本发明专利技术涉及N‑末端截短的白介素(IL)‑38蛋白、或其功能变体，还涉及编码该截短的IL‑38肽的核酸和载体以及包含这些核酸或载体的重组细胞。本发明专利技术显示，IL‑38为N末端加工的，以及该细胞因子的截短形式在巨噬细胞中起免疫活化拮抗剂的作用。这表明了该截短的细胞因子在治疗和预防自身免疫病症中的用途。本发明专利技术还提供了包含该截短的IL‑38蛋白的药物组合物，以及用于筛选截短的IL‑38的功能的调节剂的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】N末端截短的白介素-38本专利技术的领域本专利技术涉及N-末端截短的白介素(IL)-38蛋白、或其功能变体，还涉及编码该截短的IL-38肽的核酸和载体以及包含这些核酸或载体的重组细胞。本专利技术显示，IL-38经过N末端加工，并且该细胞因子的截短形式在巨噬细胞中起免疫活化拮抗剂的作用。这表明了该截短的细胞因子在治疗和预防自身免疫病症中的用途。本专利技术还提供了包含该截短的IL-38蛋白的药物组合物，以及用于筛选截短的IL-38的功能的调节剂的方法。描述IL-1家族细胞因子和受体为尤其调节免疫的异质性的蛋白组。最初，4种IL-1家族细胞因子被集中地表征(IL-lα、IL-1β、IL-lRa和IL-18)，揭示了免疫调节的基本原理，其中的一些已转化为临床应用。剩下的7种IL-1家族细胞因子是通过基因数据库的软件分析(silicoanalysis)而鉴定(IL-33、IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-36Ra、IL-37和IL-38)。近些年，进行了一些重要研究来考察它们诱导或调节免疫应答的相关性。结论是，IL-1家族细胞因子在免疫方面展示了广谱功能，包括诱导Th1和Th2炎症以及调节抗炎或前消散效应。在机制水平上，触发炎症是通过具有受体激动剂(IL-lα、IL-1β、IL-18、IL-33、IL-36)功能的IL-1家族细胞因子所介导，这通过IL-1家族受体拮抗剂(IL-lRa,IL-36Ra)来抗衡。值得注意的是，完全的受体激动剂或拮抗剂功能一般要求IL-1家族细胞因子的N末端加工，通常是从前体生成成熟的细胞因子。这些事件中最突出的地方可能是利用炎性体的IL-1β成熟。IL-1家族受体以存在细胞外免疫球蛋白结构域和信号转导所需的细胞内TIR结构域为特征。IL-1受体家族包括具有已知配体和功能的4个成员：IL-1R1(IL-1RI)、IL-1R4(ST2)、IL-1R5(IL-18R)、IL-1R6(IL-lRrp2)；2个共受体:IL-1R3(IL-lRAcP)、IL-1R7(IL-18AcP)；1个诱骗受体:IL-1R2(IL-IRII)；以及3个孤儿受体TIR8(SIGIRR)、TIGIRR-1(IL-1RAPL2)、TIGIRR-2(IL-1RAPL1)。孤儿受体的命名仍是不明确的。IL-1RAPL1也称为TIGIRR-2，起初命名为IL-1R8。但在最近，其被称作IL-1R9或IL-1R10。为了避免混淆，在当前手稿中，专利技术人将使用术语IL-1RAPL1。IL-1RAPL1在脑中高度表达，参与了小脑发育、智力迟钝和认知缺陷。与IL-1受体家族其它成员的主要结构差异为IL-1RAPL1的细胞内结构域中C末端150个氨基酸长的延伸，这也存在于其紧密同源物IL-1RAPL2和调节性受体TIR8中。这种结构在细胞内信号转导中的作用还未有描述。功能性研究提示，IL-1RAPL1的活化和下游信号转导机制与IL-1受体家族的其它成员不同。有证据表明，IL-1RAPL1选择性地激活JNK，而JNK参与了免疫活化等。实际上，功能RNAi筛选揭示，IL-lRAPLl调节与凋亡细胞相互作用后的巨噬细胞表型。IL-38，也称为IL1F10，为IL-1家族的最新增加。其与IL-1Ra共有41％的同源性，与IL-36Ra有43％的同源性，因此被认为是IL-1受体拮抗剂。实际上，最近显示，IL-38可结合IL-1R6，由此减少人白色念珠菌(C.albicans)刺激后或以低浓度施用添加IL-36后的细胞因子生成。然而，注意到LPS刺激联合IL-38后所生成的细胞因子的增加。通常，IL-38多态性与出现自身炎性病理学(例如脊椎关节炎、类风湿性关节炎或牛皮癣性关节炎)的增加的易感性相关，或者与CRP水平相关，提示了IL-38在调节引起这些状况的机制中的作用。细胞因子包括大量的哺乳动物免疫调节激素，它们由免疫系统的细胞分泌。它们通过与细胞表面的特异受体相互作用来发挥它们的生物学效应。因此，对细胞因子的生物学应答是由细胞因子的存在和其受体分子的表达二者来调节的。包括自身免疫、炎症和癌症疾病在内的很多哺乳动物疾病是与增加或以其它方式改动的细胞因子或细胞因子受体水平相关的，它们可能促进了免疫系统调节紊乱和疾病进展。因而，就这些疾病状态而言，能够阻断细胞因子的免疫调节或炎症效应的化合物应该具有明显的治疗活性。产生与不希望的免疫应答相关的免疫抑制的常规策略是基于广谱免疫抑制药物。此外，为了维持免疫抑制，免疫抑制药物治疗通常是终生命题。不幸的是，广谱免疫抑制药的使用与严重副作用(例如肿瘤、感染、肾毒性和代谢病症)的风险相关联。于是，新的免疫抑制疗法可能是有益的。所以，直至今天，没有令人满意的治疗手段来治疗或预防自身免疫疾病，并且始终亟需另外的免疫抑制剂，以便推进对患有与病理学或者甚至长期活化的免疫系统相关的疾病的患者的医疗护理。在第一方面，以上问题是通过分离的截短的IL-38蛋白、或其功能变体来解决，其中所述截短的IL-38蛋白与SEQIDNO:1的氨基酸序列比较为N末端截短的。在本文中，术语“截短的IL-38蛋白”指这样的IL-38多肽，其中已从全长IL-38多肽的氨基末端(或N-末端)区域去除氨基酸残基。在本专利技术上下文中，“截短的IL-38蛋白”不包括如SEQIDNO:1中显示的全长序列。术语蛋白的“功能变体”在本文是指这样的变体蛋白，其中与本专利技术相关的定义为亲和性和稳定性的功能基本上是保留的。因此，与所述功能无关的一个或多个氨基酸可以被替换。术语“功能变体”还应理解为指来自其它哺乳动物的同源物。优选地，本专利技术的功能变体保留了本文描述如SEQIDNO:2显示的截短的IL-38蛋白的免疫抑制能力。在优选的实施方案中，所述分离的截短的IL-38蛋白或其功能变体包括与SEQIDNO:1的氨基酸序列(全长IL-38)有至少50％序列相同性的氨基酸序列，特征在于该截短的IL-38蛋白不包括SEQIDNO:1中所示的全长氨基酸序列。术语“序列相同性”(或“序列同源性”)表明了对两等长的氨基酸序列或两等长的核苷酸序列之间的相同性程度的定量衡量。如果两对待比较序列不是等长的，则它们必须排列为最佳可能的匹配，带有空位插入或者选择性地在蛋白序列的末端截短。更优选的最小序列相同性百分比为至少70％，例如至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、以及至少99.5％、最优选100％(与SEQIDNO:1中显示的序列相比)，条件是所述截短的IL-38序列不包括如SEQIDNO:1中所示的IL-38全长序列。在优选的实施方案中，与野生型IL-38蛋白(SEQIDNO:1)比较，本专利技术所述截短的IL-38蛋白在其N末端截短了2至50个氨基酸。优选地，与SEQIDNO:1中所示的蛋白比较，所述截短的IL-38蛋白在其N末端截短了9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸。最优选为19个。根据本文描述的专利技术，N末端截短优选包含SEQIDNO:1的1至30位之间的至少2个、优选5个、最优选10个、最优选20个相邻的氨基酸。在其它本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的截短的IL‑38蛋白、或其功能变体，其中所述截短的IL‑38蛋白与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相比较为N末端截短的，并且其中所述截短包含SEQ ID NO:1的1至30位之间的至少10个相邻的氨基酸。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.25 EP 14178478.51.一种分离的截短的IL-38蛋白、或其功能变体，其中所述截短的IL-38蛋白与SEQIDNO:1的氨基酸序列相比较为N末端截短的，并且其中所述截短包含SEQIDNO:1的1至30位之间的至少10个相邻的氨基酸。2.根据权利要求1所述的分离的截短的IL-38蛋白，其中与野生型IL-38蛋白(SEQIDNO:1)相比较，所述截短的IL-38蛋白在其N末端截短了2至50个氨基酸。3.根据权利要求2所述的分离的截短的IL-38蛋白，其中与SEQIDNO:1中所示的蛋白相比较，所述截短的IL-38蛋白在其N末端截短了11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个氨基酸。4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离的截短的IL-38蛋白，具有不同于SEQIDNO:1的前100、50、30、20或19个氨基酸的N末端。5.一种核酸，包含编码权利要求1至4中任一项所述的截短的IL-38蛋白的序列。6.根据权利要求5所述的核酸，包含以下一种序列，当所述序列表达时产生由权利要求1至4中任一项所述的截短的IL-38蛋白组成且不为SEQIDNO:1的全长IL-38蛋白的多肽。7.一种载体，包含权利要求5或6的核酸。8.根据权利要求7所述的载体，其中该可表达的序列可操作地连接至启动子。9.一种重组细胞，包含权利要求5或6所述的核酸，...
【专利技术属性】
技术研发人员：安德里亚斯·魏格特，哈维尔·莫拉，伯恩哈德·布鲁内，克里斯蒂娜·迪尔曼，迈克尔·约翰·帕纳姆，格尔德·盖斯林格，
申请(专利权)人：弗劳恩霍夫应用研究促进协会，
类型：发明
国别省市：德国,DE
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