CAB分子制造技术

本发明专利技术涉及ＣＡＢ分子、针对ＣＥＡ的ＡＤＥＰＴ构建物，以及它们在诊断和治疗中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及CAB分子，针对CEA的ADEPT构建物，以及它们在诊断和治疗中的用途。
技术介绍
传统的治疗性分子在患者的身体各处自由地循环，直到它们被肝脏或者其它清除机制从循环中去除。这些非靶向的分子，在广泛的细胞和组织中，无差别地产生其药理作用。这可能对患者引起严重的副作用。当该分子是用来杀死癌细胞的高毒性的化学治疗剂时，这个问题尤其突出，此时治疗窗(therapeutic window)可能很小，治疗窗为有效剂量(efficacious dose)和有害剂量(injurious dose)或者甚至致死剂量之间的差值。因此，近些年来，研究者已经试图开发特异性地影响患者的细胞、组织或器官的特定子集的化合物。通过优先结合于待治疗组织呈现的特定靶分子，多数此类化合物靶向特定的组织。通过优先地影响靶细胞、组织或器官，有效剂量和有害剂量之间的差额可以被增加，这同样也增加了治疗方案成功的机会并减少了副作用的出现。利用优先结合的方法的一个形式是抗体导向酶-前体药物疗法(antibody-directed enzyme prodrug therapy，ADEPT)。参见例如，Xu等，2001，ClinCancer Res.73314-24.；Denny，2001，Eur J Med Chem.36577-95。在ADEPT中，将抗体或抗体片断(antibody fragment)与能够将前体药物转化成活性的细胞毒素剂(cytotoxic agent)的酶连接。对患者运用ADEPT偶联物(ADEPT conjugate)，偶联物集中到靶组织中。随后，前体药物被给与患者。所述前体药物在患者整个体内循环，但由于它处在它的非活性的形式下，该前体药物引起很小的副作用或不引起副作用。所述前体药物由局部化的ADEPT偶联物酶转化成它的活性药物形式。因为ADEPT偶联物被局限于靶组织，所述前体药物只有在靶组织的附近才能被活化。因此，遍布身体各处的活性药物浓度相对较低，但在靶组织的附近产生出浓度相对较高的活性药物，这允许药物在希望的部位发挥它的疗效，增大了毒素的治疗窗(therapeutic window)。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，“CEA”)由Gold和Freedman在J.Exp.Med.，121，439-462，(1965)中首先描述。多数结肠直肠癌和许多其它肿瘤表达CEA。CEA在肿瘤组织中高表达，在正常的器官中，特别是消化道中则以较低浓度被发现。专利技术简述本专利技术涉及CAB分子，针对CEA的ADEPT构建物，以及它们在诊断和治疗中的用途。本专利技术的第一个方面涉及包括修饰的氨基酸序列的CAB分子。在一个实施方案中，CAB分子具有SEQ ID NO1中提出的未修饰序列。在一个实施方案中，CAB分子具有从SEQ ID NO1中提出的氨基酸序列修饰得到的氨基酸序列，并且修饰发生在至少一个从下列位置中选出的位置100，102，104，105，107，163，165，166，184和226，其中位置编号根据附图说明图1所示的SEQ ID NO1。在优选的实施方案中，CAB分子包括发生在100位、184位和226位的修饰。在优选的实施方案中，CAB分子包括发生在100位、102位、104位、105位、107位、163位、165位、166位、184位和226位的修饰。在优选的实施方案中，CAB分子包括发生在100位、102位、104位、105位、107位、163位、165位、166位和226位的修饰。在优选的实施方案中，修饰选自下列中的至少一个T100L、T102L、P104A、Y105I、F107N、S163A、S165Y、Y166A、S184D和S226D，其中位置的编号是根据图1所示的SEQ ID NO1。在优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.6分子，所述CAB1.6分子具有如下的修饰T100L、S184D和S226D。在优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.7分子，所述CAB1.7分子具有如下的修饰T100L、T102L、P104A、Y105I、F107N、S163A、S165Y、Y166A、S184D和S226D。在优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.13分子，所述CAB1.13分子具有如下的修饰T100L、T102L、P104A、Y105I、F107N、S163A、S165Y、Y166A和S226D。在优选的实施方案中，CAB分子包括如图25说明的CAB 1.2(SEQ ID NO1)、CAB1.6(SEQ ID NO5)、CAB1.7(SEQ ID NO6)或CAB1.13的scFV部分。在优选的实施方案中，CAB分子进一步包括β-内酰胺酶分子。在优选的实施方案中，CAB分子具有未修饰的氨基酸序列，或者具有从在SEQ ID NO2中所说明的氨基酸修饰得到的氨基酸序列，并且修饰是在至少一个从下列位置中选出的位置上3，13，16，37，100，102，104，105，107，146，163，165，166，181，184，226，265和568，其中位置编号根据图2所示的SEQ ID NO2。在优选的实施方案中，修饰发生在3位、13位、16位、37位、100位、146位、181位、184位和226位。在优选的实施方案中，修饰发生在3位、13位、16位、37位、100位、102位、104位、105位、107位、146位、163位、165位、166位、181位、184位和226位。在优选的实施方式中，修饰发生在265位和568位。在优选的实施方式中，修饰发生在3位、13位、16位、37位、100位、102位、104位、105位、107位、146位、163位、165位、166位、181位、184位、226位、265位和568位。在优选的实施方式中，修饰发生在3位、13位、16位、37位、100位、102位、104位、105位、107位、146位、163位、165位、166位、181位、226位、265位和568位。在优选的实施方案中，CAB分子具有这样的修饰，即所述修饰包含至少一个从下面选出的修饰K3Q、R13K、T16G、L37V、T100L、T102L、P104A、Y105I、F107N、M146V、S163A、S165Y、Y166A、W181V、S184D、S226D、K265A和S568A，其中位置编号根据如图2所示的SEQ ID NO2。在一优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.2i分子，所述CAB1.2i分子包含如下的修饰K265A和S568A。在一优选的实施方案中，CAB分子包含CAB1.6分子，所述CAB1.6分子包含如下的修饰K3Q、R13K、T16G、L37V、T100L、M146V、W181V、S184D和S226D。在一优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.6i分子，所述CAB1.6i分子包含如下的修饰K3Q、R13K、T16G、L37V、T100L、M146V、W181V、S184D、S226D、K265A和S568A。在一优选的实施方案中，CAB分子包括CAB1.7分子，所述CAB1.7分子包含如下的修饰K3Q、R13K、T16G、L3本文档来自技高网...

【技术保护点】
ＣＡＢ分子，其包括氨基酸序列，该氨基酸序列具有ＳＥＱＩＤＮＯ：１中说明的序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JA福克斯，FA哈丁，V舍伦贝格尔，
申请(专利权)人：金克克国际有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]