本发明专利技术提供一种多肽有机化合物，选自氨基酸序列为Ｃｙｓ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｔｈｒ－Ｃｙｓ，其中第１位的Ｃｙｓ与第９位的Ｃｙｓ之间形成二硫键，分子量为９５１．１４的多肽有机化合物ｈ，能与抗Ｂ型血单克隆抗体特异性结合，溶于水，各氨基酸之间通过肽键相连。本发明专利技术的多肽有机化合物能与人体内预存的抗猪抗原的抗体特异性结合，从而封闭它的作用；可以特异地阻断异种器官移植超急性排斥反应，与人体内预存的天然抗α－Ｇａｌ抗体的结合位点是特异性的，正好起到封闭抗体作用，但不影响人体的整体免疫反应，可避免常用免疫抑制剂引起的副作用。
【技术实现步骤摘要】
多肽有机化合物及其在异种移植中的应用
本案为申请号2006100501640的分案申请，本专利技术属有机化合物，主要涉 及多肽类有机化合物，尤其是关于人工合成的多肽有机化合物及其在异种移植 中的应用。 技术背景医学技术的进步使人类同种器官移植成为了可能。由于人体器官的来源不 足，大量的病人得不到急需的器官，利用猪的器官代替人体器官是目前研究的 热点。但由于猪的细胞表面存在异种抗原表位Gal-ot-l， 3-Gal能与人体内预存 的天然抗体结合产生超急性排斥反应，从而导致异种器官移植的失败。人们在 努力寻找一种方法可以封闭或清除人天然抗a -Gal抗体，为异种器官移植开辟 途径。噬菌体展示技术是一种能够筛选与靶分子结合的特异性多肽的有力工 具，已成功运用于抗原表位，特异性受体激动剂或抑制剂和疫苗的研究。在本 实验中我们利用噬菌体展示技术，对两种肽库，线性7肽库和C7C文库，进行 了亲和筛选。线性7肽库中展示的多肽没有结构限制，具有相对柔性的结构。 C7C肽库展示的多肽由于有一对二硫键的限制而形成环状，构象相对稳定。同 时采用两种肽库进行筛选，目的在于比较由于结构不同而造成的筛选出的多肽 在氨基酸序列上的差异。由于抗B型血单克隆抗体有结合d -Gal抗原表位的特 性，因此我们以抗B型血单克隆抗体为靶分子，筛选出能够模拟ci-Gal抗原表 位的多肽，可以特异地阻断天然抗a-Gal抗体，可以用于异种器官移植超急性 排斥反应。目前临床常用的免疫抑制剂有环孢素A、糖皮质激素、硫唑嘌呤、环磷酰 胺等，可以降低整体的免疫反应，但对异种器官移植超急性排斥反应无效，并 且有多种副作用，如常见的就有骨髓抑制、肝肾毒性、上消化道出血、脱发等 等。我们筛选到的多肽化合物可以特异地阻断异种器官移植超急性排斥反应， 但不影响人体的整体免疫反应，可避免常用免疫抑制剂引起的副作用。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服目前临床上异种器官移植术中出现的排斥反应，设计 并提供一种多肽有机化合物。本专利技术提供的多肽有机化合物，选自a、 b、 c、 d、 e、 f、 g、 h八种中的一种，能与抗B型血单克隆抗体特异性结合，溶于水，各氨基酸之间通过肽键 相连。本专利技术提供的多肽有机化合物a的氨基酸序列为 Phe-His-Glu-Asn-Trp-Pro-Ser，分子量为915. 96 ;多肽有机化合物b的氨基 酸序列为Phe-His-Glu-Phe-Trp-Pro-Thr，分子量为963.06;多肽有机化合 物c的氨基酸序列为Ser-Met-Leu-Asp-Thr-Pro-Thr，分子量为763. 86;多 肽有机化合物d的氨基酸序列为Cys-Leu-Pro-Thr-lie-Thr-Asn-Thr-Cys， (其中第l位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为963. 15;多 肽有机化合物e的氨基酸序列为Cys-His-Ile-Leu-Gly-Ser-Thr-Ala-Cys，(其 中第l位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为902.07;多肽有 机化合物f的氨基酸序列为Cys-His-Pro-Thr-Trp-Ser-Ser-Leu-Cys，(其中 第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为1031. 18;多肽有机 化合物g的氨基酸序列为Cys-His-Gin-Thr-Pro-Leu-Ser-Thr-Cys，(其中第 1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为987. 13;多肽有机化 合物h的氨基酸序列为Cys-Lys-Pro-Thr-Ser-Thr-Leu-Thr-Cys，(其中第1 位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为951. 14。本专利技术的第二个目的是提供多肽有机化合物a、 b、 c、 d、 e、 f、 g、 h在制 备治疗器官移植术中控制异种移植中超急性排斥反应的药物中的应用。本专利技术的优点有① 本专利技术的多肽有机化合物，由于分子组成只有7 9个氨基酸，故可以 用人工化学合成方法大量合成，可以得到大量较纯的小肽。② 能与人体内预存的抗猪抗原的抗体特异性结合，从而封闭它的作用， 可以抑制猪器官移植至人体时发生的超急性排斥反应。③ 本专利技术的多肽有机化合物与人体内预存的天然抗a -Gal抗体的结合位点是特异性的，正好起到封闭抗体作用，从而避免了由于作用位点特异性不强 而带来的副作用。④ 由于本专利技术的多肽有机化合物的组成氨基酸数量较少，开发成药物后容 易被机体利用而起效。附图说明图1为三种线性多肽与水苏糖竞争性与抗B单克隆抗体结合的ELISA抑制 率曲线图。图2为五种C7C环肽与水苏糖竞争性与抗B单克隆抗体结合的ELISA抑制 率曲线图。图3为多肽化合物抑制人天然抗体引起的猪红细胞的凝集反应结果图。具体实施方式本专利技术结合以下实施例及附图作进一步说明。实施例l:用抗B型血单克隆抗体作为靶蛋白，用噬菌体展示技术筛选得 到阳性噬菌体克隆。噬菌体展示技术是利用分子生物学技术将合成的一组一定长度的随机序列 寡核苷酸片段克隆到特定表达载体中，使其表达产物以融合蛋白的形式呈现在 噬菌体表面。由于肽库中包含了该长度小肽的所有可能的氨基酸排列顺序，每 一个噬菌体表面蛋白呈现其中的一种肽段，便于筛选；筛选到的噬菌体，可以 通过细菌扩增。用噬菌体肽库感染大肠杆菌，使重组入噬菌体的随机的寡核苷 酸片段在大肠杆菌内复制，并在噬菌体的外壳蛋白中表达出来。然后，把靶蛋 白包被在酶标板上。用此噬菌体肽库与靶蛋白混合后，洗板。如果噬菌体上的 外壳蛋白能与靶蛋白结合，就不会被洗掉。最后用酸或亲和洗脱液把噬菌体洗 脱下来。连续这样筛3-4轮，就能筛出与靶蛋白结合力较强的噬菌体。测此噬 菌体的DNA序列得到重组寡核苷酸的序列，亦知道了相应的多肽的序列。然后 可通过人工化学合成的方法得到多肽。本专利技术提供的多肽有机化合物，包括a、 b、 c、 d、 e、 f、 g、 h八种，能 与抗B型血单克隆抗体特异性结合，溶于水，各氨基酸之间通过肽键相连。本专利技术提供的多肽有机化合物a的氨基酸序列为-Phe-His-Glu-Asn-Trp-Pro-Ser，分子量为915. 96 ;多肽有机化合物b的氨基 酸序列为Phe-His-Glu-Phe-TYp-Pro-Thr，分子量为963. 06;多肽有机化合 物c的氨基酸序列为Ser-Met-Leu-Asp-Thr-Pro-Thr，分子量为763.86;多 肽有机化合物d的氨基酸序列为Cys-Leu-Pro-Thr-Ile-Thr-Asn-Thr-Cys， (其中第l位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为963. 15;多 肽有机化合物e的氨基酸序列为Cys-His-lie-Leu-Gly-Ser-Thr-Ala-Cys，(其 中第l位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为902.07;多肽有 机化合物f的氨基酸序列为Cys-His-Pro-Thr-Trp-Ser-Ser-Leu-Cys，(其中 第1位的Cys与第9位的Cys之间形成二硫键)，分子量为1031. 18;多肽有机 化合物g的氨基酸序列为Cys-His-Gln-Thr-Pro-Leu-Ser-Thr-本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种多肽有机化合物，其特征是：提供的多肽有机化合物选自氨基酸序列为：Ｃｙｓ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｔｈｒ－Ｃｙｓ，其中第１位的Ｃｙｓ与第９位的Ｃｙｓ之间形成二硫键，分子量为９５１．１４的多肽有机化合物ｈ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：詹金彪，郎建社，许林海，严志焜，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
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