细胞表面糖蛋白制造技术

本发明专利技术涉及一种称为ＩＮＳＰ２０１的新型蛋白质，在本文中将其鉴定为细胞表面糖蛋白，还涉及该蛋白质和源自其编码基因的核酸序列在诊断、预防和治疗疾病中的应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种称为INSP201的新型蛋白质，在本文中将其鉴定为细胞表面糖蛋白，以及该蛋白质和源自其编码基因的核酸序列在诊断、预防、和治疗疾病中的应用。本文所引用的所有出版物、专利和专利申请均以其全文纳入本文作为参考。
技术介绍
随着功能基因组学时代的来临，药物发现过程目前正经历着一场基础性革命。术语“功能基因组学”指利用生物信息学方法将功能归因于感兴趣的蛋白质序列的一种方法。由于序列数据产生的速度已快速超过研究实验室将功能归因于这些蛋白序列的能力，因而越来越需要这些方法。随着生物信息学方法的效力和准确性的提高，这些方法迅速取代了常规的生物化学特性鉴定技术。实际上，用于鉴定本专利技术的高级生物信息学方法目前已能输出具有高度可信性的结果。各研究所和商业机构正在检验他们可得到的序列数据，并在进行这种检验的基础上取得了重大发现。然而，仍然需要对其它基因和它们编码的多肽进行鉴定和特征分析，从而将其作为研究和发现药物的靶标。专利技术介绍分泌性蛋白质细胞产生和分泌胞外蛋白质的能力是许多生物学活动过程的中心。酶、生长因子、胞外基质蛋白和信号转导分子都是由细胞分泌的。这是通过分泌囊泡与胞质膜融合得以进行的。在大多数但不是全部例子中，蛋白质可通过信号肽导向内质网而进入分泌囊泡。信号肽是影响多肽链从细胞质转运至细胞膜结合区室compartment(例如分泌囊泡)的顺式作用序列。靶向分泌囊泡的多肽或被分泌到胞外基质中，或留在胞质膜中。留在胞质膜中的多肽具有一个或多个跨膜结构域。在细胞功能中发挥重要作用的分泌蛋白的例子有细胞因子、激素、胞外基质蛋白(粘附分子)、蛋白酶以及生长和分化因子。
技术实现思路
本专利技术是基于INSP201多肽是一种细胞表面糖蛋白这一发现的。在本专利技术第一方面的一具体实施方案中，提供一种如下的多肽(i)含有SEQ ID NO2，SEQ ID NO4，SEQ ID NO6，SEQ ID NO8，SEQ IDNO10，SEQ ID NO12，SEQ ID NO14，SEQ ID NO16和/或SEQ ID NO18所示的氨基酸序列；(ii)是其片段，该片段是细胞表面糖蛋白家族成员的片段，或与(i)所述多肽具有共同的抗原决定簇；或(iii)是(i)或(ii)的功能等价物。本专利技术第一个方面所述的多肽优选包含SEQ ID NO12所示的氨基酸序列。这种蛋白质优选包含SEQ ID NO8所示的氨基酸序列。根据本专利技术第一方面的第二具体实施，提供一种多肽，其由SEQ ID NO2，SEQ ID NO4，SEQ ID NO6，SEQ ID NO8，SEQ ID NO10，SEQ ID NO12，SEQ ID NO14，SEQ ID NO16和/或SEQ ID NO18所示的氨基酸序列组成。本专利技术范围内优选不包括由SEQ ID NO8的前79个氨基酸组成的片段。该片段已公布在NCBI GenPept登录号AX884746和以下在Genset名下的专利文献中美国专利US20050106595、美国专利US6822072、日本专利JP2001269182、日本专利JP2002511259、欧洲专利EP1033401、PCT专利WO9953051和美国专利US6783961。具有SEQ ID NO2所示序列的多肽在下文中称为“INSP201外显子1多肽”。具有SEQ ID NO4所示序列的多肽在下文中称为“INSP201外显子2多肽”。具有SEQ ID NO6所示序列的多肽在下文中称为“INSP201外显子3多肽”。具有SEQ ID NO8所示序列的多肽在下文中称为“全长INSP201多肽”。虽然申请人不希望受此理论的束缚，但假定INSP201多肽的前21个氨基酸组成了信号肽。不含该假定信号肽序列的INSP201外显子1多肽如SEQ ID NO10所示。不含该假定信号肽序列的全长INSP201多肽如SEQ ID NO12所示。具有SEQ ID NO10所示序列的多肽在下文中称为“INSP201外显子1成熟多肽”。具有SEQ ID NO12所示序列的多肽在下文中称为“INSP201成熟多肽”。本文预测INSP201多肽包含许多可能的N-糖基化位点。因此，包含在对应于SEQ ID NO8的Asn124、Asn156、Asn188、Asn204、Asn220、Asn250和Asn268的一个、两个、三个、四个、五个、六个或七个位点上具有N-糖基化修饰的INSP201多肽或由其组成的糖蛋白都属于本专利技术的范围。本文预测INSP201多肽在SEQ ID NO8的406-427残基之间含有一跨膜区域。因此，INSP201多肽的胞外变体也属于本专利技术的范围。这些变体所包括的胞外形式优选包括如本文所述脱糖基和N-糖基化形式的SEQ ID NO8的1-405氨基酸残基或SEQ ID NO8的22-405氨基酸残基，或由它们构成。具有SEQ ID NO14所示序列的多肽在下文中称为“INSP201胞外多肽”。具有SEQ ID NO18所示序列的多肽在下文中称为“INSP201成熟胞外多肽”，但不包括预测的构成INSP201多肽信号肽的氨基酸。这种类型的多肽变体具体可用于配体筛选试验，例如能与INSP201或该类型中其它蛋白质相结合的分泌性配体的筛选。这种变体还可用于定量测定这类配体，例如用于诊断这些配体和这种多肽发挥重要作用的疾病。INSP201多肽的胞内变体也属于本专利技术的一个方面。该变体是由SEQ IDNO8的428-518氨基酸残基构成的多肽。具有SEQ ID NO16所示序列的多肽在下文中称为“INSP201胞内多肽”。本文所用术语“INSP201多肽”包括包含以下的多肽INSP201外显子1多肽、INSP201外显子2多肽、INSP201外显子3多肽、全长INSP201多肽、INSP201外显子1成熟多肽、INSP201成熟多肽、INSP201胞外多肽、INSP201成熟胞外多肽和INSP201胞内多肽。所有这些多肽均属于本专利技术范围。本专利技术第一方面的上述具体实施方案的多肽优选作为分泌蛋白，尤其是作为细胞表面糖蛋白家族的成员行使功能。细胞表面糖蛋白在人类生物学、生理学和健康中倍受关注。毫无疑问，细胞膜外表面在装配和维持组织完整性上起着重要作用。发育和分化细胞的外表面含有能识别系统信号、配体或激素的受体分子。配体的结合和解离控制着细胞的某些分化功能，使其与整个系统的需求相协调。细胞外表面还覆盖有糖蛋白和蛋白聚糖。蛋白质和多糖的这些大复合体提供了组织特异性基质，功能类似的细胞在其中作为连接组织共同行使功能。在胚胎发生时，通过细胞的糖蛋白和蛋白聚糖表面的分子特异性，有利于分选和联合具有共同功能的细胞和可能对其进行控制。糖链以N-和O-糖苷键连接于糖蛋白而形成复合体结构。事实上，N-和O-聚糖链是通过服从于特定调控事件(例如基因表达水平或酶定位)的受控顺序糖基转移酶和糖苷酶加工反应()而在内质网和高尔基体中装配。这种复杂的调控导致产生数百种(组织)结构，这些结构中的细胞/组织类型或发育/分化状态各不相同。对糖基化缺陷所导致的疾病和用重组DNA技术路线生产治疗性糖蛋白的兴趣日益增长。特别是患病细胞可能具有与正常细胞特性不同的这些相关结构部分，因而可用其本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其特征在于，该多肽：　　　　（ｉ）含有ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１８、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２０、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２２、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２４、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２６、ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２８和／或ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：３０所示的氨基酸序列；　　　　（ｉｉ）是细胞表面糖蛋白家族成员的片段，或含有与（ｉ）所述多肽共同的抗原决定簇；或　　　　（ｉｉｉ）是（ｉ）或（ｉｉ）所述多肽的功能性等价物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：S菲兹杰拉德，R法根，J比恩科沃斯卡，C鲍尔，M优克史密斯，
申请(专利权)人：阿雷斯贸易股份有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]