一种类芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种类芽孢杆菌，其分类命名为类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)，于2016年7月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12738。本发明专利技术的类芽孢杆菌能够显著提高杨属和柳属木本植物的生长状态，如增加根长、根数、苗高和生物量，提高成活率，使其可以应用在杨属和柳属木本植物的生长繁殖过程中。

A species of Bacillus and its application

The present invention discloses a kind of Bacillus, which is classified and named bacillus (Paenibacillus sp.), in July 2016 06, preserved in general center China microbial microbe preservation management committee, the preservation number is CGMCC No.12738. The invention of Bacillus coli can significantly improve the growth status of Populus and Salix of woody plants, such as increased root length, root number, Miao Gao and biomass, which can improve the survival rate, growth and propagation in Populus and Salix in woody plants.

【技术实现步骤摘要】
一种类芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及微生物
，具体的说是涉及一种类芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
杨柳科中杨属和柳属木本由于树形美观、适应性强、易成活等优点，成为常见的防护林及绿化树种，亦可作用材树种。随着组织快繁技术的不断成熟和大范围应用，这些树种通过组培快繁技术可加快树苗的形成过程，提高植树造林的效率。但是，在杨属和柳属木本植物快繁和生长过程中，由于外界环境的影响，容易造成植株生长状态较差的现象，如根长短、根数少、苗高低、成活率低、生物量低等，这样一来就限制了杨属和柳属木本植物组织快繁的效率。植物内生细菌(endophyticbacteria)区别于生长在植物表面的细菌，分布于健康植物体内，具丰富的种群多样性，不会使宿主植物表现出明显的感染症状。作为植物微生态系统的组成部分，它们可能促进了宿主植物的适应性。随着人们对于自然环境保护意识的逐渐增强，它们的研究和应用对于降低病虫害或恶劣环境对植物的危害以及在促进植物生长和固氮作用等方面具有重要意义和应用价值，为人们利用植物内生细菌提供了新的思考方向，展现了广阔的发展前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种类芽孢杆菌，使得所述类芽孢杆菌能够显著提高杨属和柳属木本植物的生长状态，如增加根长、根数、苗高和生物量，提高成活率，使其可以应用在杨属和柳属木本植物的生长繁殖过程中。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：一种类芽孢杆菌，其分类命名为类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)，于2016年7月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.12738。其中所述类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)革兰氏染色阴性，有芽孢，菌落呈圆形，表面光滑圆润，边缘整齐，呈乳白色。本专利技术所述类芽孢杆菌分离自河北省保定市杨树根际土壤中，命名为P26。经测序菌株P26的16SrDNA核苷酸序列大小约为1501bp。经与Genebank中的相似序列相比较，菌株P26的核苷酸序列与PaenibacillusLa1(登记号为AM906090)、P.sp.Ma-2(登记号为AM906089)和P.humicus(登记号分别为AM411529、EU867348)的16SrDNA核苷酸序列同源性最高相似性最高达到99％；与P.sepulcri(登记号为DQ291142)、P.castaneae(登记号为EU099594)、P.mendelii(登记号为AF537343)、P.favisporus(登记号为NR_029071)、P.borealis(登记号为AJ011327)的16SrDNA核苷酸序列同源性相似性达到96％。对菌株P26进一步形态和生理生化鉴定，结果显示，P26革兰氏染色阴性，有芽孢，菌落呈圆形，表面光滑圆润，边缘整齐，呈乳白色。生理生化特性见表1：表1根据菌株P26的形态特征和16SrDNA核苷酸序列对比结果，选取类芽孢杆菌属的几种菌株的16SrDNA核苷酸序列构建系统发育树(见图1)，结果表明，菌株P26与菌株P.sp.La1(AM906090)和P.sp.Ma-2(AM906089)位于同一族群，亲缘关系最近。根据菌株P26的形态特征、生理生化特性和16SrDNA核苷酸序列分析以及系统发育分析，参照《Bergey'sManualofSystematicBacteriology》和《常见细菌系统鉴定手册》将菌株P26鉴定为类芽孢杆菌Paenibacillus.。本专利技术采用菌株P26对三倍体毛白杨组培苗接菌在低氮培养基上培养，并对柳树和欧美杨107的室外扦插插穗接菌处理，检测菌株P26对促进近缘种植物生根及生长的能力。试验结果表明：菌株P26对三倍体毛白杨组培苗生根和生长促进作用显著；对欧美杨107和旱柳硬枝插条的生根及生长也有显著的促进作用。基于上述技术效果，本专利技术提出了所述类芽孢杆菌在促进杨属和柳属木本植物生长中、在杨属和柳属木本植物组织快繁中，以及在制备杨属和柳属木本植物微生物促生剂中的应用。其中，所述杨属木本植物优选为白毛杨或欧美杨；所述柳属木本植物优选为旱柳。同时，本专利技术还提供了一种杨属和柳属木本植物的组织快繁方法，包括：A、将保藏编号为CGMCCNo.12738的类芽孢杆菌在TSA肉汤培养基中过夜培养活化；B、将杨属或柳属木本植物的插条或组培苗在步骤A中的培养中浸沾10s-10min，然后在培养基质中进行繁育。所述培养基质既可以是大田土壤，也可以是蛭石、珍珠岩、河沙等组织快繁常用的基质。作为优选，所述培养基质包括含有2.5mM硝酸铵的低氮BEMB200培养基，进一步地该培养基包含IBA，IBA浓度可以为0.15-0.3mg/L。作为优选，所述培养基质包含IBA，更为优选地，所述IBA浓度为0.15-0.3mg/L。生物材料保藏信息说明：P26，分类命名：类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)，于2016年7月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNo.12738。有益效果：本专利技术的类芽孢杆菌，其能够增加杨属和柳属木本植物根长、根数、苗高和生物量，提高成活率，具有显著的促生作用，可应用在促进杨属和柳属木本植物生长中、杨属和柳属木本植物组织快繁中，以及制备杨属和柳属木本植物微生物促生剂中。附图说明图1所示为菌株P26的16SrDNA序列系统发育树。具体实施方式本专利技术实施例公开了一种类芽孢杆菌及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术内。本专利技术所述菌株和应用已通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的产品、方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。以下就本专利技术所提供的一种类芽孢杆菌做进一步说明。一、菌株P26的16SrDNA序列测定与系统发生分析PCR扩增菌株P26的16SrDNA，然后由上海生工生物工程技术服务有限公司进行测序鉴定。将所得菌株的序列提交到Genbank中利用Blast程序进行相似序列对比，从中选择相似性较高的序列，利用ClaustalX进行序列对比分析，然后用MEGA软件构件系统进化树，并进行Bootstrap分析，重复次数为1000次。经测序菌株P26的16SrDNA核苷酸序列大小约为1501bp。经与Genbank中的相似序列相比较，菌株P26的核苷酸序列与PaenibacillusLa1(登记号为AM906090)和P.sp.Ma-2(登记号为AM906089)的16SrDNA核苷酸序列同源性最高相似性最高达到99％。根据菌株P26的形态特征和16SrDNA核苷酸序列对比结果，选取类芽孢杆菌属的几种菌株的16SrDNA核苷酸序列构建系统发育树(见图1)，结果表明，菌株P26与菌株P.sp.La1(AM906090)和P.sp.Ma-2(AM906089)位于同一族群，亲缘关系最近。根据菌株P26的形态特征、生理生化特性和16SrDNA核苷酸序本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种类芽孢杆菌，其特征在于：其分类命名为类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)，于2016年7月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12738。

【技术特征摘要】
1.一种类芽孢杆菌，其特征在于：其分类命名为类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)，于2016年7月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.12738。2.根据权利要求1所述的类芽孢杆菌，其特征在于：所述类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)革兰氏染色阴性，有芽孢，菌落呈圆形，表面光滑圆润，边缘整齐，呈乳白色。3.权利要求1-2任意一项所述的类芽孢杆菌(Paenibacillussp.)在促进杨属和柳属木本植物生长中、在杨属和柳属木本植物组织快繁中，以及在制备杨属和柳属木本植物微生物促生剂中的应用。4.根据权利要求3所述的类芽孢杆菌，其特征在于：所述杨属木本植物为...

【专利技术属性】
技术研发人员：阎爱华，杨敏生，王进茂，张军，王志刚，李雨，肖坤，崔延，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：河北,13