CCR9活性抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及式（Ⅰ）化合物，其中残基具有不同含义，其可用作药物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CCR9活性抑制剂 本专利技术涉及CCR9活性抑制剂。CC趋化因子配体25(CCL25)最初被描述为胸腺表达趋化因子 (TECK)，其经由通过CC趋化因子受体9 (CCR9)的信号传递而在T细胞 归巢至小肠中起到重要的作用。CCL25在小肠内、特别是在上皮隐窝中组 成型表达，但是在结肠中和在其它粘膜表面微弱表达或完全不表达。CCR9 是唯一已知的TECK/CCL25受体。CCR9的表达与周围T淋巴细胞归巢 到小肠的能力强相关。大多数肠上皮内淋巴细胞(IEL)和固有层T淋巴细胞 (LPL)是CCR9+,而更低百分比的在血液中循环的T细胞是CCR9+。在周 围血液中发现的CCR9+ T细胞几乎专有的展示肠归巢受体a4p7。用针对 TECK/CCL25的抗体阻断CCR9显著地抑制T淋巴细胞到小肠的归巢。 此外，TECK/CCL25和CCR9+LPL严格定位于小肠而不是大肠，提示在 胃肠道不同部分中淋巴细胞募集有不同的机制。研究还已提示了 TECK/CCL25在发炎肠粘膜中的T淋巴细胞-内皮相 互作用中的作用。在TNFa刺激后，TECK/CCL25表达增加，并且LPL 粘附至小肠粘膜的粘附力增强。CCR9的脱敏或抗-TECK/CCL25可能减 弱淋巴细胞到小肠賴Ui管的募集。因此，CCL25-CCR9相互作用的靶向性 阻断可提供对免疫介导的疾病(例如肠疾病，诸如自身免疫和炎性疾病或病 症)的有效治疗。已将T淋巴细胞(T细胞)渗入小肠和结肠与腹腔病、食物 过敏、类风湿性关节炎、人类炎性肠疾病(IBD)(其包括克罗恩氏病和溃疡 性结膜炎，例如，包括溃疡性直肠炎)特异地联系起来。也被描述为由CCR9 介导的疾病例如包括变态反应病、银屑病、异位性皮炎、译喘、纤维变性 疾病、源于移植或由移植介导的病症或疾病(例如移植排斥)以及癌诸如白 血病(急性淋巴细胞性白血病)、实体瘤、胸腺瘤、胸腺癌。现在发现了具有作为CCR9抑制剂的出人意料的活性的化合物。 一方面，本专利技术提供了化合物其中Ri是噻吩基，例如瘗吩-2-基；或卣代苯基，诸如氟苯基R2是H或卤代(d-6)烷基，诸如三氟曱基，R3是卤素，诸如氯；或(Cw)烷氧基，例如曱氧基，且 A是O或CO。在式I化合物中，每个单独定义的取代基可以是优选的取代基，例如， 独立于每个其它定义的取代基。另一方面，本专利技术提供了式I化合物，其选自 噻吩-2-磺酸[2-(4-曱氧基-苯氧基)-5-三氟曱基-苯基-酰胺， 和4一氯_]\-[4-(4-氟-苯甲酰基)-苯基1-苯磺酰胺。如果文中没有另外定义，瘗吩基包括噻吩-2-基或噻吩-3-基，例如噻吩 画2-基。卣代苯基包括^L一个或多个囟素取代的苯基，例如，在苯基环的4位 被囟素(例如，氯)取代的苯基。R3优选位于苯基环的4位。优选位于苯基环的邻位或对位。R2优选位 于苯基环的间位。本专利技术提供的化合物在下文中称为"(根据)本专利技术的化合物"。本发 明的化合物包括任何形式的化合物，例如游离形式、盐形式、溶剂合物形 式、以及盐和溶剂合物形式的化合物。另一方面，本专利技术提供了盐形式的本专利技术的化合物。 所述盐优选包括药学上可接受的盐，尽管也包括例如用于制备/分离/ 纯化目的的药学上不可接受的盐。本专利技术包括任何异构形式和任何异构混合物形式的本专利技术的化合物。 当存在互变异构体时，本专利技术还包括本专利技术提供的化合物的互变异构体。另一方面，本专利技术提供了制备式I化合物的方法，其包括以下步骤 a.将式II化合物其中Ri如上所定义，并从反应混合物中分离获得的式I化合物。在式II或式III(起始原料)的中间体中，官能团(如果存在的话)可以任 选以保护形式或盐形式(如果存在成盐基团)存在。保护基(任选存在)可以在 适当的阶段例如根据例如与常规方法类似的方法除去。可将这样得到的本专利技术的化合物转变为本专利技术的另 一种化合物，例如， 可将所得到的游离形式的本专利技术的化合物转变为本专利技术的化合物的盐，反 之亦然。上面的反应是胺磺酰化反应，并可以以合适的例如与常规方法类似的 方法或如本文描述的方法进^f亍。式II和式III的中间体(起始原料)是已知的，或可以根据(例如类似) 常规方法或如本文描述的方法制备。本文中描述的任何化合物，例如本专利技术的化合物以及式II和III的中 间体可以适当地制备，例如根据(例如类似)常规方法，或例如如本文所述制备。本专利技术的化合物，例如包括式I化合物，表现出药理学活性，并且因 此可以用作药物。本专利技术的化合物在 -闪烁迫近分析法(SPA ASSAY)其中R2和R3如上所定义，与式III化合物反应Cl-S02-Ri-Eu-GTP结合分析-钙动员分析(FLIPR ASSAY)中，例如在常规条件下，例如在文中描述的条件下，例如在ICso纳摩 尔最高至低孩嫂尔的范围内，显示出剂量依赖的抑制。在炎性肠疾病治疗中的活性例如在炎性肠疾病的SCID小鼠模型中测定。闪烁迫近分析法(SPA ASSAY) SPA的原理趋化因子通过在靶细胞上的七次跨膜G蛋白偶联受体(GPCR)介导它 们的作用。结合至GPCRs的配体在由a、 p和y亚单位组成的异源三聚体 G蛋白上激活GTP/GDP交换。激动剂结合的GPCR通过催化GDP从a-亚单位分离，允许内源GTP结合以及复合物的分离而启动鸟苷酸循环。 Ga-GTP和GJiY亚单位每个都可以激活效应子，诸如腺苷酸环化酶、磷脂 酶C和离子通道(参见，例如Neer EJ,细胞(Cell); 80:249-57 (1995))。 Ga-GTP通过内在的GTP酶活性而失活，GTP酶使GTP水解为GDP; 随后含有GDP的G蛋白为下一个活化循环做准备。可以在体外通过测量 抗水解GTP类似物(诸如5'-0-(3-[3SSI硫代磷酸酯([3SS卜GTPYS))与包含感 兴趣的受体的细胞膜的结合而监测这一过程。显示GTPyS闪烁迫近分析法 (SPA)对于监测通过TECK的CCR9的激活是有用的功能分析。SPA是用于许多生物学过程的快速和敏感的分析的均一 (homogeneous)和通用的分析技术。这种分析方法不需要分离步骤并且可以 自动化。将含有受体的膜通过糖蛋白部分偶联至荧光麦胚凝集素包被的珠 子(Amersham Bioscience, #RNPQ 0001)。 一旦固定，受体与珠子足够的接 近，以致于如果激动剂结合的GPCR启动鸟苷酸循环， [35sGTPYs(Amersham Bioscience, # SJ1308)则结合到膜上。该放射性的分 子将足够接近地相邻，以致于衰变粒子刺激珠子内的闪烁体发光，然后通 过基于PMT的闪烁计数器检测发出的光。没有结合的放射性配体与珠子离得太远而不能转移能量并且因此不能被检测到。 细胞和细胞培养将用人类CCR9受体转染的小鼠前B细胞300-19在细胞培养瓶中(在 162cm2的细胞培养瓶中有100 ml细胞悬浮液)中，在，在含有5% C02 的潮湿空气中，在补充有青霉素(100IU/ml)、链霉素(O.l mg/ml)、 L-谷氨 酰胺(至4.5mM终浓度)、10%FBS、 lmM丙酮酸钠、0.05jiM2-巯基乙 醇、1.5將/ml噤呤霉素和20 mM HEPES的RPMI1640培养基中悬浮培 养。约12次传代细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
式Ⅰ化合物，　＊＊＊　Ⅰ　其中　Ｒ↓［１］是噻吩基或卤代苯基，　Ｒ↓［２］是Ｈ或卤代（Ｃ↓［１－６］）烷基，　Ｒ↓［３］是卤素或（Ｃ↓［１－６］）烷氧基，且　Ａ是Ｏ或ＣＯ。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：JM卡瓦利多埃雷拉，H雅克施，P莱尔，G沃纳，A温尼斯基，
申请(专利权)人：诺瓦提斯公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]