胞生成素(EPO)受体(EPO-R)的肽。EPO是具有165个氨基酸的糖蛋白激素，在24、38、83和126位氨基酸上具有糖基化位点，其分子量为约34,000。EPO刺激有丝分裂和红细胞前体细胞的分化，从而确保产生红细胞。EPO在血红细胞形成过程中是关键的，该激素潜在可用于诊断和治疗特征是低或者缺陷红细胞产生的血液疾病。已经发现了与EPO-R相互作用的许多肽(见，例如，Wrighton等人的美国专利号5,773,569；和Wrighton等人的美国专利号5,830,851；Smith-Swintosky等人的WO01/91780)。然而，肽的清除通常非常快，当施用于循环系统时尤其如此。因此，希望提高这些肽的耐久性。此外，当肽从动物的不同物种得到，通过肽蛋白质工程化设计，和/或具有与宿主的肽不同的结构时，由于抗体的产生，存在导致严重症状的危险。因此，希望还提高此类肽的抗原性。为了使用这些肽作为药物，必须提高抗原性和耐久性。用诸如聚(乙二醇)的大分子化合物对肽化学修饰已经表明可有效提高多种肽的抗原性和耐久性。从而，聚(乙二醇)和聚(乙二醇)衍生物已经广泛用作肽修饰的大分子试剂。聚(乙二醇)的最常见的形式具有下面的结构HO-(CH2CH2O)nCH2CH2-OH上面的聚合物α-、ω-二羟基聚(乙二醇)可以以简单形式表示为HO-PEG-OH，其中可以理解-PEG-符号代表下面的结构单位-CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-不被任何具体理论或者作用机理所限制，认为长的链样PEG分子或者部分当在水性介质中时被高度水合并且处于快速运动中。认为该快速运动导致PEG占据(sweep out)大体积并且防止其他分子的接近和干扰。结果，当连接到另一化学实体(如肽)时，PEG聚合物链可以保护此类化学实体免于免疫应答和其他清除机制。结果，PEG化通过优化药物动力学、增加生物利用率，和减小免疫原性和给药频率提高了药物功效和安全性。例如，PEG的一些活性衍生物已经连接到蛋白质和酶，得到了有益结果。PEG在有机溶剂中是可溶的。连接到酶的PEG可以导致PEG-酶缀合物，其在有机溶剂中是可溶和有活性的。PEG连接到蛋白质与未经修饰的蛋白质相比可以减小PEG-蛋白质缀合物的免疫原性和肾脏清除速率，这导致缀合物的血液循环寿命显著增加。例如，已经报导PEG共价连接到治疗性蛋白质延长了它们的体内半寿期，和/或减小了它们的免疫原性和抗原性，所述治疗性蛋白质为例如白介素(Knauf，M.J.等人，J.Biol.Chem.1988，263，15，064；Tsutsumi，Y.等人，J.Controlled Release 1995，33，447)、干扰素(Kita，Y.等人，Drug Des.Delivery 1990，6，157)、过氧化氢酶(Abuchowski，A.等人，J.Biol.Chem.1977，252，3，582)、超氧化物歧化酶(Beauchamp，C.O.等人，Anal.Biochem.1983，131，25)，和腺苷脱氨酶(Chen，R.等人，Biochim.Biophy.Acta1981，660，293)。此外，连接到表面的PEG可以减小蛋白质和细胞对表面的吸附并改变表面的电性质。类似地，连接到脂质体的PEG可以导致这些颗粒的血液循环寿命的极大增加，从而可能增加它们用于药物递送的实用性(J.M。Harris，编者，″Biomedical and Biotechnical Applications of PolyethyleneGlycol Chemistry，″Plenum，New York，1992)。Johnson等人的美国专利5,767,078公开了可以结合EPO-R的肽单体的二聚化。二聚化是基于单体的共价连接。PEG是形成二聚体的优选连接体。特别用于此文的PEG具有仅3400或5000的分子量。Smith-Swintosky等人的WO01/91780公开了肽的二聚体和多聚体，它们显示出对生长因子型受体的结合和信号起始。所公开的连接体是聚乙二醇。然而，该参考文献没有提供选择适宜大小或者类别(例如，线性)PEG的指导。Wei等人的美国专利6,077,939公开了基本上由多肽和通过腙或者还原的腙键，或者肟或者还原肟键共价结合所述多肽的N-末端α-碳原子的水溶性聚合物组成的组合物。所述水溶性聚合物的分子量范围为200到200K道尔顿。公开PEG作为水溶性聚合物的实例。PEG的分子量为仅700到20K道尔顿，并且据说优选仅5K道尔顿的PEG部分。Balu等人的WO 01/38342公开了通过C1-12连接部分连接两个肽链形成的二聚体。该文献指出二聚体的N-末端可以PEG化。然而，该出版物没有指出所用PEG的分子量或者指出PEG是线性还是分枝的。Saifer等人(Adv.Exp.Med.Biol.(1994)，366377-87)描述了牛和重组人Cu，Zn超氧化物歧化酶(SOD)的PEG化加合物，其中1-9条链的高分子量(35K-120K道尔顿)PEG偶联到SOD。Somack等人(Free Rad.Res.Comms.(1991)，12-13553-562)描述了含有1到4条链的高分子量(41K-72K道尔顿)PEG的SOD加合物。这两篇参考文献都没有教导用PEG修饰肽。而且，认为用于这些化合物中的PEG部分是分枝的，与线性PEG相反。尽管在PEG修饰的基于肽的化合物领域中取得了进步，但是仍然需要具有提高的抗原性和耐久性的新的PEG修饰的化合物。本章节和整个说明书中的引用和/或对参考文献的讨论不应该被认为是承认这些参考文献是本专利技术的现有技术。专利技术概述本专利技术涉及基于肽的化合物，其包含肽部分和聚(乙二醇)部分，其中聚(乙二醇)部分是线性的并且具有20K道尔顿以上的分子量。优选地，聚(乙二醇)部分具有约20到60K道尔顿的分子量。更优选地，聚(乙二醇)部分具有约20到40K道尔顿的分子量。最优选地，PEG具有约20K道尔顿的分子量。优选地，聚(乙二醇)部分具有小于1.20，更优选小于1.1，最优选小于1.05的多分散值(Mw/Mn)。优选地，肽部分是二聚体的并且包含通过连接体部分连接的两个单体肽。此外，此类二聚体和其他多聚体可以是异二聚体或异多聚体。在一个实施方案中，肽部分选自结合红细胞生成素的肽。此类EPO-R结合肽的非限制性实例包括在公开的国际申请PC本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含肽部分和聚（乙二醇）部分的基于肽的化合物，其中聚（乙二醇）部分是线性的并且具有２０Ｋ道尔顿以上的分子量。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：CP霍姆斯，D图梅尔提，殷群，
申请(专利权)人：阿费麦克斯公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]