中药蛇床子有效成分欧前胡素和蛇床子素的提取方法技术

本发明专利技术涉及中药蛇床子有效成分的提取方法，取蛇床子果实粉末，粉碎，过２０目筛，置于超临界萃取仪中，进行提取，得蛇床子提取物。取蛇床子提取物，用提取物等量的乙醚超声使之溶解，过滤，滤液中慢慢加入等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶物和滤液（滤液待用），乙醇重结晶，得欧前胡素；将滤液挥去乙醚，放置低温处，过滤，得结晶，乙醇重结晶，得蛇床子素。可以用薄层色谱法，高效液相色谱法及熔点法测定所得化合物的纯度。本法提取的蛇床子和欧前胡素纯度高，收率高，重复性好，可作为制药生产的对照品或原料也可以用其单成分制药。此法简单易行，毒性小，成本低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然植物药用成分的分离，涉及一种中药的提取方法，特别是一种，该方法分离得到的欧前胡素和蛇床子素可作为制药生产的对照品或原料，也可以用其单成分制药。
技术介绍
蛇床子为伞形科植物蛇床子(Cnidium monnieri(L.)Cuss)的干燥成熟果实。性辛苦温，味苦。《中国药典》2005年版一部记载具有温肾壮阳、燥湿，祛风，杀虫之功效。中医主要用来治疗外阴湿疹、阴痒、滴虫性阴道炎。蛇床子主含挥发油和香豆素类成分，果实中含挥发油1.3％，主要成分为蒎烯、茨烯、异戊酸龙脑醋、异龙脑、蛇床子素(Osthole)、蛇床明素、异虎耳草素、佛手柑内酯、二氢山芹醇及其当归酸酯、乙酸酯和异戊酸酯、蛇床定、异丁酞氧基二氢山芹醇乙酸酯。有人将蛇床子挥发油成分分析得到27个成分α-蒎烯、茨烯、柠檬烯、乙酸龙脑醋、β-蒎烯等。醇提物中主要为香豆素类成分及其它成分蛇床子素(Osthol)、欧前胡素(Imperatorin)、佛手柑内酯、异虎耳草素、花椒毒酚、花椒毒素、棕搁酸等，其中蛇床子素、前胡素为香豆素中的主要成分。传统上中药有效成分的提取多采用水提、醇沉、石油醚提取等方法，而传统的分离方法又多采用层析、用不同比例的有机溶剂洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，检测等步骤。但这些方法存在提取率低、药用有效成分含量低、存在有机残留等缺点。而目前的超临界萃取技术是一项集提取、分离、浓缩与一体的新技术，应用于中草药的提取具有许多优越性。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种，该方法采用超临界萃取装置，利用蛇床子中欧前胡素和蛇床子素在不同溶剂中溶解度的不同进行分离，大大节约时间和能源。而且提取的欧前胡素和蛇床子素可作为制药生产的对照品或原料也可以用其单成分制药。为了实现上述任务，本专利技术采取如下的技术解决方案一种，该方法采用超临界萃取装置对中药蛇床子进行萃取，装置包括CO2贮气罐、净化器、制冷装置、压缩泵、萃取釜、分离釜和加温装置构成的循环系统，具体包括下列步骤第一步取蛇床子果实，粉碎，过20目筛得到蛇床子果实粉；第二步称取蛇床子果实粉，置于萃取釜中，待制冷装置、萃取釜、分离釜和加温装置正常工作后，打开压缩泵使得超临界萃取装置加压到20.0MP，温度为40℃，调整CO2流速至40kg/h进行循环萃取，萃取过程中分离釜的解析压力保持6MP，解析温度为50℃，萃取4h后，得蛇床子提取物；第三步取蛇床子提取物，用乙醚超声使之溶解(提取物与乙醚的配比1∶1)，过滤，滤液中慢慢加入与乙醚等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶和滤液，其中滤液待用；第四步用无水乙醇对第三步得到的结晶物再重结晶，得到纯度98％以上欧前胡素；第五步在40℃水浴，回收第三步得到的滤液中的乙醚，回收至无乙醚味，剩余溶液置4℃-10℃处，过滤，得结晶，乙醇重结晶，得纯度98％以上的蛇床子素。可以用薄层色谱法，高效液相色谱法及熔点法检测所得化合物的纯度。超临界萃取法在乙醇重结晶工序中，按如下熔点取出各组份 本专利技术采用超临界提取得到的蛇床子提取物有效成分含量高，杂质少，为后续的分离纯化创造了良好的条件。提取的蛇床子素和欧前胡素可作为制药生产的对照品或原料也可以用其单成分制药。该方法简单易行，重复性好、收率高、成本低。具体实施例方式以下是专利技术人给出的关于本专利技术的具体实施，并结合优选实施例进行的进一步详细阐述。1.蛇床子药材超临界萃取取蛇床子果实粉末1000g，粉碎，过20目筛，称取药粉，置于萃取釜中。待制冷装置与萃取釜和分离釜加温装置正常工作后，打开压缩泵加压到20.0MP，温度为40℃，调整二氧化碳(CO2)流速至40kg/h循环萃取，分离釜的解析压力和解析温度分别为6MP和50℃，萃取4h后，分取提取物，得蛇床子提取物。2.蛇床子提取物中有效成分的分离纯化取蛇床子提取物，用乙醚超声使之溶解(提取物与乙醚的配比1∶1)，过滤，滤液中慢慢加入与乙醚等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶物和滤液(滤液待用)，乙醇重结晶，得到纯度98％以上欧前胡素。将滤液在40℃挥去乙醚，溶液置4℃-10℃处，放置12小时，过滤，得结晶得结晶物，再用乙醇重结晶，得纯度98％以上的蛇床子素。超临界萃取法在乙醇重结晶工序中，按如下熔点取出各组份蛇床子素，83℃～84℃，欧前胡素，101℃～102℃。蛇床子素和欧前胡素的主要理化常数为 用本专利技术方法提取的蛇床子素和欧前胡素纯度高，可作为制药生产的对照品或原料也可以用其单成分制药。该方法简单易行，重复性好、收率高、成本低。3.蛇床子中主要香豆素有效成分的性质用上述方法得到的蛇床子素，即甲氧基欧芹素(osthol)为白色针状结晶，mp 83-84℃，紫外光下呈淡蓝色。此结晶溶于氯仿、醋酸乙酯、丙酮、乙醇、沸石油醚及甲醇等溶剂，不溶于水和石油醚。用上述方法得到的欧前胡素(imperatorin)，为柱状结晶，mp 101℃-102℃。紫外光下呈淡黄色。不溶于水，微溶于沸水，易溶于氯仿，溶于苯、石油醚、乙醚、乙醇和碱性氢氧化物。4.蛇床子中有效成分的检测方法检测方法采用高效液相色谱法色谱条件与系统适应性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为甲醇-水(65∶35，v/v)；检测波长为302nm。理论板数按欧前胡素峰计算应不低于2500。或薄层色谱法薄层板为硅胶G，展开剂为石油醚-乙醚(3∶2)，置紫外光灯(365nm)下检视。上述检测方法适用于蛇床子生药及有效成分的纯度检查和含量测定。采用超临界提取得到的蛇床子提取物有效成分含量高，杂质少，为后续的分离纯化创造了良好的条件。权利要求1.一种，该方法采用超临界萃取装置对中药蛇床子进行萃取，装置包括CO2贮气罐、净化器、制冷装置、压缩泵、萃取釜、分离釜和加温装置构成的循环系统，具体包括下列步骤第一步取蛇床子果实，粉碎，过20目筛得到蛇床子果实粉；第二步称取蛇床子果实粉，置于萃取釜中，待制冷装置、萃取釜、分离釜和加温装置正常工作后，打开压缩泵使得超临界萃取装置加压到20.0MP，温度为40℃，调整CO2流速至40kg/h进行循环萃取，萃取过程中分离釜的解析压力保持6MP，解析温度为50℃，萃取4h后，得蛇床子提取物；第三步取蛇床子提取物，用提取物等量的乙醚超声使之溶解，过滤，滤液中慢慢加入与乙醚等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶和滤液，其中滤液待用；第四步用无水乙醇对第三步得到的结晶物再重结晶，即可得到纯度98％以上的欧前胡素；第五步在40℃水浴，回收第三步得到的滤液中的乙醚，回收至无乙醚味，剩余溶液置4℃-10℃处，过滤，得结晶物，再用乙醇重结晶，得纯度98％以上的蛇床子素。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的在乙醇重结晶步骤中，按如下熔点取出各组份蛇床子素，83℃～84℃，欧前胡素，101℃～102℃。全文摘要本专利技术涉及中药蛇床子有效成分的提取方法，取蛇床子果实粉末，粉碎，过20目筛，置于超临界萃取仪中，进行提取，得蛇床子提取物。取蛇床子提取物，用提取物等量的乙醚超声使之溶解，过滤，滤液中慢慢加入等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶物和滤液(滤液待用)，乙醇重结晶，得欧前胡素；将滤液挥去乙醚，放置低温处，过滤，得结晶，乙醇重结晶，得蛇床子素。可以用薄层色谱法，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药蛇床子有效成分欧前胡素和蛇床子素的提取方法，该方法采用超临界萃取装置对中药蛇床子进行萃取，装置包括ＣＯ↓［２］贮气罐、净化器、制冷装置、压缩泵、萃取釜、分离釜和加温装置构成的循环系统，具体包括下列步骤：第一步：取蛇床子果实， 粉碎，过２０目筛得到蛇床子果实粉；第二步：称取蛇床子果实粉，置于萃取釜中，待制冷装置、萃取釜、分离釜和加温装置正常工作后，打开压缩泵使得超临界萃取装置加压到２０．０ＭＰ，温度为４０℃，调整ＣＯ↓［２］流速至４０ｋｇ／ｈ进行循环萃取， 萃取过程中分离釜的解析压力保持６ＭＰ，解析温度为５０℃，萃取４ｈ后，得蛇床子提取物；第三步：取蛇床子提取物，用提取物等量的乙醚超声使之溶解，过滤，滤液中慢慢加入与乙醚等量的石油醚，放置低温处，过滤，得结晶和滤液，其中滤液待用；　 　第四步：用无水乙醇对第三步得到的结晶物再重结晶，即可得到纯度９８％以上的欧前胡素；第五步：在４０℃水浴，回收第三步得到的滤液中的乙醚，回收至无乙醚味，剩余溶液置４℃－１０℃处，过滤，得结晶物，再用乙醇重结晶，得纯度９８％以上的蛇床 子素。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨广德，贺浪冲，张继业，张莉，张燕，曹永孝，边晓丽，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]