肝癌相关的基因家族制造技术

本发明专利技术总体上涉及肝细胞癌中基因表达的改变。本发明专利技术特别涉及与相应于ｍＲＮＡ种类的人类基因，其中与非癌变的肝组织相比，所述ｍＲＮＡ种类与在癌变的肝组织和癌变的肿瘤中差异表达。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术总体上涉及肝癌患者的肝组织中基因表达的改变，所述肝癌患者同时患有肝硬化或肝炎。本专利技术特别涉及与发炎或硬化的肝组织相比在肝癌组织或其它恶性肿瘤中差异表达的人类基因家族。
技术介绍
肝病一般，肝病被分类为导致肝脏功能故障或丧失全部功能的疾病。例如，肝硬化是一类慢性肝病，其中肝脏细胞被损坏然后被瘢痕组织代替，因此减少了正常肝组织的数量。肝硬化通常是由滥用酒精引起的，但是有肝炎感染的患者或有其它胆汁疾病的患者也会发展为肝硬化。通常认为慢性的乙型肝炎，丙型肝炎，和肝硬化都表现出与原发性肝癌有着很强的相关性，尽管所涉及的机理到目前还不是很了解(Wu等人，(2001)Oncogene 203674-3682)。大约10-20％的慢性乙型肝炎感染会导致原发性肝癌。其它的因素例如酒精的消费，营养贫乏和黄曲霉毒素也都与原发性肝癌和肝硬化相关。肝硬化的特征在于广泛存在的结节以及纤维化。受损的或死亡的肝细胞被纤维状的瘢痕组织代替，导致了纤维化。肝细胞以一种反常的形式进行再生，产生了被纤维组织围绕的结节。所述纤维化和结节的形成导致了对肝脏结构成分的扭曲和封闭，从而破坏了血流和生化功能。利用患者所表现出的明显症状对肝硬化进行诊断通常是容易的，但是在其早期阶段是很难诊断肝硬化的。在早期阶段出现的一些细微的改变包括红色的手掌，白色上体出现红点，腮腺肥大，手掌内腱的纤维化和男子乳房发育症。X光和放射性追踪检测测试法可能是有效的，但是诊断必须经常要通过肝脏的活组织切片检查来进行。与肝硬化的病理学不同，在原发性肝癌中，肝细胞成为异常的，它们生长不受控制并形成了恶性的肿瘤。所述疾病也称为肝细胞癌(HCC)或恶性肝细胞瘤。由于转移的结果从身体的其它部分扩散到肝脏的癌是一种不同的疾病。由于症状不明确，HCC在其早期很难进行诊断。这些症状包括食欲丧失和体重降低，发烧，疲劳和虚弱。随着癌症的发展，上腹部可能出现疼痛，并进一步发展为背部和右肩的疼痛。在上腹部可能会出现肿胀或可触摸到的肿块，同时会出现黄疸和黑尿。当癌转移时，它一般指向肺或脑。HCC的诊断可以通过血液检测进行，特别是，例如检测肿瘤标记例如α-胎蛋白。大约50-70％的HCC患者表现出升高的α-胎蛋白水平。另外的检测方法包括非放射性成像(腹部的或胸部的X光片，血管造影，CT扫描和MRIs)，使用放射性材料的肝脏扫描和肝脏的活组织切片检查。由于疾病的发现通常都太晚了，所以HCC的治疗通常是不成功的，但是其方法包括外科手术切除癌，化学疗法或放射疗法，它们单独或组合使用。尽管HCC在美国不是非常普遍，但是它在亚洲和非洲的部分地区是非常普遍的，这主要是由于肝炎病毒感染的高发病率(http//cis.nci.nih.gov/；http//cancer.med.upenn.edu/disease/liver/intro_liver.html)。肝脏疾病中的分子变化与肝病的发展和进展相关的肝脏细胞中的分子变化知之甚少。因此，需要研究与肝病的发展和进展有关的基因表达水平的改变和鉴定新分子标记。此外，如果想要成功地进行干扰以中断或缓解肝病，就需要建立可以精确评价肝硬化或HCC的早期表现的方法。同样，为了防止或停止肝病的发展而采用的疗法的发展依赖于基因的鉴定，所述基因负责肝细胞的癌变和癌变肝细胞的生长或与肝硬化有关的组织损伤的诱导和瘢痕形成。
技术实现思路
本专利技术是基于新的基因家族的发现，其分别被命名为LBFL302和LBFL303，与肝硬化(LC)或慢性肝炎(CH)相比，它们在肝细胞癌(HCC)和其它的恶性肿瘤中差异性表达。本专利技术包括分离的核酸分子，其选自下列含有SEQ ID NO1，3，5或7的分离的核酸分子；编码SEQ IDNO6或8的分离的核酸分子；编码肝癌中所表达的蛋白并与SEQ IDNO5的整个连续序列表现出至少95％核苷酸序列同一性的分离的核酸分子；编码肝癌中所表达的蛋白并与SEQ ID NO7的整个连续序列表现出至少75％核苷酸序列同一性的分离的核酸分子；和包含上述任一核酸分子的互补链的分离的核酸分子。本专利技术进一步包括可操作地连接到一种或多种表达控制元件的核酸分子，包括包含所述分离的核酸分子的载体。本专利技术进一步包括经转化含有本专利技术核酸分子的宿主细胞，以及生产蛋白质的方法，所述方法包括步骤在可以表达所述蛋白质的条件下培养用本专利技术核酸分子转化的宿主细胞。本专利技术进一步提供选自下列的分离的多肽包含SEQ ID NO2，4，6或8的氨基酸序列的分离多肽；包含SEQ ID NO2或4中至少10个氨基酸的片段的分离多肽；包含SEQ ID NO2或4的保守氨基酸替代的分离多肽；和包含SEQ ID NO2或4的天然存在的突变氨基酸序列的分离多肽。本专利技术的多肽还包括这样的多肽，它们的氨基酸序列与SEQ ID NO2或4的序列具有至少大约50％，60％，70％或75％氨基酸序列同一性，优选至少大约80％，进一步优选至少大约90-95％，和最优选至少95-98％的序列同一性，本专利技术还包括与SEQ ID NO6或8具有至少大约95％氨基酸序列同一性的蛋白质。本专利技术进一步提供与本专利技术多肽特异性结合的分离的抗体或抗原结合型抗体片段，包括单克隆和多克隆抗体。本专利技术进一步提供了鉴定一种物质的方法，所述物质可以调控编码本专利技术蛋白的核酸的表达，该方法包括将表达该核酸分子的细胞暴露于所述物质；和确认所述物质是否调控所述核酸分子的表达，从而鉴定可以调控编码所述蛋白的核酸分子表达的物质。本专利技术进一步提供鉴定物质的方法，该物质可以调控本专利技术蛋白的水平或该蛋白的至少一种活性，该方法包括将表达该蛋白的细胞暴露于所述物质；和确认所述物质是否可以调控所述蛋白的水平或该蛋白的至少一种活性，从而鉴定可以调控所述蛋白的水平或该蛋白的至少一种活性的物质。本专利技术进一步提供鉴定本专利技术蛋白的结合配偶体(partner)的方法，包括步骤将所述蛋白暴露于潜在的结合配偶体；和确认所述潜在的结合配偶体是否结合到所述蛋白上，从而鉴定所述蛋白的结合配偶体。本专利技术进一步提供调控编码本专利技术蛋白的核酸分子表达的方法，包括步骤施用有效量的调控编码所述蛋白的核酸分子表达的物质。本专利技术还提供了调控本专利技术蛋白的至少一种活性的方法，包括步骤施用有效量的调控本专利技术蛋白的至少一种活性的物质。本专利技术进一步包括经修饰含有本专利技术核酸分子的非人类转基因动物，或者经修饰含有突变的核酸分子从而可以阻止所编码的本专利技术多肽的表达的非人类转基因动物。本专利技术还包括非人类转基因动物，这些动物中含有SEQ ID NO1，3，5，7或9的一部分或全长的基因的全部或一部分已经从所述动物的基因组中敲除或删除。本专利技术进一步提供肝癌和其它癌症的诊断方法，包括步骤从受试者中获得组织，血液，尿或其它样品，以及检测本专利技术多肽或核酸分子的表达水平。本专利技术进一步包括组合物，该组合物包含稀释剂和选自下列的蛋白或多肽含有SEQ ID NO2，4，6，8或10的氨基酸序列的分离多肽；含有SEQ ID NO2，4，6，8或10中至少10个氨基酸的片段的分离多肽；含有SEQ ID NO2或4的保守氨基酸替代的分离多肽；SEQID NO2或4的天然存在的氨基酸序列变体；分离的多肽，其氨基酸序列与SEQ ID NO2或4的氨基酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的核酸分子，其选自下列：（ａ）包含ＳＥＱＩＤＮＯ：１，３，５或７的分离的核酸分子，（ｂ）编码ＳＥＱＩＤＮＯ：６或８的分离的核酸分子，（ｃ）编码肝癌中表达的蛋白的分离的核酸分子，该核酸分子与ＳＥＱＩＤＮＯ：５的 全长连续序列表现出至少大约９５％的核苷酸序列同一性，（ｄ）编码肝癌中表达的蛋白的分离的核酸分子，该核酸分子与ＳＥＱＩＤＮＯ：７的全长连续序列表现出至少大约７５％的核苷酸序列同一性，和（ｅ）包含（ａ）、（ｂ）、（ｃ）或（ｄ）的核酸分子 的互补链的分离的核酸分子。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：高祥锡，Q刘，郑贤镐，W曾，李福万，宋始英，
申请(专利权)人：株式会社LG生命科学，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]