用于免疫分析的甲基苯丙胺衍生物和结合物制造技术

具有在苯环上的间位取代的烷基连接剂和在甲基苯丙胺半抗原的氮上的保护基团的甲基苯丙胺衍生物的化合物。这些化合物具有结构（Ⅰ），其中Ｒ１是包含２－１５个碳原子和０－６个杂原子的烷基连接剂，Ｒ２是离去基团，和Ｒ３是保护基团。下式化合物（Ⅱ），其中Ｒ１是包含２－１５个碳原子和０－６个杂原子的烷基连接剂和Ｒ２是多糖或微颗粒。用于确定样品中的甲苯丙胺的免疫分析和用于确定样品中的甲基苯丙胺的试验盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术 一 般涉及用于确定生物样品中的药物滥用的免疫分析方法 的领域，尤其是，涉及用于确定苯丙胺类药物的免疫分析方法，更尤其 涉及可因此使用的曱基苯丙胺衍生物和结合物。
技术介绍
通常称作"迷幻类药物"的 一类违法设计师药物的使用和滥用近年 来已显著增加。这些化合物是特征在于具有稠合亚曱基二氧基苯基环体系的苯丙胺的衍生物，包括MDA(3,4-亚曱基二氧基苯丙胺)，MDMA, 还称作"迷幻剂"(3,4-亚甲基二氧基-N-曱基苯丙胺)，MDEA,还称作 "Eve"(3,4-亚甲基二氧基-N-乙基苯丙胺)，BDB(3,4-亚甲基二氧基苯基-2-丁胺)，和MBDB(3,4-亚曱基二氧基苯基-N-曱基丁胺)。迄今，用于检测迷幻类药物的方法主要涉及原先开发用于检测苯丙 胺和/或曱基苯丙胺的免疫分析。通过这些分析对迷幻类药物的检测依赖 于可在苯丙胺和/或甲基苯丙胺抗体之间同时存在的有限相互反应性。通 过这种分析得到的实际结果仍不能表明亚曱基二氧基(MD)类衍生物的 何种特定物质或成分存在于样品中。一般来说，苯丙胺和曱基苯丙胺免疫分析对迷幻类药物是相对不敏 感的，和无-特定性的。这些分析具有特别有限的对MDEA衍生物的识 别。本专利技术涉及这些和其它问题的改善，其中涉及使用常规苯丙胺和/ 或甲基苯丙胺免疫分析用于检测亚曱基二氧基类，或迷幻类药物成分。在用于药物滥用的测试中，免疫分析，尤其竟争性结合免疫分析已 被证实是尤其有利的。在竟争性结合免疫分析中，生物样品中的分析物 与标记试剂，或分析物类似物，或示踪剂竟争该分物和分析物类似物 所特定的抗体上的有限数目的受体结合位。酶如P -半乳糖苷酶和过氧化 酶，荧光分子如荧光素化合物，放射性化合物如1251,和微颗粒是常用 作示踪剂的标记物质。分析物在样品中的浓度决定结合至抗体上的分析 物类似物的量。分析物类似物的结合量与分析物在样品中的浓度成反 比，因为分析物和分析物类似物分別以其相应的浓度结合至抗体上。游 离或结合分析物类似物的量可随后通过适合所用特殊标签的方法而确 定。目前流行的是基于^1颗粒在溶液中的动力学相互作用(通过透光度 的变化而度量)的自动分析。在不存在样品药物的情况下，游离抗体结合 至药物-微颗粒结合物上，导致形成颗粒聚集体。随着聚集作用在不存在 样品药物的情况下进行，吸光率增加。如果样品包含所讨论的药物，药 物与颗粒-结合药物衍生物竟争游离抗体。结合至样品药物上的抗体不再 可用于促进颗粒聚集，和随后颗粒晶格形成得到抑制。样品药物的存在 消除了吸光率的增加，这与药物在样品中的浓度成比例。样品药物含量 相对药物的已知的截断值浓度所得的值而测定。苯丙胺类药物分析的一个问题在于，已有技术方法不提供足够的与 抗体的交叉反应性和置换作用使得以足够的灵敏度测定样品中所有的苯丙胺类分析物，尤其苯丙胺，曱基苯丙胺，3,4-亚甲基二氧基苯丙胺 (MDA), 3,4-亚曱基二氧基-N-曱基苯丙胺(MDMA),和3,4-亚甲基二氧基 -N-乙基苯丙胺(MDEA)。本专利技术的甲基苯丙胺衍生物通过提供与曱基苯 丙胺抗体的所需交叉反应性和置换作用而克服这些问题，灵敏地测定苯 丙胺，曱基苯丙胺，和迷幻类化合物。本专利技术所克服的另 一 问题在于，半抗原通过甲基苯丙胺半抗原上的 游离氨基基团而不必要地共轭。本专利技术衍生物避免了该问题。U.S.专利5,135,863(1992年8月4日授予Hu等人)描述了包含通过石克醇键结合至苯丙胺或曱基苯丙胺类似物上的标签的结合物。该结合物进一 步包含在间-或对-位上键接至苯环的连接剂，和苯丙胺氮未被保护。U.S.专利申请2001/0051158(2001年12月13曰出版，Owens等人)描述 了免疫化学半抗原，它们是曱基苯丙胺的间位衍生物。甲基苯丙胺半抗 原上的游离氨基基团未被保护。专利技术概述苯丙胺半抗原的氮上的保护基团的曱基苯丙胺衍生物。这些化合物具有 结构其中Ri是包含2-15个碳原子和0-6个杂原子的烷基连接剂，R2是离去基团，和R3是保护基团。本专利技术还涉及具有以下结构式的化合物其中Ri是包含2-l 5个碳原子和0-6个杂原子的烷基连接剂和R2是多 糖或孩i颗粒。本专利技术进一步涉及用于确定样品中的甲苯丙胺的免疫分析，包括步骤(a)将被怀疑包含曱基苯丙胺的样品与对甲基苯丙胺特定的抗体和 具有以下结构的标记分析物类似物结合、^ /NH其中Ri是包含2-15个碳原子和0-6个杂原子 的烷基连接剂和R2是多糖或微颗粒，这样甲基苯丙胺和分析物类似物竟 争性地结合至抗体上，和(b)确定结合或未键接至抗体上的标记类似物量的作为对样品中的 甲基苯丙胺的度量。另外，本专利技术包括一种用于确定样品中的甲基苯丙胺的试验盒，包含(a) 对甲基苯丙胺特定的抗体和(b) 具有以下结构的标记分析物类似物<formula>formula see original document page 7</formula>ZNH其中R4是包含2-15个碳原子和0-6个杂原子的烷基连接剂和R2是多糖或微颗粒。本专利技术优选的化合物是具有以下结构的4-{-丙基)-苯氧基)-丁酰基氨基]-曱基)-苯甲酸2,5-二氧 代-吡咯烷-l-基酯<formula>formula see original document page 7</formula>如果结合至氨基右旋糖酐上，随后去保护N-三氟乙酸酯基团，该化 合物提供一种结合物，它在用于免疫分析(其中它与游离曱基苯丙胺竟争 用于结合至被固定在微颗粒上的曱基苯丙胺-特定抗体)时提供与相应苯 丙胺-氨基右旋糖酐-抗体体系拟合良好的标准曲线。附图的简要描述附图说明图1是示意图，显示例如描述于实施例1和2化合物1的合成。 图2和3是示意图，显示例如描述于实施例3至8的化合物8的合成。 图4是示意图，显示例如描述于实施例9和10的化合物10的合成。 图5是示意图，显示本专利技术化合物与BSA的配合和氮的去保护，得到例如描述于实施例11的化合物11 。图6是示意图，显示本专利技术化合物与氨基右旋糖酐的配合，随后去保护N-三氟乙酸酯基团，得到化合物12例如描述于实施例16。图7是示意图，显示例如描述于实施例12的化合物15的合成。 图8是示意图，显示例如描述于实施例13的化合物17的合成。 图9是示意图，显示例如描述于实施例14的化合物18的合成。 图10是示意图，显示例如描述于实施例15的化合物19的合成。 图ll是使用本专利技术的氨基右旋糖酐结合物12与甲基苯丙胺抗体-涂覆颗粒生成的剂量响应曲线。图12是使用本专利技术氨基右旋糖酐结合物12与N-乙基苯丙胺抗体-涂 覆颗粒生成的剂量响应曲线。专利技术详述在该描述和在所附权利要求书中，要理解以下定义。术语"半抗原"是指部分或不完全抗原。半抗原是不能刺激抗体形成 但与抗体反应的无蛋白质的物质，最低分子量物质。苯丙胺，甲基苯丙 胺，亚甲基二氧基曱基苯丙胺，和其它苯丙胺类化合物是半抗原。术语"活化半抗原"是指例如，通过连接携带反应性部分的连接基团 而具有可得反应位的半抗原，所述基团可用于将半抗原连接至载体，免 疫原，标签，示踪剂或其它部分。术语"分析物"是指其存在或量要被确定的任何物质或物质组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有以下结构式的化合物　　　　＊＊＊　　　　其中Ｒ↓［１］是包含２－１５个碳原子和０－６个杂原子的烷基连接剂，Ｒ↓［２］是离去基团，和Ｒ↓［３］是保护基团。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：RA许，SS维托恩，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]