稳定的酶溶液和制造方法技术

本发明专利技术涉及稳定的酶溶液和制造方法，具体地涉及在包含于液体洗涤剂组合物中的酶的储存过程中的稳定化。

Stabilized enzyme solutions and methods of manufacture

The present invention relates to stabilized enzyme solutions and methods of manufacture, in particular to stabilization in the storage of enzymes contained in liquid detergent compositions.

【技术实现步骤摘要】
稳定的酶溶液和制造方法本专利技术申请是基于申请日为2008年3月27日，申请号为“200880010193.1”(国际申请号为PCT/EP2008/053660)，专利技术名称为“稳定的酶溶液和制造方法”的专利申请的分案申请。
本文公开内容涉及包含或包括酶、抑制剂和抑制剂加强剂(inhibitorbooster)的液体组合物。
技术介绍
在含酶液体如含酶液体洗涤剂中的储存稳定性问题是公知的。这点在含蛋白酶的液体洗涤剂中尤是如此。现有技术已经广泛地致力于改进储存稳定性，例如通过加入蛋白酶抑制剂来进行。已知硼酸和代硼酸(boronicacid)可逆地抑制蛋白水解酶。关于代硼酸对一种丝氨酸蛋白酶枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)的抑制的讨论在Molecular&CellularBiochemistry51,1983,第5-32页中提供。代硼酸具有非常不同的作为枯草杆菌蛋白酶抑制剂的能力。仅含烷基如甲基、丁基或2-环己基乙基的代硼酸是弱抑制剂，其中甲基硼酸是最弱的抑制剂，而带有芳香基如苯基、4-甲氧苯基或3,5-二氯苯基的代硼酸是良好的抑制剂，其中3,5-二氯苯基硼酸是尤其有效的一种(参见Keller等,Biochem.Biophys.Res.Com.176,1991,第401-405页)。还已知在相对于硼的3-位具有取代的芳基硼酸是可逆性蛋白酶抑制剂。在WO92/19707中，乙酰氨基苯基硼酸(acetamidophenylboronicacid)作为蛋白水解酶抑制剂得到描述。另外EP0832174描述了接近苯基硼酸(adjacenttothephenylboronicacid)在对位用>C=O取代的苯基硼酸衍生物在液体中具有良好的作为酶稳定剂的能力。在配制、制造和包装包括敏感酶的液体酶组合物中仍有改进的空间，以提供在运输和储存期间不丧失(loose)酶活性的洗涤剂组合物。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供具有改进的酶稳定性的液体酶组合物。本专利技术另一个目的是提供用于制造所述液体酶组合物的方法。已经发现向包括酶和抑制剂如苯基硼酸或苯基硼酸衍生物的液体酶组合物加入抑制剂加强剂如可溶性盐使抑制剂效果显著改进，并由此相对于酶活性改进酶的储存稳定性。本专利技术提供一种包括酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和水溶性盐组分的液体酶组合物。本专利技术还涉及所述液体酶组合物的制造及其用途。本专利技术的目的已经通过提供一种包括酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分的液体组合物而获得。在多个实施方案中，酶组分是蛋白酶如丝氨酸蛋白酶。盐组分可以包括阳离子如Cu、Ca、Mg、Zn、Na、K、NH4和它们的组合。在多个实施方案中，盐组分可以包括选自下组的阳离子：Mg、Zn、NH4和它们的组合。在一些实施方案中，盐组分包括阴离子，其包含氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根、甲酸根和它们的组合。另外，盐组分可以包括阴离子如氯离子、硫酸根、硝酸根和它们的组合。在特定的实施方案中，阳离子选自由Cu、Ca、Mg、Zn、Na、K、NH4组成的组且阴离子选自由氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根和甲酸根组成的组。在一些实施方案中，液体组合物的pH为7-10.5，而在一些实施方案中，液体组合物的pH为8-9.5。在一些实施方案中，盐组分以占总组合物重量的0.1%-20%的量存在。本文公开内容的目的还通过提供洗涤剂组合物，如洗衣用洗涤剂组合物或洗碟用组合物而实现。本专利技术的目的还可以通过提供一种用于制造液体组合物的方法来实现，所述方法包括如下步骤：提供液体；向a)的液体加入水溶性盐；与b)同时或在b)之后，在a)中加入酶和苯基硼酸或其衍生物；和混合所述液体组合物。在多个实施方案中，所述方法也可以包括将pH调节至7-9.5，或8-9的步骤。本专利技术的目的还通过使用根据本文公开内容的组合物清洁物体来实现。还通过使用盐组分来加强或增强液体酶组合物中苯基硼酸或其衍生物的抑制剂效果来实现本专利技术的目的。具体地，本专利技术涉及如下各项：1.一种液体组合物，其包含酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分。2.项1的液体组合物，其中所述酶组分是蛋白酶。3.项2的液体组合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。4.前述任一项的液体组合物，其中所述苯基硼酸或其衍生物是其中R选自下组：氢、羟基、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烯基和取代的C1-C6烯基。5.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种阳离子，其中所述一种或多种阳离子包含Ca、Mg、Zn、Na、K或NH4，和它们的组合。6.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种选自下组的阳离子：Ca、Mg、Zn、Na、K、NH4和它们的组合。7.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种选自下组的阳离子：Zn、Mg、NH4和它们的组合。8.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种阴离子，其中所述一种或多种阴离子包含氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根或甲酸根，和它们的组合。9.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种选自下组的阴离子：氯离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、碳酸根、甲酸根，和它们的组合。10.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种阴离子，其中所述一种或多种阴离子选自下组：氯离子、硫酸盐、硝酸盐和它们的组合。11.前述任一项的液体组合物，其中所述液体组合物的pH是7-10.5。12.前述任一项的液体组合物，其中所述液体组合物的pH是8-9.5。13.前述任一项的液体组合物，其中所述盐组分以占总组合物重量的0.1%-20%的量存在。14.前述任一项的液体组合物，其中所述液体组合物是洗涤剂组合物。15.前述任一项的液体组合物，其中所述液体组合物是洗衣用洗涤剂组合物。16.前述任一项的液体组合物，其中所述液体组合物是洗碟用组合物。17.一种用于制造任一前述项的液体组合物的方法，其包括如下步骤：a)提供液体；b)向a)的液体加入水溶性盐；c)与b)同时或在b)之后将酶和苯基硼酸或其衍生物加入a)中；和d)混合液体组合物。18.项17的方法，进一步包括将pH调节至7-9.5的步骤。19.项17的方法，进一步包括将pH调节至8-9的步骤。20.项1-16的组合物用于清洁物体的用途。21.盐用于加强苯基硼酸或其衍生物在液体组合物中的抑制剂效果的用途。22.一种稳定的液体酶组合物，其包含酶组分、抑制剂组分或其衍生物和有效量的抑制剂加强剂组分。23.一种稳定的液体酶组合物，其中抑制剂加强剂的有效量是占总组合物重量的0.5%-20%的量。定义如本文所使用，术语“%RH”是指空气的相对湿度。100%RH是在固定的温度下水分饱和的空气，且因此%RH反映了空气的百分比湿分饱和度(percentmoisturesaturation)。关于化合物或物质的术语“恒定湿度”(在本专利技术的上下文中有时简写为CH)是指大气的%RH与同所述化合物的固相接触的化合物饱和水溶液平衡，其全部限制在给定温度下的封闭空间内。此定义是根据“Handbookofchemistryandphysics”CRCPress,Inc.,Cleveland,USA,第58版,pE46,1977-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液体组合物，其包含酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分，其中所述盐组分包含一种或多种阴离子，该一种或多种阴离子选自氯离子、硫酸根、硝酸根、乙酸根或它们的组合，且加入的盐组分的量按重量计是该组合物的0.5％‑10％，其中所述液体组合物包含两种或更多种酶，其中第一种酶是蛋白酶，并且第二种酶选自下组：淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、裂合酶和氧化还原酶或它们的组合，所述苯基硼酸或其衍生物是

【技术特征摘要】
2007.03.27 DK PA2007004721.一种液体组合物，其包含酶组分、苯基硼酸组分或其衍生物和溶解的盐组分，其中所述盐组分包含一种或多种阴离子，该一种或多种阴离子选自氯离子、硫酸根、硝酸根、乙酸根或它们的组合，且加入的盐组分的量按重量计是该组合物的0.5％-10％，其中所述液体组合物包含两种或更多种酶，其中第一种酶是蛋白酶，并且第二种酶选自下组：淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、裂合酶和氧化还原酶或它们的组合，所述苯基硼酸或其衍生物是其中R选自下组：氢、羟基、C1-C6烷基、取代的C1-C6烷基、C1-C6烯基和取代的C1-C6烯基。2.权利要求1的液体组合物，其中该一种或多种阴离子选自氯离子、硫酸根、硝酸根或它们的组合。3.权利要求1的液体组合物，其中第二种酶选自下组：淀粉酶、纤维素酶、裂合酶和氧化还原酶或它们的组合。4.权利要求2的液体组合物，其中第二种酶选自下组：淀粉酶、纤维素酶、裂合酶和氧化还原酶或它们的组合。5.权利要求1的液体组合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。6.权利要求2的液体组合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。7.权利要求3的液体组合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。8.权利要求4的液体组合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。9.权利要求1-8中任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种选自下组的阳离子：Ca、Mg、Zn、Na、K、NH4和它们的组合。10.权利要求1-8中任一项的液体组合物，其中所述盐组分包含一种或多种选自下组的阳离子：Zn、Mg、NH4和它们的组合。11.权利要求1-8中任一项的液体组合物，其中所述液体组合物的pH是7-10.5。12.权利要求1-8中任一项的液体组合物，其中所述液体组合物的pH是8-9.5。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：基姆B安德森，
申请(专利权)人：诺维信公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK