小檗碱衍生物的制备方法技术

一种小檗碱衍生物－醇式小檗碱的制备方法，包括以下步骤：将硫酸氢小檗碱原料溶于水中，制成硫酸氢小檗碱饱和溶液；在硫酸氢小檗碱饱和溶液中滴加碱溶液，直至再无沉淀物产生为止，形成浑浊液；对上述浑浊液进行过滤，获得沉淀物；将所得沉淀物溶于有机溶剂中，通过硅胶柱层析，用有机溶剂洗脱；对上述有机溶剂洗脱液减压浓缩，真空低温干燥，获得粗产物；将所得粗产物用甲醇或乙醇重结晶，即可得到足够量的小檗碱衍生物纯品。动物实验发现，所制得的小檗碱衍生物具有多种药物活性，显示出优异的调节２型糖尿病大鼠血糖和血脂的作用，比目前公认具有调节血糖和血脂作用的、结构最相关的化合物盐酸小檗碱的效果要好得多，且有效剂量要小很多。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及以小檗碱(BBR)为母体进行化学修饰合成的方法，具体地指一种小檗碱 衍生物的制备方法。
技术介绍
目前，糖尿病已经成为世界性的流行病，据统计资料显示国内2型糖尿病患病率 1976年为1. 0%， 1989年为2. 0%， 1996年为3. 2%， 2001年上海和广州则超过了 9%，已经 高于欧美发达国家的平均水平。糖尿病已经成为人类的"第三大杀手"，与之相关的医疗 护理费用开支极为庞大，即使是经济发达的国家也不堪重负。小檗碱(BBR)亦称黄连素，它是从中药黄连、黄檗等原料中提出的一种抗菌性生物 碱，其盐酸盐为黄色粉末，味苦，微溶于水。其在试管中能痢疾杆菌、结核杆菌和葡萄球 菌等，效价较一般抗菌素低，其口服后吸收很差，对细菌性痢疾和某些肠道感染有效。其 注射后对循环和呼吸有一定的抑制作用。其外用可治疗化脓性感染和眼结膜炎等。科研人员对小檗碱(BBR)治疗和预防糖尿病的课题己进行了近十年的研究，大量的 实验数据表明小檗碱可治疗2型糖尿病，其最主要的作用就是调节患者的血糖和血脂。 调节血糖包括促进胰岛素分泌，改善胰岛素抵抗(主要是调节胰岛素抵抗相关因子游离脂 肪酸FFA的量)；调节血脂主要在于降低甘油三酯的量，且疗效确切。然而在实际应用中， 不仅小檗碱的动物试验服用剂量较高，其有效剂量高达185mg Kg—1 d—、而且小檗碱的 临床口服剂量亦较高，有的高达3g"cT1，且1 3个月为一疗程。高剂量长周期地使用， 无疑会破坏患者肠道中的菌丛平衡，增加小檗碱的副作用。而另一方面，小檗碱的离体试 验结果显示其有效浓度需求却很低，1 10umo1 L—1的小檗碱呈剂量依耐性地促进 HIT-T15细胞分泌胰岛素，0. 1 100nmo1 L—1的小檗碱可显著增加脂肪细胞的葡萄糖消 耗和转运，5 100 u mol L—1的小檗碱可使H印G2细胞的葡萄糖消耗量增加33% 60%，疗 效与lmmol化^的二甲双胍相当，由此可见低剂量小檗碱离体试验卓越的降糖效果。体内 及离体剂量巨大的反差，提示小檗碱功效卓越但口服吸收极差。研究人员曾经以增强小檗 碱肠胃吸收为目的，进行过许多药剂学上的实验探索，但实际应用于动物口服给药时，发 现效果并不理想，这可能是动物体内的胃酸、酶系统或其他因素影响所致。对大鼠肠灌流 实验也表明，灌肠2. 5小时后仅有约5%的小檗碱从大鼠肠道消失，这提示在2.5小时以 内，高达95%的小檗碱未被吸收利用。如何解决小檗碱的吸收问题，大幅度降低其服用 剂量，充分发挥其治疗2型糖尿病的功效是科研人员急需攻克的难题。在2004年出版的《JOURNAL OF MOLECULAR STRUCTURE》(分子结构杂志)第687巻第 135 142页中公开了一种小檗碱衍生物，我们称它为醇式小檗碱(BBR-H)，具体见第136 页图1中的第二幅，其化学结构式如下文中介绍了该，该方法是将lOOmg硫化小檗碱(la， X=HS04) 溶于20ml水中，以乙醚作为该水溶液的保护层，加入氢氧化钠，轻轻摇动混合液，然后 放在周围的温度下让其蒸发，2天之后，可以收集到一些亮黄色的晶体2a，即醇式小檗碱 (BBR-H)。但通过该方法获取的小檗碱衍生物的量极少，不足以支持大规模的药物学实验 和应用。文中也对该小檗碱衍生物进行了一些性能方面的研究实验，但其结论是发现该小 檗碱衍生物几乎没有生物活性。本专利技术的目的就是要重新提供一种，以克服现有技术中获取 醇式小檗碱(BBR-H)量极少的不足。本专利技术以硫酸氢小檗碱为原料，通过对现有小檗碱(BBR)的结构进行修饰，来合成 上述醇式小檗碱(BBR-H)，其制备方法包括以下步骤1) 将硫酸氢小檗碱原料溶于水中，制成硫酸氢小檗碱饱和溶液；2) 在硫酸氢小檗碱饱和溶液中滴加碱溶液，直至再无沉淀物产生为止，形成浑浊液;3) 对上述浑浊液进行过滤，获得沉淀物；4) 将所得沉淀物溶于有机溶剂中，通过硅胶柱层析，用有机溶剂洗脱；
技术实现思路
5) 对上述有机溶剂洗脱液减压浓縮，真空低温干燥，获得粗产物；6) 将所得粗产物用甲醇或乙醇重结晶，即可得到小檗碱衍生物纯品。经检测可知， 其分子量为353、分子式为C2。H19N05、其化学结构式如下所示对上述制得的醇式小檗碱(BBR-H)进行药理学方面的实验发现，其具有多种有价值 的药物活性，特别是其容易吸收的性能是现有小檗碱(BBR)所不具备的。具体地说本专利技术制得的醇式小檗碱在动物试验中显示出了优异的调节2型糖尿病大鼠血糖和 血脂的作用，它比目前公认具有调节2型糖尿病大鼠血糖和血脂作用的、结构最相关的化 合物盐酸小檗碱的效果要好得多，且有效剂量要小很多。本专利技术制得的醇式小檗碱在治疗2型糖尿病上的作用，主要体现在调节血糖和血脂方 面。调节血糖包括改善口服葡萄糖耐量、促进胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗(主要是调节 胰岛素抵抗相关因子游离脂肪酸FFA的量)，调节血脂主要在于降低甘油三酯的量。其口 服治疗2型糖尿病大鼠的疗效突出且稳定。以本专利技术制得的醇式小檗碱为活性成份，可以制成各种类型的药物组合物。所述药物 组合物含有治疗有效量的醇式小檗碱、以及含有一种或多种药学上可接受的载体。本专利技术制得的醇式小檗碱和其药物组合物可用于制备治疗2型糖尿病、调节血糖和血 脂的药物。上述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，例如稀释剂、赋形剂如水 等；填充剂如淀粉、蔗糖等；黏合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯垸酮等； 湿润剂如甘油等；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠等；表面活性剂如十六烷醇等；润滑 剂如滑石粉、硬脂酸钙、镁和聚乙二醇等。另外，还可以在药物组合物中加入其它辅助剂 如香味剂、甜味剂等。 、本专利技术制得的醇式小檗碱通常以药物组合物的形式通过口服、鼻吸入或直肠给药的方 式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、 颗粒剂、胶囊剂等。用于鼻吸入或直肠给药时，可将其制成溶液或水或油性悬浮剂等。优 选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊剂，最好的形式是针对肠道特定部位释放的制剂。本专利技术药物组合物的各种剂型可以按照药学领域常规的生产方法制备。例如使活性成 份与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。优选的本专利技术药物组合物含有重量比为0. 1% 99. 5%的活性成份，最优选的本专利技术药 物组合物含有重量比为0. 5% 95%的活性成份。本专利技术药物组合物的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、以及患者病情的严重 程度等变化，其日用剂量按活性成份计算可以是0.2mg 16mg/Kg体重，最优选的日用剂 量是2mg 6mg/Kg体重，可以一次或多次施用。本专利技术依照前体药物的设计原理，以小檗碱(BBR)为母体进行化学修饰合成，从而 制出性能更加优良的醇式小檗碱(B服-H)，为开发新的治疗糖尿病的药物组合物大下了基 础。本专利技术以科学实验为依据来筛选小檗碱衍生物，其比国际上大海捞针式的从数十万种 化合物中筛选先导化合物的方法具有明显优势。再者，小檗碱是价廉物美的治疗2型糖尿 病药物，其作用机理的明确有助于肯定作为其前体物的小檗碱衍生物在临床上运用的合理性，从而充分发挥其社会效益和经济效益。附图说明图1为盐酸小檗碱+空本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小檗碱衍生物的制备方法，包括以下步骤：１）将硫酸氢小檗碱原料溶于水中，制成硫酸氢小檗碱饱和溶液；２）在硫酸氢小檗碱饱和溶液中滴加碱溶液，直至再无沉淀物产生为止，形成浑浊液；３）对上述浑浊液进行过滤，获得沉淀物；４）将所得沉淀物溶于有机溶剂中，通过硅胶柱层析，用有机溶剂洗脱；５）对上述有机溶剂洗脱液减压浓缩，真空低温干燥，获得粗产物；６）将所得粗产物用甲醇或乙醇重结晶，即可得到小檗碱衍生物纯品，它是下列结构式所示的化合物：＊＊＊。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽君，陆付耳，魏世超，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属同济医院，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]