一种红花籽粕活性物质５－羟色胺衍生物的提取方法，属于红花籽的综合开发利用。本发明专利技术以红花籽粕为原料，采用溶剂提取，然后经过甲醇和异辛烷分液萃取，取甲醇相；蒸干后加入８０％甲醇和正己烷分液萃取，蒸去甲醇后加入乙酸乙酯和水分液萃取，采用以上多步溶剂萃取５－羟色胺衍生物，含量＞２７μｍｏｌ／ｇ粕。本发明专利技术从红花籽粕中提取５－羟色胺衍生物属于开创性研究，确定了一系列萃取溶剂，建立了紫外分光光度法定量分析５－羟色胺衍生物的含量，提取方法合理，定量检测简便适用，为５－羟色胺衍生物的进一步分离纯化奠定了基础，有利于红花籽的综合利用。
【技术实现步骤摘要】
一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，属于红花籽的综合开发利用。
技术介绍
红花籽是传统中药红花的种籽，我国红花的栽培历史悠久，红花资源丰富，品种繁多，分布甚广，最主要的产地是新疆、四川、云南、河南、浙江。新疆是我国最大的红花产区，新疆红花油亚油酸含量高达83.7％，种植面积及产量均占全国红花的80％以上，是我国红花的集中产地。红花籽粕中含有0.5％～1.0％左右的5-羟色胺衍生物，目前从其中发现了7～8种5-羟色胺衍生物，含量最多的是阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺。这类5-羟色胺衍生物都具有较强的抗氧化性，香豆酰5-羟色胺还可以促进成纤维细胞增殖，并且是一种很好的抗炎药物。另外，5-羟色胺衍生物在化妆品、工程树脂等领域中用作UV吸收剂的开发也极具潜力。关于从红花籽粕中提取5-羟色胺衍生物，日本、韩国有了一定的研究。国内对5-羟色胺衍生物的相关研究非常少，有关红花籽粕中5-羟色胺衍生物的提取、纯化和应用等方面内容鲜见报道。红花籽粕中5-羟色胺衍生物的主要结构式如下 1、阿魏酰5-羟色胺R′＝OCH3R＝H2、香豆酰5-羟色胺R′＝H R＝H
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，采用溶剂提取法和溶剂分液萃取法提取5-羟色胺衍生物。技术方案一种红花籽粕活性物质5-羟色胺衍生物的提取方法，是以红花籽粕为原料，采用溶剂提取法对红花籽粕进行提取，结合采用分液萃取法通过异辛烷、正己烷和乙酸乙酯三步进行分液萃取得到5-羟色胺衍生物粗品，通过紫外分光光度法快速简便地测定了红花籽粕中5-羟色胺衍生物总量。工艺为以红花籽粕为原料，采用溶剂提取法提取，提取的工艺条件为原料粒度为40-60目，提取溶剂为95％乙醇，液料比溶剂∶红花籽粕(mL/g)为8～15∶1，温度为60～75℃，进行搅拌回流提取，时间为2～4小时，提取结束后抽滤，将滤液于旋转蒸发仪上蒸干；然后经过甲醇和异辛烷分液萃取，甲醇和异辛烷的体积比为2∶1，甲醇的体积用量为20mL/g红花籽粕，取甲醇相；蒸干后加入80％甲醇和正己烷分液萃取，80％甲醇和正己烷的体积比为2∶1，甲醇的体积用量为20mL/g红花籽粕，取80％甲醇相；蒸去甲醇后加入乙酸乙酯和水分液萃取，乙酸乙酯和水的体积比为2∶1，乙酸乙酯体积用量为10mL/g红花籽粕，取乙酸乙酯相，蒸干得到5-羟色胺衍生物粗品，并建立了5-羟色胺衍生物紫外分光光度的定量分析方法。所建立的紫外分光光度的定量分析方法，在322nm下以阿魏酸作为标准物质，回归方程为A＝14.254C-0.0515，R2＝0.9993，加样平均回收率为98.34％，精密度变异系数CV＝0.407％。紫外分光光度法定量分析通过溶剂萃取分液得到5-羟色胺衍生物粗提物，分析5-羟色胺衍生物的紫外特性，发现阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺在322nm左右有最大吸收峰，这和阿魏酸的紫外吸收类似，另外其他几种衍生物在322nm也均有吸收。阿魏酰5-羟色胺和香豆酰5-羟色胺占红花籽粕中5-羟色胺衍生物总量的近80％，以这两种含量最大的5-羟色胺衍生物的紫外吸收为标准，采用紫外分光光度法基本可以定量出总量的多少。相关研究表明，在322nm时，杂质对红花籽粕中几种5-羟色胺衍生物的紫外吸收影响比较小，并且红花籽粕中原含有的5-羟色胺等杂质在溶剂萃取过程中得到初步分离，对最终结果的干扰也较小。因此，在322nm下以阿魏酸作为标准物质，用紫外分光光度法来定量5-羟色胺衍生物的总量，可用来衡量从红花籽粕中提取5-羟色胺衍生物工艺的优化程度，其线性回归方程为A＝14.254C-0.0515，R2＝0.9993，加样平均回收率为98.34％，精密度变异系数CV＝0.407％。本方法除了对过程中溶剂分液萃取进行严格控制外，主要对溶剂种类、提取时间、提取温度、料液比、原料粒度进行研究，以确定提取条件。本方法5-羟色胺衍生物提取含量＞27μmol/g粕。本专利技术的有益效果从红花籽粕中用溶剂提取得到的浸出物成分复杂，须尽量蒸去溶液使成稠膏状，用不同极性的溶剂相继萃取。本专利技术确定了提取条件和分液萃取所用溶剂，建立了5-羟色胺衍生物紫外分光光度的定量分析方法，在322nm下以阿魏酸作为标准物质，用紫外分光光度法来定量5-羟色胺衍生物的总量，可用来衡量从红花籽粕中提取5-羟色胺衍生物工艺的优化程度，提取率高有利于后续分离纯化。本专利技术对红花籽的综合利用具有重要的实际意义，为5-羟色胺衍生物的开发利用奠定了基础。具体实施例方式实施例1紫外分光光度法定量分析方法建立用万分之一电子天平精确称取阿魏酸标准品0.0755g于100mL烧杯中，用无水乙醇溶解，定容于100mL的容量瓶中(浓度3.892μmol/mL)，摇匀，作为标准溶液。吸取上述标准溶液0.2mL，用无水乙醇定容于50mL容量瓶中，以此作为母液，浓度0.01557μmol/mL。并以无水乙醇溶液为参比液，作空白实验。采用紫外可见分光光度计在200～400nm的波长范围内扫描。分别精密吸取浓度为3.892μmol/mL的阿魏酸标准溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于5个50mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，以无水乙醇空白液作参比，用紫外分光光度计在波长322nm下测定各种浓度的标准液的吸光度。以吸光度A为纵坐标，阿魏酸浓度C(μmol/mL)为横坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程为A＝14.254C-0.0515，R2＝0.9993。分别进行加标回收实验和精密度实验，得到此方法的加样平均回收率为98.34％，精密度变异系数CV＝0.407％。最后由下式计算红花籽粕中5-羟色胺衍生物总量 实施例2提取溶剂的选择准确称取5份5g红花籽粕(原始粒度)于250mL三口烧瓶中，分别加入100.0mL的甲醇、50％甲醇、95％乙醇、50％乙醇和水，即料液比是1∶20，在70℃的水浴锅中恒温搅拌提取45min，研究提取溶剂对提取结果的影响。结果为甲醇和50％甲醇的提取效率高于95％乙醇，50％乙醇和水。在水作溶剂时提取效率最低。甲醇水溶液提取产物中的水溶性杂质明显增高，杂质降低了产物的纯度，甲醇的提取效果较乙醇的稍高，但甲醇毒性太大。乙醇价格便宜，来源方便，并且沸点适中(78℃)，也可反复使用，且无毒性，所以使用乙醇较好，适用于工业提取溶剂，因此从安全、环保等因素考虑，选取95％乙醇作为提取溶剂。 实施例3提取时间的选择准确称取5份5g红花籽粕(原始粒度)于250mL三口烧瓶中，各加入100.0mL的95％乙醇，即料液比是1∶20，在70℃的水浴锅中分别恒温45、90、120、180、240min，研究提取时间对提取结果的影响。提取时间越长，提取产量越高，特别是在180min之前增长趋势比较明显，在180min后提取量增加趋势变缓，说明此时粕中5-羟色胺衍生物接近提取完尽，确定提取时间为120-240min。 实施例4提取温度的选择准确称取5份5g红花籽粕(原始粒度)于250mL三口烧瓶中，各加入100.0mL的95％乙醇，即料液比是1∶20，分别在25、40、55、70、85℃水浴锅中恒温搅拌180min，研究提取温度对提取本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种红花籽粕活性物质５－羟色胺衍生物的提取方法，其特征是以红花籽粕为原料，采用溶剂提取法提取，提取的工艺条件为：原料粒度为４０－６０目，提取溶剂为９５％乙醇，液料比：溶剂∶红花籽粕（ｍＬ／ｇ）为８～１５∶１，温度为６０～７５℃，进行搅拌回流提取，时间为２～４小时，提取结束后抽滤，将滤液于旋转蒸发仪上蒸干；然后经过甲醇和异辛烷分液萃取，甲醇和异辛烷的体积比为２∶１，甲醇的体积用量为２０ｍＬ／ｇ红花籽粕，取甲醇相；蒸干后加入８０％甲醇和正己烷分液萃取，８０％甲醇和正己烷的 体积比为２∶１，甲醇的体积用量为２０ｍＬ／ｇ红花籽粕，取８０％甲醇相；蒸去甲醇后加入乙酸乙酯和水分液萃取，乙酸乙酯和水的体积比为２∶１，乙酸乙酯体积用量为１０ｍＬ／ｇ红花籽粕，取乙酸乙酯相，蒸干得到５－羟色胺衍生物粗品，并建立了５－羟色胺衍生物紫外分光光度的定量分析方法。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：金青哲，王兴国，刘元法，单良，易晓霆，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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