半夏总有机酸和提取方法及其在制备药物中的应用技术

一种半夏总有机酸，其特征在于它主要包括琥珀酸、棕榈酸、Ｎ－乙酰谷氨酸、苹果酸等有效成分。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中草药提取物，特别是涉及一种中草药提取物和提取方法及其在制备治疗疾病药物中的应用。
技术介绍
半夏为天南星科植物三叶半夏Pinellia ternata(Thunb)Breit干燥块茎，是中医临床最常用的中药，具有降逆止呕、燥湿化痰、消痞散结等功效。临床主要用于与各种方剂配伍治疗痰多咳喘、痰饮眩悸、呕吐反胃、胸脘痞闷、梅核气、痰厥头痛等，生品外用治疗痈肿痰核，姜制后多用于降逆止呕。 半夏主产于四川、江苏、安徽、浙江、河南、湖北、江西、山东、云南等地，野生半夏几乎全国大部分地区均有生长，由于半夏临床用量大，野生半夏来源日益萎缩，因而目前药材市场上均以栽培的半夏供临床应用，其中以四川、安徽、河南、山东、湖北等地栽培的半夏药材产量较大。 中药半夏是中医临床最常用的中药之一，其功效多，临床配伍量大。据统计，在558种中药处方中，半夏的使用频率居第22位。半夏的研究已经有近70年的历史，但到目前为止，半夏药材中起治疗作用的有效成分和有效部位均不甚明了，尤其是半夏临床使用最广泛的止咳化痰、消痞散结的有效成分和有效部位不清楚。本专利技术专利申请的内容就是针对半夏研究中的问题首次提出其止咳化痰、消痞散结的有效部位的类别和提取分离技术以及作用。 中药材的药效物质基础研究一直是中药现代化研究中迫切需要解决的关键问题。也是中药走出国门，为世界医药界所认识和接受的主要科学依据。在中药复方的药效物质基础研究的过程中，组成复方的单味中药本身所具有的药效物质和所产生的作用就成为对整体复方作用贡献的药效物质基础。而到目前为止，临床上常用的300多味中药中仅有数十味中药的主要有效成分比较明确，如人参中的人参皂苷类成分、银杏中的黄酮苷类成分、甘草中的甘草酸类成分、大黄中的蒽醌类成分、丹参中的丹参酮、丹参酸类成分等。综合这些药材的有效成分，均以成分类别作为药效的物质基础。而以单一成分代表药效的例子较少。作为有效部位的研究技术和成分类别，半夏中止咳化痰、消痞散结的有效部位总有机酸类成分在以往的研究中均未见到。
技术实现思路
1、专利技术目的 本专利技术的目的是针对目前半夏药材起治疗作用的有效部位和有效成份尚不清楚的问题，本专利技术专利申请是从半夏药材中提取起止咳作用和消痞散结作用的有效部位和有效成分，以及提取分离方法和药理药效作用，及其在制备治疗止咳化痰、消痞散结、抗肿瘤药物中的应用。 2、技术方案本专利技术的目的是采用下列技术方案来实现的半夏总有机酸，其特征是主要包括琥珀酸、棕榈酸、N-乙酰谷氨酸、苹果酸等有效成分。 半夏总有机酸的提取分离方法，其提取工艺步骤如下(1)称取半夏生药材，粉碎成粗粉；(2)用乙醇提取，减压回收乙醇，得醇浸膏；(3)加入稀盐酸，调节PH值，将该溶液用乙酸乙酯进行萃取至萃取液无色后，进行减压浓缩；(4)再用稀碱溶液萃取，合并碱液后，用稀酸酸化；(5)然后用乙酸乙酯萃取，直至乙酸乙酯萃取液无色，并无有机酸反应，萃取液减压回收乙酸乙酯，得提取物浸膏；(6)将浸膏用乙醇溶解后，过滤，滤液减压回收乙醇，得半夏总有机酸提取物。 上述步骤(1)中半夏药材粗粉为10-40目，步骤(2)中所用的乙醇浓度为60-95％，乙醇量为8～15倍量，提取方法为渗漉或加热回流，加热回流的次数为2～3次，每次回流的时间为1～2小时；步骤(3)中的PH值为1.0-3.0，用1∶3的乙酸乙酯萃取，步骤(4)中的稀碱溶液包括Na2CO3、NaOH、NaHCO3，碱液浓度为3-8％，稀酸包括HCl、H2SO4，其浓度为10-30％。 将半夏总有机酸浸膏40-80g与硅胶拌样、湿法上柱，经石油醚∶乙酸乙酯不同的比例梯度洗脱，得到琥珀酸、棕榈酸、N-乙酰谷氨酸；总有机酸溶解在乙醇溶液中，经硅胶G板制备薄层层析得到苹果酸等有效成分。上述技术方案中，拌有机酸的硅胶用量为100～150g，制备层析中硅胶板置硝酸钾饱和溶液中饱和的时间为8～12小时，有机酸乙醇溶液的点样量为100～500ul。 半夏总有机酸在制备治疗止咳化痰疾病的药中的应用。 半夏总有机酸在制备治疗消痞散结疾病的药中的应用。 半夏总有机酸在制备治疗抗肿瘤药中的应用通过半夏总有机酸的药效学研究的结果表明，半夏总有机酸具有止咳、抗炎、提高胃肠动力，抗肿瘤等作用，实验证明半夏药材中的总有机酸是起着止咳化痰、消痞散结作用的有效部位。在总有机酸中的有效成分主要包括琥珀酸、棕榈酸、N-乙酰谷氨酸、苹果酸等。 3、有益效果通过动物实验结果表明从半夏药材中提取的总有机酸具有明显的药理药效作用(1)止咳作用明显。用化学刺激，电刺激豚鼠气管粘膜，引发咳嗽，实验表明总有机酸可以使咳嗽次数减少，咳嗽潜伏期延长，抑制咳嗽引起的呼吸振幅坛高，降低咳嗽强度；(2)抗炎和抑菌作用，用二甲苯引发小鼠耳廓肿，实验表明总有机酸具有抑制小鼠耳廓肿的作用，体外抑菌实验表明，对乙型链球菌有一定的抑制作用，以二氧化硫引咳小鼠，测定咳嗽时炎性介质PGE2(前列腺素)的含量，表明半夏总有机酸高剂量组有降低PGE2含量的作用。 (3)对胃动素分泌有明显提高，具有促进胃动力作用；(4)对体外肿瘤细胞和小鼠实体瘤具有显著的抑制作用。 四具体实施方式 以下通过动物实验结果的实施例对本专利技术的有益效果作进一步的说明。 实施例1半夏总有机酸的提取方法(1)称取半夏生药材5Kg，磨成粗粉，过14目筛；(2)用10倍量的75％乙醇加热回流2次，每次1.5小时，减压回收乙醇至无乙醇味，得醇浸膏；(3)加入稀盐酸，调节PH至2.0，将该溶液以乙酸乙酯(按1∶3)进行萃取至萃取液无色，减压浓缩；(4)以5％的无水Na2CO3溶液萃取，合并碱液后以20％的盐酸酸化；(5)再用乙酸乙酯(按1∶3)萃取，直至萃取无色，并无有机酸反应，萃取液减压回收乙酸乙酯，得提取物浸膏；(6)将浸膏用95％乙醇溶解后，过滤，滤液减压回收乙醇，得半夏总有机酸提取物。 实施例2总有机酸成分的分离将总有机酸浸膏50g，硅胶120g拌样，湿法上柱，以石油醚∶乙酸乙酯按照不同的比例梯度洗脱，在石油谜∶乙酸乙酯20∶1的比例洗脱液经浓缩后静置结晶得到棕榈酸；在石油谜∶乙酸乙酯1∶1的比例洗脱液经浓缩后静置结晶并以甲醇重结晶得到琥珀酸；在石油谜∶乙酸乙酯1∶5的比例洗脱液经浓缩后静置结晶得到N-乙酰谷氨酸。另将半夏总有机酸浸膏1g溶解于乙醇溶液中，以硅胶G铺板，干燥后再置硝酸钾饱和溶液中的层析缸中饱和10小时，将有机酸溶液以条带点样300ul在硅胶板上，以苯∶乙酸乙酯∶乙醚∶甲酸6∶4∶2∶1.5的配比作为展开剂展开进行制备层析，层析完成后将层析板的大部分遮盖，露出部分以溴酚蓝显色，刮取硅胶板上溴酚蓝显色的每一个条带，各条带以无水乙醇回流提取，过滤，滤液减压浓缩成小体积后静置，在Rf值为0.3左右的条带得到颗粒状结晶经检测为苹果酸。 从半夏总有机酸中得到的4种有效成分，均经熔点、质谱、红外光谱，以及碳谱、氢谱分析并与对照品对照确定。 实施例3、半夏总有机酸对氨水和二氧化硫引发小鼠咳嗽次数及潜伏期的影响1.实验材料1.1样品，①半夏总有机酸浸膏，临用时配制成一定浓度的溶液。配制方法取浸膏适量，精密称定，置乳钵中，加入0.1ml吐温-80，充分研磨，再本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种半夏总有机酸，其特征在于它包括琥珀酸、棕榈酸、N-乙酰谷氨酸、苹果酸有效成分。2.一种提取权利要求1总有机酸的方法，其步骤如下(1)称取半夏生药材，粉碎成粗粉；(2)用乙醇提取，减压回收乙醇，得醇浸膏；(3)加入稀盐酸，调节PH值，将该溶液用乙酸乙酯进行萃取至萃取液无色后，进行减压浓缩；(4)再用稀碱溶液萃取，合并碱液后，用稀酸酸化；(5)然后用乙酸乙酯萃取，直至乙酸乙酯萃取液无色，并无有机酸反应，萃取液减压回收乙酸乙酯，得提取物浸膏；(6)将浸膏用乙醇溶解后，过滤，滤液减压回收乙醇，得半夏总有机酸提取物。3.根据权利要求2所述的提取总有机酸的方法，其特征是步骤(1)中半夏生药材粗粉为10-40...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴皓，李伟，何凌云，王媚，池玉梅，张科卫，许凤清，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：