一种蛇毒抗肿瘤的细胞毒素及其生产工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种蛇毒抗肿瘤的细胞毒素及其生产工艺，属生化与生物医药领域。本发明专利技术蛇毒细胞毒素取之于现有眼镜蛇毒冻干粉。本发明专利技术工艺为应用冻干眼镜蛇毒用已知的缓冲液溶解上ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　　Ｈ．Ｐ阳离子交换柱（５．０×２９ｃｍ），用磷酸缓冲液和ＮａＣｌ阶段性梯度洗脱，１０ｍｌ／管，流速１８ｍｌ／ｍｉｎ，用＊　　ＫＴＡＥｘｐｌｏｒｅｒ蛋白纯化系统监测收集洗脱峰，收集具有细胞毒作用的ⅩⅡ、ⅩⅢ峰，再经Ｓｏｕｒｃｅ　　３０ＲＰＣ反相层析，分别得到细胞毒素ⅩⅡ和细胞毒素ⅩⅢ，它们分子量约为６０００－７０００道尔顿，等电点大于１０。本发明专利技术获得不含ＰＬＡ↓［２］的蛇毒抗肿瘤的细胞毒素纯品，比现有技术纯化步骤具有快速重复性好，适合放大生产等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生化与生物医药领域，具体的说是一种蛇毒细胞毒素及其生产 工艺。技术背景细胞毒素的分离纯化最早是在1947年由印度学者用盐析法(Na2S04和NaCl)从印度眼镜蛇毒中分离得到的；接着RavdonatandHoller用纸层析法；Braganca等经CM-celMose离子交换层析、Sephadex G-50凝胶过滤等步骤分离出CytotoxinP6;杜雨苍等用SP-SephadexC-25阳离子交换层析从中华眼镜蛇毒中分离出5个细胞毒素。但随着对细胞毒素研究的深入，许多学者注意到采用传统的分离方法会出现痕量的磷脂酶A2 (PLA2) (0.1 0.5%,w/w)与CTX共同洗脱下来，而PLA2与CTX会产生协同作用，可使CTX的溶血作用显著增强，也可使它的细胞毒性增加数倍，严重干扰了对CTX的生物学活性及其作用机制的研究，因此分离得到不含PLA2的CTX很重要。Hodges等介绍了一种新的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素同系物的方法(1)粗毒过SephadexG-50凝胶过滤柱去除大分子杂蛋白，得主要毒素峰；(2)主峰过SP-SephadexC-25阳离子交换层析，线本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗肿瘤作用的蛇毒细胞毒素，其特征是：蛇毒细胞毒素取之于现有眼镜蛇毒冻干粉。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许云禄，
申请(专利权)人：福建医科大学，
类型：发明
国别省市：35[中国|福建]