一步层析法制备高纯度紫菜藻红蛋白制造技术

本发明专利技术涉及一步层析法制备高纯度紫菜藻红蛋白方法，属于海洋生物功能成分制备技术。紫菜经５０倍体积的ＰＢＳ（１ｍＭ，ｐＨ６．８）缓冲液溶胀，捣碎，再用８００瓦超声波进行细胞破碎８００秒，得到粗提物，用饱和度４５％硫酸铵沉淀，再经０．１ｕｍ膜微滤、１０ｋＤａ膜超滤及饱和度２０％的硫酸铵反相沉淀，在４℃用饱和度６５％的硫酸铵沉淀结晶，一周后，过ＤＥＡＥ　　ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－５２阴离子交换层析柱，用不同浓度ＮａＣｌ的ＰＢＳ（１ｍＭ，ｐＨ６．８）缓冲液梯度洗脱，分离纯化得到紫菜藻红蛋白。纯度（Ａ↓［５６２ｎｍ］／Ａ↓［２８０ｎｍ］）达到５．２４，符合试剂级要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一步层析法制备高纯度的紫菜藻红蛋白，属于海洋生物功能成分制备技术， 用于研制开发医药保健品和功能食品的基料。二、
技术介绍
藻胆蛋白是藻类藻胆体中的捕光色素蛋白，能把捕获的光能高效的传递给叶绿素， 从而使海藻的光合作用得以发生。藻胆蛋白主要包括藻蓝蛋白(Phycocyanin)、藻红蛋 白(Phycoerythrim)和别藻蓝蛋白(Allphycocyanin)三类，其中藻蓝蛋白(PC)和藻 红蛋白(PE)在藻体中的含量较为丰富。藻胆蛋白在藻类中的含量可以达到细胞千重 的28%以上。藻胆蛋白是一种非常重要的光动力药物的原料，特有的光敏效应可辅助激光治癌， 在病灶部位富集，吸收光后高效产生自由基和活泼态氧，从而实现对肿瘤细胞的杀伤。 有光毒性而没有暗毒性，在人体内代谢快。藻胆蛋白还具有抗氧化清除自由基和提高免 疫力的功效。其制作的免疫荧光标记抗体，检测灵敏度远远高于传统的荧光标记物，可 用于特殊分子定位和重要分子检测，包括SARS病毒的免疫分子检测，能准确地诊断肿 瘤、确定病变部位和病情轻重程度等。藻胆蛋白可作为功能因子用于保健食品和功能食 品及特殊饲料，同时还是理想的天本文档来自技高网...

【技术保护点】
一步层析法制备高纯度的紫菜藻红蛋白，其特征在于：　　　　（１）紫菜经５０倍体积的１ｍＭ　　ＰＢＳ　　ｐＨ６．８缓冲液溶胀，组织捣碎，再用８００瓦功率超声波作用８００秒进行细胞破碎，得到藻红蛋白的粗提物，用饱和度为４５％的硫酸铵沉淀；　　　　（２）将沉淀用１ｍＭ　　ＰＢＳ　　ｐＨ６．８缓冲液溶解，经０．１ｕｍ微滤膜微滤、１０ｋＤａ超滤膜超滤后，透析，用饱和度为２０％的硫酸铵进行反相沉淀，离心，对上清夜进行透析，用饱和度为６５％的硫酸铵沉淀结晶，在４℃条件下存放一周；　　　　（３）将晶体用１ｍＭ　　ＰＢＳ　　ｐＨ６．８缓冲液溶解，透析，过ＤＥＡＥ　　ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－５２阴离子交换层析柱，用含离...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡秋辉，杨方美，顾丽，辛志宏，刘承初，周玉林，赵立艳，黎军胜，顾卫明，高军，徐娟，顾俊，余芳，徐春，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]