蒺藜中甾体皂苷的微波提取技术制造技术

本发明专利技术提供一种蒺藜中甾体皂苷的微波提取技术：称取蒺藜样品于微波萃取瓶中，加入乙醇，置于ＭＡＳ－Ⅱ型常压微波辅助合成／萃取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽滤，然后在旋转蒸发器上蒸干溶剂即得到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用ＨＣｌ溶液对微波提取的甾体皂苷进行水解，水解后得到蒺藜甾体皂苷相应的皂苷元，用氯仿溶解后过滤，进行ＧＣ－ＭＳ检测。本发明专利技术的技术采用微波辅助热回流法提取蒺藜甾体皂苷，结合气相色谱质谱法对蒺藜甾体皂苷元进行检测，通过对提取条件进行优化、使前处理简便和操作简单，而且提取效率高、环保无毒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分析化学领域，更具体涉及一种蒺藜中甾体皂苷的微波提取技术。
技术介绍
中药是我国的传统国粹，中药有效成分和中药现代化研究是中药研究的热点。蒺藜在我 国有悠久的用药历史，其化学成分的研究始于20世纪60年代。蒺藜含有丰富的甾体皂苷成 分，能够刺激人体垂体促黄体生成素的分泌，进而促进睾酮的分泌，提高血睾酮的水平，增 加肌肉力量，促进体力的恢复，从而显著提高运动员的运动能力。但是，中药组成复杂，受 预处理和检测技术的限制，中药有效成分的分离提取一直是中药研究的瓶颈。目前蒺藜甾体 皂苷类有效成分的研究停留在蒺藜总皂苷的分离提取，尚未有单一甾体皂苷元的分离提取报 道，更无对其运动营养功效的探讨。由于蒺藜基体复杂，留体皂苷种类繁多，应用传统预处 理方法提取蒺藜甾体皂苷类物质得率较低。而且，甾体皂苷类物质一般难气化，异构现象严 重，气相和液相色谱的分离检测效果不甚理想。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种蒺藜中甾体皂苷的微波提取技术，该技术采用微波辅助热回流 法提取蒺藜留体皂苷，结合气相色谱质谱法对蒺藜甾体皂苷元进行检测，通过对提取条件进 行优化、使前处理简便和操作简单，而且提取效率高、环保无毒。本专利技术的蒺藜中留体皂苷的微波提取技术称取0.5-5.0 g蒺藜样品于微波萃取瓶中，加 入10-100 mL的70。/。-100。/。 (v/v)乙醇水溶液，放入搅拌子，置于MAS-II型常压微波辅助 合成/萃取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽滤，然后在旋转蒸发器上蒸干即得 到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用10-100 mL、浓度为2 mol/LHCl溶液对微波提取的甾体皂 苷进行水解，水解温度为卯'C，时间lh，水解后得到蒺藜甾体皂苷相应的皂苷元，用5mL 氯仿溶解并过滤后，进入GC-MS检测。本专利技术的显著优点本专利技术采用微波辅助热回流法提取蒺藜甾体皂苷，结合气相色谱质谱法对蒺藜甾体皂苷 元进行检测。微波辅助萃取相比传统加热方法，具有提取时间短，提取效率高的特点。微波 具有很强的穿透力，可以在反应物内外部分同时均勾、迅速的加热，故提取效率较高。具有较大 介电常数的化合物如水、乙醇、乙腈等，在微波作用下会迅速被加热,因此微波萃取特别适合大 极性生物有效成分如甾体皂苷的提取。在最优的微波提取条件下，蒺藜甾体皂苷的一次提取 率为90.3% (以24h索氏提取得到的甾体皂苷含量为100%得率)，而常规的溶剂热回流法仅为65.0%，且需要3h，而微波提取时间只需5min。可见，微波辅助提取蒺藜甾体皂苷具有提 取得率高，节省时间等优点，并可减少有机溶剂对环境的污染，节省能源。蒺藜甾体皂苷结构复杂，极性较大，虽然用液相色谱可以对甾体皂苷进行分离，但是一 般甾体皂苷紫外响应差、甚至无紫外响应，用紫外检测比较困难,需要对甾体皂苷进行衍生， 因而操作繁琐。而采用气相色谱质谱法检测提取的蒺藜甾体皂苷元含量具有操作简便，前处 理简单等优点。 附图说明图l蒺藜甾体皂苷微波提取GC-MS总离子流图，图中所标l-4号峰l.Tigogenin(M+ 416 amu); 2. Gitogenin (M+ 432 amu); 3. Hecogenin (M+ 430 amu); 4. Neohecogenin (M+ 430 amu).具体实施例方式本专利技术的蒺藜釆用2007年5月湖北产蒺藜果实。称取0.5-5.0 g蒺藜样品于微波萃取瓶中，加入10-100 mL 70% (v/v)的乙醇，放入搅拌 子，置于MAS-II型常压微波辅助合成库取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽 滤，然后在旋转蒸发器上蒸千溶剂即得到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用10-100 mL的2 mol/LHCl溶液对微波提取的甾体皂苷进行水解，水解温度为卯'C，时间lh，水解后得到蒺 藜甾体皂苷相应的皂苷元，用5mL氯仿溶解后过滤，进行GC-MS检测。所述蒺藜果实经干燥后，用粉碎机粉碎、过筛，得到粒度0.18-0.15 mm的样品，装入袋 中，储存在干燥器中，备用。MAS-II型常压微波辅助合成/萃取反应仪的提取条件为调节微波功率为300-500 W，设 置监控温度为70-80 °C,搅拌速度300-500 r/min，提取时间5-15min。GC-MS条件为，色谱柱HP-5MS柱；载气高纯氦；流速1.5mL/min;进样口温度 260'C;分流比40:1;色谱质谱接口温度290 °C; EI源70 eV;离子源温度230 °C;溶 剂延迟3 min;气相升温程序初始温度为200 °C，以25 'C/min升至270 'C后以1 °C/min至 290 。C。最隹实施例蒺藜采用2007年5月湖北产蒺藜果实。称取1.0g蒺藜样品于微波萃取瓶中，加入20mL70。/。 (v/v)的乙醇，放入搅拌子，置 于MAS-II型常压微波辅助合成库取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽滤后， 在旋转蒸发器上蒸干溶剂即得到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用15mL的2mol/LHCl溶液对微波提取的甾体皂苷进行水解，水解温度为90'C，时间lh，水解后得到蒺藜甾体皂苷相 应的皂苷元，用5mL氯仿溶解后过滤，进行GC-MS检测。所述蒺藜果实干燥后，用粉碎机粉碎、过筛，得到粒度0.18-0.15 mm的样品，装入袋中， 储存在干燥器中，备用。MAS-II型常压微波辅助合成库取反应仪的提取条件为调节微波功率为500W，设置 监控温度为80 °C，搅拌速度300 r/min，提取时间5 min。GC-MS条件为，色谱柱HP-5MS柱；载气高纯氦；流速1.5mL/min;进样口温度 260'C;分流比40:1;色谱质谱接口温度290'C; EI源70 eV;离子源温度230 °C;溶 剂延迟3 min;气相升温程序初始温度为200 °C，以25 °C/min升至270 'C后以1 °C/min至 2卯°C。在最佳实施例的微波提取条件下，蒺藜留体皂苷的一次提取率为90.3% (以24 h索氏提 取得到的甾体皂苷含量为100%得率)，微波提取时间只需5min。 其它实施例一蒺藜采用'2007年5月湖北产蒺藜果实。称取1.0g蒺藜样品于微波萃取瓶中，加入10mL70。/。 (v/v)的乙醇，放入搅拌子，置 于MAS-II型常压微波辅助合成席取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽滤，然 后在旋转蒸发器上蒸干溶剂即得到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用15mL的2mol/L的HC1 溶液对微波提取的甾体皂苷进行水解，水解温度为卯'C,时间lh，水解后得到蒺藜甾体皂 苷相应的皂苷元，用5mL氯仿溶解后过滤，进行GC-MS检测。所述蒺藜果实干燥后，用粉碎机粉碎、过筛，得到粒度0.18-0.15 mm的样品，装入袋中， 储存在干燥器中，备用。MAS-II型常压微波辅助合成/萃取反应仪的提取条件为调节微波功率为300W，设置 监控温度为80 °C，搅拌速度300 r/min,提取时间10min。GC-MS条件为，色谱柱HP-5MS柱；载气高纯氦；流速1.5mL/min;进样口温度260°C;分流比40:1;色谱质谱接口温度290'C; EI源70 eV;离子源温度230 。C;溶剂延迟3 min本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蒺藜中甾体皂苷的微波提取技术，其特征在于：称取０．５－５．０ｇ蒺藜样品于微波萃取瓶中，加入１０－１００ｍＬ的７０％－１００％（ｖ／ｖ）乙醇水溶液，置入搅拌子，置于ＭＡＳ－Ⅱ型常压微波辅助合成／萃取反应仪中提取，将上述得到的提取液经过减压抽滤，然后在旋转蒸发器上蒸干即得到蒺藜甾体皂苷的粗提取物；采用１０－１００ｍＬ　２ｍｏｌ／Ｌ　ＨＣｌ溶液对微波提取的甾体皂苷进行水解，水解温度为９０℃，时间１ｈ，水解后得到蒺藜甾体皂苷相应的皂苷元，用５ｍＬ氯仿溶解后过滤，进ＧＣ－ＭＳ检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张兰，张卓旻，李天麟，陈国南，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：35[中国|福建]