基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种基于牛血清白蛋白‑纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒。利用牛血清白蛋白‑纳米铂/铋与硫离子作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白‑纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺盐酸盐显色，从而表现出溶液颜色和紫外吸收光谱特征的变化。吸光度测定的线性范围为0.08~4 μmol/L，检测限为50 nmol/L。水样可通过简单的预处理后，采用该方法和试剂盒能很好地测定其中的硫离子含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及以牛血清白蛋白-纳米铂/铋为模拟过氧化物酶的硫离子快速含量测定方法及试剂盒，属于分析化学和纳米

技术介绍
随着工业科技的飞速发展，环境问题变得越发严重。硫化物是造纸、石化、皮革等行业常见的化工原料和化学污染物，对水生态系统和人类健康均产生危害。在酸性条件下，硫化物转变为硫化氢，可危害细胞色素、氧化酶，造成细胞组织缺氧，甚至危及生命。同时硫化氢还腐蚀金属设备和管道，并可被微生物氧化成硫酸，加剧腐蚀性。硫化物易溶于水，因此，硫化物还是水体污染的重要指标之一，水体又与人们的日常生活紧密相关，所以建立一种快速、简易、实用的方法对于水体中的硫离子进行检测非常必要。目前，硫化物的检测方法主要包括电化学、色谱等。然而，这些方法需要复杂的样品预处理过程，处理过程相对费时，费用相对较大。近年来基于铂纳米材料的生物传感器得到了广泛的关注，这些材料的模拟过氧化物酶催化活性高，催化效果好，抗干扰能力强，因此能够应用于各种生物检测领域，更重要的是这些材料大多可提供肉眼识别信号的比色法检测，具有简单，快速，适用于实时和现场检测等优点。本专利技术利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法及试剂盒检测试剂盒。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是利用牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性的变化，通过牛血清白蛋白-纳米铂/铋催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速、简便、灵敏的硫离子检测新方法。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5mL浓度为50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL浓度为16mmol/L氯铂酸溶液和0.5mL浓度为1.5mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80℃下反应2h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6mL浓度为23.8mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6mL浓度为0.5mmol/L的硝酸铋溶液和1.8mL浓度为10mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80℃下反应2.5h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性降低，催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色能力下降，催化反应产物在652nm处的吸光度减小。所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在0.4mL硫离子溶液中加入0.01mL浓度为4.76mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1mL浓度为2mol/L的过氧化氢，0.2mL浓度为16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39mL含有乙二胺四乙酸的浓度为100mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，所述缓冲溶液中乙二胺四乙酸的浓度为4mmol/L，混合后37℃温浴10分钟，测定652nm波长处的吸光度，随着硫离子浓度的增大，吸光度逐渐减小。所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是检测线性范围为0.08~4μmol/L，检测限为50nmol/L。本专利技术采用以下具体技术方案：（一）牛血清白蛋白-纳米铂/铋的制备：在5mL浓度为50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL浓度为16mmol/L氯铂酸溶液和0.5mL浓度为1.5mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80℃下反应2h。反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末。在0.6mL浓度为23.8mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6mL浓度为0.5mmol/L的硝酸铋溶液和1.8mL浓度为10mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80℃下反应2.5h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液。将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。制备过程中使用的所有玻璃器皿均经过王水浸泡，并用双蒸水彻底清洗，晾干。（二）硫离子的测定在0.4mL硫离子标准溶液中加入0.01mL技术方案（一）制备的浓度为4.76mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1mL浓度为2mol/L的过氧化氢，0.2mL浓度为16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39mL含有4mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温浴10分钟，测定652nm波长处的吸光度。本专利技术的另一个目的在于提供一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒。试剂盒中包括提供牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液（a液），过氧化氢溶液（b液），3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液（c液），硫化钠溶液（标准液）。为了实现上述检测方法的目的，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术所述的一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒，其特征是试剂盒中有牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液、过氧化氢溶液、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液和硫化钠溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液作为a液，过氧化氢溶液作为b液，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐溶液作为c液，硫化钠溶液作为标准液。上述a液中含有浓度为0.02mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液是用含有4mmol/L乙二胺四乙酸的浓度为100mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲液配制而成的；b液中含有浓度为2mol/L的过氧化氢水溶液；c液中含有浓度为16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐水溶液；标准液中含有浓度为0.8，1，3，5，10，20，40μmol/L的硫化钠溶液。...

【技术保护点】
一种基于牛血清白蛋白‑纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白‑纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢， 3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652 nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白‑纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5 mL 浓度为50 mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5 mL浓度为16 mmol/L氯铂酸溶液和0.5 mL浓度为1.5 mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80 ℃下反应2 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白‑纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白‑纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白‑纳米铂粉末，在0.6 mL浓度为23.8 mg/mL的牛血清白蛋白‑铂水溶液中加入0.6 mL浓度为0.5 mmol/L的硝酸铋溶液和1.8 mL 浓度为10 mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80 ℃下反应2.5 h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白‑纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白‑纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白‑纳米铂/铋粉末。...

【技术特征摘要】
1.一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在硫离子溶液中加入牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后室温静置，在混合溶液中加入过氧化氢，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，含有乙二胺四乙酸的磷酸盐缓冲溶液，混合后37℃温度温浴，根据652nm处的吸光度得到硫离子浓度；所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋是由如下方法制备的：在5mL浓度为50mg/mL的牛血清白蛋白水溶液中加入5mL浓度为16mmol/L氯铂酸溶液和0.5mL浓度为1.5mol/L氢氧化钠溶液，混匀后水浴80℃下反应2h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂粉末，在0.6mL浓度为23.8mg/mL的牛血清白蛋白-铂水溶液中加入0.6mL浓度为0.5mmol/L的硝酸铋溶液和1.8mL浓度为10mmol/L，pH=7的磷酸盐缓冲液，混匀后水浴80℃下反应2.5h，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000r/min离心超滤，并水洗3次，得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋的水溶液，将牛血清白蛋白-纳米铂/铋水溶液冷冻干燥得到牛血清白蛋白-纳米铂/铋粉末。
2.根据权利要求1所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是所述的牛血清白蛋白-纳米铂/铋与硫离子相互作用后其模拟过氧化物酶活性降低，催化过氧化氢氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐显色能力下降，催化反应产物在652nm处的吸光度减小。
3.根据权利要求1或2所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是在0.4mL硫离子溶液中加入0.01mL浓度为4.76mg/mL的牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶液，混合后在室温放置2分钟，在混合溶液中加入1mL浓度为2mol/L的过氧化氢，0.2mL浓度为16mmol/L的3,3’,5,5’-四甲基联苯胺盐酸盐，2.39mL含有乙二胺四乙酸的浓度为100mmol/L，pH=5的磷酸盐缓冲溶液，所述缓冲溶液中乙二胺四乙酸的浓度为4mmol/L，混合后37℃温浴10分钟，测定652nm波长处的吸光度，随着硫离子浓度的增大，吸光度逐渐减小。
4.根据权利要求1或2或3所述的基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子测定方法，其特征是检测线性范围为0.08~4μmol/L，检测限为50nmol/L。
5.一种基于牛血清白蛋白-纳米铂/铋的硫离子检测试剂盒，其特征是试剂盒中有牛血清白蛋白-纳米铂/铋溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈伟，沈奕珉，何少斌，邓豪华，吴艳玉，
申请(专利权)人：福建医科大学，
类型：发明
国别省市：福建;35