葫芦茶素的制备方法技术

本发明专利技术提供一种葫芦茶素的制备方法，该方法是先以浓度为４０～８０％的丙酮－水溶液提取粉碎后的葫芦茶原料，提取溶剂用量按照料液比（ｇ∶ｍｌ）＝１∶６～１０，提取温度３０～８０℃，提取时间１．５～９ｈ；提取液浓缩干燥后所得浸膏用水溶解、过滤，滤液经Ｄ↓［１０１］大孔树脂吸附后，用去离子水洗脱至流出液无色，然后用１０～３０％的乙醇水溶液，以１～２ＢＶ／ｈ的流速洗脱６～８个柱体积，搜集醇溶液部分洗脱液，浓缩干燥得葫芦茶素产品。本发明专利技术所述制备方法稳定性好，操作简便易行，成本低，丙酮、乙醇可回收，大孔树脂可再生，均可反复利用，适于规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然植物葫芦茶中活性成分的提取制备方法，尤其涉及多酚类 物质的制备。
技术介绍
葫芦茶素系自葫芦茶全草和根中提取富集得到的多酚类成分。葫卢茶rac/e/ ag〃h《w^n^ (9/^s/n'为豆科葫戸茶属植物。该属约有6种，分布于亚洲热带地区，太平洋群岛和澳大利亚。我国有2种，即葫卢茶和蔓茎葫卢茶7: /wew6^一e/r應(2X7.」ef i/wawg。分布于广西、广东、云南、海南、福建、 江西、贵州、四川、湖南、台湾等地。收载为药的仅葫芦茶，药用部位是全草 (称葫芦茶)和根(称葫芦茶根)，亦为傣药和瓦药所载。葫芦茶味苦涩，凉。具有清热、利湿、消滞、杀虫之功能。用于治疗感 冒、咽痛、肺病咳血、肠炎、痢疾、黄疸、风湿性关节痛、钩虫病、妊娠呕吐、 小儿疳积、疮疖。葫芦茶根性平，味微苦辛。具有清热解毒、利湿止咳之功 能。用于治疗风热咳嗽，肺痈，黄疸，痈肿，瘰痨，骨痨。葫芦茶虽然药用历史悠久，但国内外研究却甚少。直到20世纪末，国内才 陆续见到报道，但多集中于对软体动物、畜牧驱虫等农牧业方面，药用价值研 究甚少。文献记载葫芦茶叶中含鞣质7.1 8.6%，特别它抗软体动物和驱虫作用引起 我们很大的兴趣。因为葫芦茶虽然研究很少，但植物多酚的研究却很多，从制 革、食品、日用化工到医药，应用领域非常广泛。多酚在药学上的研究正在成 为当前天然产物研究的热点之一。多酚的抑菌、抗病毒、抗诱变、抗癌、抗心 脑血管疾病、保肝益肾、抗衰老等疗效引人注目。所以从天然资源中寻找新的 多酚资源仍是倍受瞩目的事情。为了进一步开发利用这一富含多酚的植物资源， 有必要对葫芦茶和根中以葫芦茶素为主的多酚的提取、富集、纯化工艺进行了 深入地研究。天然植物中多酚类物质的提取纯化工艺的现有技术中，水、醇-水、丙酮-水提取、明胶沉淀法，色谱分离分析方法已经有较多应用，但针对葫芦茶这种 植物中以葫芦茶素为代表的多酚类物质的提取纯化工艺还没有相关报道。本发 明即旨在完成详尽的葫芦茶植物多酚类物质提取纯化方案。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备高纯度葫芦茶素的完整技术方案。本专利技术所述的是先以浓度为40 80%的丙酮-水溶液提 取粉碎后的葫芦茶原料，提取溶剂用量按照料液比(g:ml) =1:6 10，提取温 度30 8(TC，提取时间1.5 9h;提取液浓縮干燥后所得浸膏用水溶解、过滤， 滤液经Dnn大孔树脂吸附后，用去离子水洗脱至流出液无色，然后用10 30%的 乙醇水溶液，以l 2BV/h的流速洗脱6 8个柱体积，搜集醇溶液部分洗脱液， 浓縮干燥得葫芦茶素产品其中所述的提取溶剂优选50 70%的丙酮-水溶液，料液比(g:ml)优选l:8 10，提取温度优选30 5(TC，提取时间优选4.5 7.5h。其中所述的大孔树脂纯化步骤中，洗脱用乙醇水溶液浓度优选30% 。 所述的乙醇水溶液洗脱流速优选2 BV/h，洗脱液用量优选6个柱体积。 具体来说，本专利技术所述的包括如下步骤① 以浓度为50 70%的丙酮-水溶液提取粉碎后的葫芦茶原料，料液比 (g:ml) 1:8 10，提取温度30 50。C,提取时间4.5 7.5 h;② 提取液浓縮干燥，将所得浸膏用水溶解、过滤；③ 滤液经Dun大孔树脂吸附，然后用去离子水洗脱至流出液无色；④ 用30%的乙醇水溶液，以l 2BV/h的流速洗脱6个柱体积，搜集洗脱液， 浓縮干燥得葫芦茶素产品。上述具体的操作步骤中，优选的参数组合构成本专利技术最优选的方案，如下① 以浓度为60%的丙酮-水溶液提取粉碎后的葫卢茶原料，料液比(g:ml) 为1:8，提取温度3(TC，提取时间6h;② 提取液浓縮干燥，将所得浸膏用水溶解、过滤；③ 滤液经Dicn大孔树脂吸附，然后用去离子水洗脱至流出液无色；④ 用30%的乙醇水溶液，以l 2BV/h的流速洗脱6个柱体积，搜集洗脱液， 浓縮干燥得葫芦茶素产品。作为整合的生产方案中的一部分，树脂的[Hj收再利用也非常重要，本专利技术中对使用后的树脂的回收方法是釆用用95。/。的乙醇浸泡24h后，用乙醇和去离子水反复清洗。本专利技术所述制备方法稳定性好，操作简便易行，成本低，丙酮、乙醇可回 收，大孔树脂可再生，均可反复利用，适于规模化生产。附图说明本专利技术附图l幅，即实施例的流程图。具体实施方式下面以具体实施例的方式对本专利技术作进一步的说明。如无特殊说明，下述 实施例中对多酚类化合物的测量方法均以没食子酸为标准品(中国药品生物制品检定所，批号120563-200412，纯度99.1%)，采用比色法(Unico7200可见分 光光度计，尤尼柯上海仪器有限公司)测定。本专利技术所述的纯度是将原料葫卢茶干燥粉碎后放入容 器，按照设定的溶剂、料液比(g:ml)、提取温度、时间浸提，提取过程可以搅 拌；分离提取液并回收溶剂，产物冷冻干燥得粗制葫芦茶素。将葫芦茶提取液 经Dnn大孔吸附树脂吸附后，以去离子水洗脱至流出液无色，并以设定的洗脱液、 洗脱物料比条件进行洗脱，采集洗脱液回收溶剂并低温冷冻真空干燥，得浅黄 棕色颗粒状葫芦茶素。以下具体实施例对提取及树脂纯化步骤进行分别的详细描述。 一、葫芦茶素提取工艺实施例按照上述具体操作步骤，在设定条件下提取葫芦茶素，提取溶剂为不同浓 度的丙酮一水溶液，收率按照下式计算收率二 (葫芦茶素质量/原料质量)X100%具体条件设定及提取结果见表l:表 1<table>table see original document page 6</column></row><table>实施例21本实施例是考察提取工艺的正交实验，提取工艺步骤同前述实施例1 20， 根据前述实施例1 20的结果，对4个因素分别选择适宜的3个水平，采用b (34) 正交实验安排表考察最佳工艺条件。正交实验因素水平安排见表2，实验结果分 别见表3:_表 2<table>table see original document page 7</column></row><table>综合分析以上结果，各因素的影响主次为A〉B〉OD，即提取温度>浓度>时 间>体积。因此最佳工艺组合A1B1C1D2， g卩8倍量50。/。丙酮水30。C提取6h，葫戸 茶素收率约6%，适合葫芦茶素的提取。二、 D皿大孔树脂纯化葫芦茶素的工艺条件及参数考察实施例本部分实施例均包括对D^大孔树脂的使用前预处理及回收后处理步骤，预 处理的方法是取一定量的D肌大孔树脂，95%乙醇浸泡24小时，将其装入预先 清洗的树脂柱内，先以95%乙醇洗至流出液加3倍水不变浑浊无白色混浊现象，然后改用蒸馏水冲洗至无醇味，即可使用。使用后回收处理的方法是5%的乙 醇浸泡24h后，用乙醇和去离子水反复清洗。为了优化树脂的使用，本实施例首先对树脂性能参数进行了考察，包括1、 静态吸附容量的确定在250ml的锥形瓶中加入5g (干重1.479g)预处 理后的Dnn大孔吸附树脂以及100ml样品溶液(浓度为9.73 mg/ml)。室温振荡， 每隔一段时间取l ml测定溶液中残余的多酚含量，绘制单位吸附量与时间关系曲 线。并根据下式计算物料平衡吸附本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葫芦茶素的制备方法，其特征在于该方法是先以浓度为４０～８０％的丙酮－水溶液提取粉碎后的葫芦茶原料，提取溶剂用量按照料液比（ｇ∶ｍｌ）＝１∶６～１０，提取温度３０～８０℃，提取时间１．５～９ｈ；提取液浓缩干燥后所得浸膏用水溶解、过滤，滤液经Ｄ↓［１０１］大孔树脂吸附后，用去离子水洗脱至流出液无色，然后用１０～３０％的乙醇水溶液，以１～２ＢＶ／ｈ的流速洗脱６～８个柱体积，搜集醇溶液部分洗脱液，浓缩干燥得葫芦茶素产品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王永奇，史丽颖，唐玲，冯宝民，
申请(专利权)人：大连大学，
类型：发明
国别省市：91[中国|大连]