一种杀菌剂吡唑醚菌酯的降解菌株及其生产的菌剂和应用制造技术

本发明专利技术公开了一株可降解吡唑醚菌酯的菌株Burkholderiaanthina BA01及其生产的菌剂和应用。所述菌株Burkholderiaanthina BA01已于2016年11月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2016687。该菌株在短时间内可有效降解吡唑醚菌酯，生物降解效果显著，可用于修复吡唑醚菌酯污染的水体、土壤等自然环境，直接施用可使水体和土壤中吡唑醚菌酯残留量降低80%以上，解决了农业生产中吡唑醚菌酯农药残留超标问题及环境污染问题，生产出无毒无公害的绿色农产品，具有非常重要的理论和应用价值。

Degradation Strain of bactericidal agent pyrazole ether ester and its production and Application

The invention discloses a biodegradable pyraclostrobin BA01 strain Burkholderiaanthina and its production and application agent. The strain Burkholderiaanthina BA01 was in November 28, 2016 preserved in Chinese type culture collection, the preservation number is CCTCC NO:M 2016687. The strain in a short period of time can be effectively degraded pyraclostrobin, biodegradation effect, can be used to repair the pyraclostrobin contaminated water, soil and other natural environment, can be applied directly in water and soil of pyraclostrobin residues decreased more than 80%, to solve the problem of environmental pollution and exceed the standard agricultural production of pyraclostrobin pesticide residues, produce green non-toxic pollution-free agricultural products, has a very important theoretical and practical value.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于污染物微生物降解
更具体地，涉及一种吡唑醚菌酯降解菌株及其生产的菌剂和应用，用于修复吡唑醚菌酯残留污染的水体、土壤等自然环境，保护生态环境和人类健康。
技术介绍
化学农药的专利技术和使用为人类的生存和发展做出了巨大的贡献，特别是在保护农业生产、保障我国乃至世界粮食安全发挥了至关重要的作用，成为解决人类粮食问题不可或缺的重要条件之一。但是，化学农药的使用也是一把双刃剑。由于我国农田复种指数高、化学农药超剂量和超范围使用，且由于施药技术落后，农药利用率仅20%左右，约80%的化学农药进入土壤和水体中，导致生态环境和农产品中农药残留污染严重，已严重危害人类健康和生态环境安全，影响我国农产品的出口创汇。近年来，随着人们生活水平的提高和环境保护意识的增强，全社会对农药残留带来的直接危害和潜在影响亦愈来愈关注，人们迫切需要无农药残留污染的绿色食品和清洁环境。根据我国目前的农业生产形式和人口状况来看，农药在农业生产过程中也必不可少。因此，寻求高效、安全、经济的农药残留污染治理新技术，解决病虫害防治用药与农药残留的矛盾，具有深远意义。吡唑醚菌酯，是一种常用的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂，近年来已被广泛用于防治作物病害，是市场上的主要杀菌剂品种。随着吡唑醚菌酯使用的日益广泛和使用时间的延长，有关该农药的残留问题及其危害日益严重。研究表明，吡唑醚菌酯对非靶标生物的危害性日益凸显。该杀菌剂具有环境激素效应，长期接触或摄入将导致慢性疾病，对人类、鸟类和其他哺乳动物具有慢性毒性。因此，消除环境和农产品中吡唑醚菌酯的残留污染已成为科研工作者亟待解决的具有重大经济和社会意义的科研命题。微生物降解是一种生物修复技术，因其操作简便、经济实用、环境友好等优点，已成为处理各类环境污染物的有效措施，是农药残留污染治理的新途径、新手段，与传统的物理化学方法相比具有高效、经济、安全等优点，拥有广阔的应用前景。目前许多发达国家和大公司企业都投入巨资以从事农药残留高效降解菌的研究和开发，如美国BCI公司、美国工程服务生物修复公司已经将降解菌剂产品规模化生产，国内的北京佳农新贸易发展有限公司已成功生产“比亚”降解酶制剂可用于去除有机磷类农药残留污染。国际上也已有利用生物修复技术成功治理石油污染的先例。近年来，研究利用生物修复技术治理农药残留污染已成为研究热点。但是，由于农药结构多样性，而微生物降解农药往往具有很强的针对性，导致现有降解菌资源库远不能满足化学农药残留污染生物修复的实际需求。特别是目前还没有专门针对吡唑醚菌酯的降解微生物及其相关降解制剂产品。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服上述现有技术的缺陷和不足，提供一种能够降解杀菌剂吡唑醚菌酯的微生物菌株及其生产的菌剂。应用时，将该菌株制备成液体制剂，生产成本低，使用方便。使用本菌剂可在短时间内使水体和土壤中吡唑醚菌的残留量降低80%以上，解决了农业生产中吡唑醚菌酯农药残留超标问题及环境污染问题，生产出无毒无公害的绿色农产品。本专利技术的目的是提供一株可降解吡唑醚菌酯的菌株BurkholderiaanthinaBA01。本专利技术另一目的是提供由所述菌株BurkholderiaanthinaBA01制备的降解菌剂。本专利技术的另一目的是提供所述菌株BurkholderiaanthinaBA01及其降解菌剂在降解吡唑醚菌酯、修复吡唑醚菌酯污染的水体、土壤等自然环境方面的应用。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：一株可降解吡唑醚菌酯的菌株BurkholderiaanthinaBA01，该菌株于2016年11月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2016687；保藏地址：中国武汉，武汉大学。本专利技术从采集自新加坡污水处理池中的活性污泥中筛选分离获得所述菌株BurkholderiaanthinaBA01，经形态学特征、生理生化特性、16SrRNA系统发育分析鉴定为Burkholderiaanthina。该菌株在LB固体平板中生长较快，富有运动性。菌落在LB固体平板中呈现淡黄色，菌落光滑、边缘不整齐、表面湿润半透明。主要生物学特性为：该菌株属于革兰氏阴性菌，好氧，菌体为棒状。另外，所述菌株BurkholderiaanthinaBA01具有显著的降解杀菌剂吡唑醚菌酯的能力，因此，该菌株在降解吡唑醚菌酯方面的应用，以及在制备吡唑醚菌酯降解菌剂方面的应用，均应在本专利技术的保护范围之内。一种包含有上述菌株BurkholderiaanthinaBA01和/或其发酵液的吡唑醚菌酯农药残留降解菌剂，也在本专利技术的保护范围之内。优选地，所述吡唑醚菌酯农药残留降解菌剂的制备方法如下：S1.将菌株BA01于种子培养基中培养，获得菌种；S2.将上述菌种按体积比5～10%的接种量接种入含有种子培养基的种子罐，培养至对数生长期，获得种子液；S3.将获得的种子液按照体积比5～10%的接种量接种入含有发酵培养基的生产发酵罐发酵培养，出罐形成液体剂型。其中，优选地，在种子罐和生产发酵罐的培养过程中通入无菌空气，无菌空气的通气量为0.6～1.0m3/min，搅拌速度为180～250r/min，培养温度30℃，全流程培养时间为48～96h，发酵结束后菌体数量≥1.0×109CFU/mL，发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型。优选地，所述种子培养基和发酵培养基的配方均为：酵母膏0.4～0.6%，蛋白胨0.8～1.2%，NaCl0.8～1.2%，pH值为7.2～7.5更优选地，所述种子培养基和发酵培养基的配方均为：酵母膏0.5%，蛋白胨1%，NaCl1%，pH值为7.2～7.5。更具体地，作为一种优选的可实施方案，所述吡唑醚菌酯农药残留降解菌剂的制备方法如下：（1）将降解菌株BA01的试管种接种于含LB培养基的摇瓶中，30℃恒温振荡至对数期，准备接种种子罐，种子罐中装有种子培养基，装液量为70%；投料完成后在1.1Kg/cm3的压力下、121℃条件下高压湿热灭菌，冷却至30℃后，将上述培养好的摇瓶菌种按10%的接种量接种于装液量为70%的种子罐，无菌空气的通气量为0.6～1.0m3/min，搅拌速度为180～250r/min，培养至对数生长期备用；（2）将到达对数期的种子液按照10%的接种量投入装有发酵培养基的生产发酵罐（装液量为70%）发酵培养；投料后的生产罐，在1.1Kg/cm3的压力下、121℃条件下高压湿热灭菌，冷却至30℃后，通无菌空气，通气量为0.6～1.0m3/min，搅拌速度为180～250r/min，培养温度控制为30℃，整个工艺培养流程时间为48～96h，发酵结束后菌体数量≥1.0×109CFU/mL，发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体菌剂；其中，LB培养基、种子培养基和发酵培养基的配方均为：酵母膏0.4～0.6%，蛋白胨0.8～1.2%，NaCl0.8～1.2%，pH值为7.2～7.5更优选地，所述LB培养基、种子培养基和发酵培养基的配方均为：酵母膏0.5%，蛋白胨1%，NaCl1%，pH值为7.2～7.5。另外，上述降解菌剂在降解吡唑醚菌酯方面的应用，以及在修复吡唑醚菌酯污染的自然环境方面的应用，也在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株可降解吡唑醚菌酯的菌株Burkholderiaanthina BA01，其特征在于，该菌株于2016年11月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2016687。

【技术特征摘要】
1.一株可降解吡唑醚菌酯的菌株BurkholderiaanthinaBA01，其特征在于，该菌株于2016年11月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2016687。2.权利要求1所述菌株BurkholderiaanthinaBA01在降解吡唑醚菌酯方面的应用。3.权利要求1所述菌株BurkholderiaanthinaBA01在制备吡唑醚菌酯降解菌剂方面的应用。4.一种吡唑醚菌酯农药残留降解菌剂，其特征在于，包含有权利要求1所述菌株BurkholderiaanthinaBA01和/或其发酵液。5.根据权利要求4所述的吡唑醚菌酯农药残留降解菌剂，其特征在于，由如下方法制备得到：S1.将菌株BA01于种子培养基中培养，获得菌种；S2.将上述菌种按体积比5～10%的接种量接种入含有种子培养基的种子罐，培养至对数生长期，获得种子液；S3.将获得的种子液...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈少华，冯彦媚，杨晶晶，占卉，腾诗雨，刘可欣，张欣倩，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：广东;44