丙二酰基人参皂苷的制备工艺及其治疗糖尿病的药物用途制造技术

本发明专利技术公开一种丙二酰基人参皂苷制备工艺及其治疗糖尿病的药物用途，同时还提供了一种丙二酸单酰基三七皂苷－Ｒ４新化合物和它的医用用途。鲜人参粉碎后用乙醇在室温下冷浸提取，将提取液减压回收溶剂，浓缩为水溶液，用正丁醇∶水反复萃取，水层溶液浓缩后上大孔树脂柱，乙醇洗脱，回收乙醇得丙二酰基人参皂苷；本发明专利技术制备工艺操作简单，提取率高，为丙二酰基人参皂苷的工业化生产提供了保证。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及治疗糖尿病的药物，尤其是公开一种丙二酰基人参皂苷制备工艺及其治疗糖尿病的药物用途，同时还提供了一种丙二酸单酰基三七皂苷-R4新化合物和它的医用用途，属于中医药学

技术介绍
本专利技术涉及的丙二酰基人参皂苷(Malonyl-ginsenosides)又称为丙二酸单酰基人参皂苷，主要包括M-Rb1、M-Rb2、M-Rc、M-Rd和M-NR4系列化合物。目前，丙二酰基人参皂苷的商业化生产中，用正丁醇萃取总皂苷时，这部分皂苷易混溶于水层，被当作糖分、无机盐等水溶性杂质而除掉；将总皂苷提取物直接上大孔树脂柱，也会造成一部分水溶性皂苷随水而流失。通过试验对比，人参各部位的丙二酰基人参皂苷的含量，以其鲜人参须根中丙二酸单酰基人参皂苷的总含量高达4％以上，而生晒参、红参及其它加工品种中该类皂苷的含量明显减少，甚至没有。在人参的各种制品中一方面丙二酰基人参皂苷在加工中损失一部分，另一方面是加工过程中脱掉丙二酰基转化生成其它皂苷。
技术实现思路
本专利技术公开一种丙二酰基人参皂苷的制备方法。本专利技术丙二酰基人参皂苷在制备治疗糖尿病的药物中的用途。本专利技术还公开一种新化合物丙二酸单酰基三七皂苷-R4(简称M-NR4)及其医用用途。本专利技术涉及的丙二酰基人参皂苷具有下述结构通式 丙二酰基人参皂苷包括M-Rb1、M-Rb2、M-Rc、M-Rd和本专利技术的化合物M-NR4其中，丙二酰基人参皂苷的制备工艺包括以下步骤以1kg鲜人参(须根、支根、根茎、主根等)为原料，切碎，用10-20kg的20-98％的乙醇在室温下冷浸提取2-6次，每次8-16小时，提取过程要充分搅拌，将提取液在40℃条件下减压回收溶剂，浓缩为水溶液，用正丁醇水反复萃取，水层溶液浓缩后上大孔树脂柱，用水、30％、60％乙醇洗脱，60％乙醇部分回收乙醇得到的水溶液冻干后保存备用，60％乙醇部分为丙二酰基总皂苷，再开发制剂。每步实验过程越短越好，得到的样品要低温保存。丙二酸单酰基三七皂苷-R4(简称M-NR4)具有以下结构 分子式C62H102O30分子量1326为3-O--20-O--20(S)-原人参二醇。M-NR4的制备工艺为取上述制备丙二酰基人参皂苷的60％乙醇相(丙二酸单酰基总皂苷)10-30g，干法上样，用硅胶干柱减压分离(硅胶G2Kg青岛海洋化工厂生产)，用洗脱液(CHCl3-MeOH-H2O 65∶35∶10下层)洗至柱底，然后分割切断，用硅胶薄层检查，合并含有M-NR4组份。将M-NR4组份再上硅胶干柱(600g、300～400目、4.5×60cm)，用氯仿-甲醇-水(6∶4∶1)洗脱，分断切割后用硅胶薄层检查，将M-NR4上H+型阳离子交换树脂柱，继续用乙醇洗脱，洗脱液在40℃条件下减压浓缩，浓缩液经乙醇反复重结晶，得化合物即丙二酸单酰基三七皂苷-R4。本专利技术还提供了据有很强的药理活性的一类丙二酰基人参皂苷制剂，其成分包含5种化合物M-NR4、M-Rb1、M-Rb2、M-Rc和M-Rd。本专利技术丙二酰基人参皂苷的药物含有治疗有效量的提取物及单体为活性成分，以及含有一种或多种药学上可接受的载体。本专利技术可以组合物的形式通过口服、直肠、静脉、肌肉注射或胃肠外给药方式施用于这种治疗的患者。按照药学领域的常规生产方法制备各种剂型如片剂、颗粒剂、冲剂、胶囊、栓剂、喷雾剂、缓释剂、口服液体剂型和注射剂。也可使其活性成分与一种或多种载体或药物混合，制成所需剂型。上文的载体是指药学领域常规的药物载体，包括如防腐剂、色素、稀释剂、赋形剂，填充剂，粘合剂，矫味剂，湿润剂，崩解剂，吸收促进剂，表面活性剂，吸附载体。本专利技术的的药物作用经过药理学试验筛选，对该类皂苷进行了实验性糖尿病鼠(四氧嘧啶型、链尿霉素型、肾上腺素性和外源性葡萄糖型)的降糖实验，发现该类化合物具有明显的降糖效果。下述的药理试验证实了本专利技术化合物的降糖药理活性。1试验材料、仪器和试剂 1.1实验材料动物系昆明种小白鼠，体重18-22g，雌雄均用。分别购自长春生物制品研究所动物室，许可证号2002-0001；吉林大学基础医学院动物实验中心，许可证号2003-0001。1.2仪器752型紫外光栅分光光度计，上海第二分析仪器厂制造；A-6半自动生化分析仪，北京松上技术有限公司。1.3药物及试剂丙二酰基人参皂苷、丙二酸、人参二醇组皂苷和丙二酸单酰基三七皂苷-R4均由本实验组提供。阳性药胰岛素注射液，江苏万帮生化医药股份有限公司，批号0307214。葡萄糖，北京化工厂，批号20000901。总胆固醇试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司，批号050105。盐酸肾上腺素注射液，北京市永康药业有限公司，批号03070241。四氧嘧啶，Sigma产品。链脲佐菌素，Sigma产品。血糖试剂盒，北京北化康泰临床试剂有限公司，批号041119。肝糖元测定试剂盒，南京建成生物工程研究所，批号20050307。柠檬酸，北京化工厂，批号991105；柠檬酸钠，北京化工厂，批号9911505。2试验方法2.1对正常动物血糖的影响取健康小鼠60只，随机分为五组空白对照组、阳性药胰岛素注射液114.29u/kg给药组，试药丙二酰人参皂苷120、60、30mg/kg三个剂量给药组，每天静脉注射给药一次，连续给药三天。末次给药前将小鼠饥饿16小时，末次给药后15分钟将小鼠断头处死，取血，分离血清，以血糖试剂盒测血糖含量。2.2对高血糖动物模型的影响2.2.1对链脲佐菌素致高血糖动物模型的影响取健康小鼠72只，随机取12只作为空白对照组，其余小鼠均静脉注射链脲佐菌素200mg/kg(10ml/kg)，次日将这60只小鼠随机分为六组模型对照组，阳性药胰岛素注射液114.29u/kg给药组，试药丙二酰人参皂苷120、60、30mg/kg三个剂量给药组。分组后按组别静脉注射给药，每天给药一次，连续给药四天。末次给药前将小鼠饥饿16小时，末次给药后15分钟，将小鼠断头处死，取血，分离血清，以血糖试剂盒测血糖含量。2.2.2对四氧嘧啶致高血糖动物模型的影响取健康小鼠72只，随机取12只作为空白对照组，其余小鼠均静脉注射四氧嘧啶80mg/kg(10ml/kg)，次日将这60只小鼠随机分为六组模型对照组，阳性药胰岛素注射液114.29u/kg给药组，试药丙二酰人参皂苷120、60、30mg/kg三个剂量给药组。分组后按组别静脉注射给药，每天给药一次，连续给药四天。末次给药前将小鼠饥饿16小时，末次给药后15分钟，将小鼠断头处死，取血，分离血清，以血糖试剂盒测血糖含量。2.2.3对肾上腺素致高血糖动物模型的影响取健康小鼠72只，随机分为六组空白对照组，模型对照组，阳性药胰岛素注射液114.29u/kg给药组，试药丙二酰人参皂苷120、60、30mg/kg三个剂量给药组。每天静脉注射给药一次，连续给药三天，末次给药前将小鼠饥饿16小时，末次给药后15分钟，除空白对照组外，其余各组动物均腹腔注射肾上腺素注射液100μg/kg(10ml/kg)，30分钟后将小鼠断头处死，取血，分离血清，用血糖试剂盒测血糖含量。2.2.4对外源性葡萄糖升高血糖动物模型的影响取健康小鼠72只，随机分为六组空白对照组，模型对照组，阳性药胰岛素注射液114.29u/kg给药组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丙二酰基人参皂苷的制备方法，包括以下步骤：将１ｋｇ鲜人参粉碎后用１０－２０ｋｇ的２０－９８％的乙醇在室温下冷浸提取２－６次，每次８－１６小时，提取过程要充分搅拌，将提取液在４０℃条件下减压回收溶剂，浓缩为水溶液，用正丁醇∶水反复 萃取，水层溶液浓缩后上大孔树脂柱，用水、３０％、６０％乙醇洗脱，６０％乙醇部分回收乙醇得到的水溶液冻干后保存备用，６０％乙醇部分为丙二酰基总皂苷，回收乙醇得本专利技术；丙二酰基人参皂苷包括Ｍ－Ｒｂ１、Ｍ－Ｒｂ２、Ｍ－Ｒｃ、Ｍ－Ｒｄ和Ｍ－ＮＲ４。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙光芝，李向高，王继彦，刘志，孙晓波，徐慧波，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：82[中国|长春]