肝素结合蛋白的重组生产制造技术

一种用于回收并纯化在异源宿主细胞中生产的、重折叠的肝素结合蛋白的方法包括将该溶解的蛋白质与聚阴离子诸如硫酸右旋糖苷一起温育的步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肝素结合蛋白的重组生产 相关申请本申请要求下述申请的优先权及利益2005年12月22日提交的美国临时 申请流水号60/753,615和2006年7月14日提交的美国临时申请流水号 60/807,432，在此完整收录其说明书。专利
本专利技术涉及用于获得在细胞培养物中生产的肝素结合蛋白的方法。本发 明包括用于回收和纯化重折叠的肝素结合蛋白的方法，该蛋白质在原核宿主 细胞中生产并且存在于这些细胞中，典型地存在于周质空间或胞内空间。该 在原核宿主细胞中生产的肝素结合蛋白还可以被发现作为可溶性蛋白质或 者可溶性和不溶性蛋白质的混合物。专利技术背景已知一大批天然存在的、有生物学活性的多肽能结合肝素。这样的肝素 结合多肽包括细胞因子，诸如血小板因子4和IL-8 (Barber et al.， (1972) Biochim. Biophvs. Acta, 286:312-329; Handin et al.， (1976) J. Biol. Chem.' 251:4273-422; Loscalzo et al., (1985) Arch. Biochem. Biophys., 240:446本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于从原核细胞培养物中回收肝素结合蛋白的方法，该方法包含以下步骤：　（ａ）从所述原核细胞培养物的周质中分离所述肝素结合蛋白；　（ｂ）在包含离液剂和还原剂的第一缓冲溶液中变性所述分离的肝素结合蛋白；　（ｃ）在包含离液剂和硫酸化聚阴离子试剂的第二缓冲溶液中温育所述变性的肝素结合蛋白，温育的时间和条件使得肝素结合蛋白发生重折叠；和　（ｄ）回收所述重折叠的肝素结合蛋白，其中与没有硫酸化聚阴离子试剂的温育相比回收的重折叠的肝素结合蛋白有大约２到５倍的增加。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：米歇尔D巴特勒，杰弗里L克莱兰，戴维W卡恩，谢利皮扎罗，查尔斯H施梅尔泽，玛乔丽E温克勒，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]