The invention discloses a method for identifying the resistance of tomato leaf spot disease by using detached leaves, which comprises the steps of the cultivation of the bacterial leaf spot, the collection of the bacteria liquid, the treatment and the inoculation of the detached tomato leaves and the like. The present invention is mainly used to culture the gray leaf spot pathogen, and to isolate the pathogen through the leaves in vitro, and to identify the resistance of different tomato materials to the pathogen. The method can be used to identify the disease resistance of a material in a room, and has the advantages of simple operation, good controllability and high efficiency. This method can be used to identify the resistance of different varieties of tomato to gray leaf spot.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及番茄灰叶斑病,更具体地说是一种利用灰叶斑病菌接种到番茄离体叶片上的抗性评价方法。
技术介绍
番茄灰叶斑病在全世界范围内均有发生,灰叶斑病只为害叶片,在适宜条件下,传播很快,从发病到全株叶片感染只需2-3天,大量的落叶严重降低番茄产量和品质。近年来,番茄灰叶斑病等病害在番茄生产中产生的危害越来越严重,且随着近年来气候的异常变化和复种指数的提高,病害兼发的频率越来越高,市场对品种多抗性的要求越来越迫切。所以亟需加强包括灰叶斑病等多种病害抗病种质资源的创新研究。植物病害鉴定方法包括田间成株鉴定、室内苗期鉴定、离体鉴定及分子鉴定等。自然发病条件下的田间鉴定是鉴定抗病性的最基本方法。它能对育种材料或品种的抗性进行最全面、严格的鉴定。它的优点是能较全面准确地反应被鉴定材料的抗病性,操作方便。缺点是占用较多的土地,费用较高,而且没有均匀的发病条件就难以对植物品种资源的抗病性做出可靠的鉴定。温室或田间接种鉴定这种方法是将病原菌孢子或病毒直接接种到温室或田间植株的叶片、果实或根上,它适合对所有植物进行抗病性鉴定。接种的方法有点滴法、喷雾法、浸根法、摩擦法及注射法等。与田间鉴定方法相比,室内离体鉴定较少受外界环境因素影响、占用空间小、无需独立病圃、可便捷地同时鉴定多种病害,并有利于珍稀基因资源的保存。而与分子标记检测方法相比,室内离体鉴定不需要大量昂贵设备投入、操作简便、经济、快速、高效、准确实用。因此建立一套番茄离体抗性鉴定方法可以降低育种成本、提高抗病性筛选效率、加速番茄育种进程。
技术实现思路
本专利技术解决上述技术上检测周期长,成本高,受环境影响的缺点,利 ...
【技术保护点】
一种利用离体叶片鉴定番茄灰叶斑病抗性的鉴定方法,其特征在于按如下的步骤进行:1)番茄种植:种植不同品种番茄,待生长至6叶期,剪取生理状态一致的叶片,进行灰叶斑病接种;2)灰叶斑病菌培养:在本地番茄田间典型发病植株采集灰叶斑病叶经分离纯化后得到灰叶斑菌,放在冰箱内保存,在接种前1周将该菌株接种在PDA培养基上,置于25℃恒温下培养箱中培养,待菌落长满培养皿时用直径为5mm的打孔器,将病原菌打成大小一致的菌饼待用;3)离体番茄叶片菌饼接种法:切取带有4‑5片羽叶的番茄叶,将切口处用灭菌的脱脂棉包裹,放置在铺有滤纸的搪瓷盘内,然后用无菌水浇灌滤纸和脱脂棉使其吸满水,以保证番茄离体叶片的鲜活,将准备好的菌饼用灭菌的牙签挑出放置在番茄叶面上,每个叶片放上菌片,进行培养,接种后观察病斑。
【技术特征摘要】
1.一种利用离体叶片鉴定番茄灰叶斑病抗性的鉴定方法,其特征在于按如下的步骤进行:1)番茄种植:种植不同品种番茄,待生长至6叶期,剪取生理状态一致的叶片,进行灰叶斑病接种;2)灰叶斑病菌培养:在本地番茄田间典型发病植株采集灰叶斑病叶经分离纯化后得到灰叶斑菌,放在冰箱内保存,在接种前1周将该菌株接种在PDA培养基上,置于25℃恒温下培养箱中培养,待菌落长满培养皿时用直径为5mm的打孔器,将病原菌打成大小一致的菌饼待用;3)离体番茄叶片菌饼接种法:切取带有4-5片羽叶的番茄叶,将切口处用灭菌的脱脂棉包裹,放置在铺有滤纸的搪...
【专利技术属性】
技术研发人员:吉立柱,郏艳红,其他发明人请求不公开姓名,
申请(专利权)人:天津市农业生物技术研究中心,
类型:发明
国别省市:天津;12
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