藁本内酯在防治乳腺癌中的应用制造技术

本发明专利技术公开了藁本内酯在防治乳腺癌中的应用，本发明专利技术的研究表明藁本内酯对雌激素受体α(ERα)阴性和阳性乳腺癌细胞均具有一定抑制作用。另外，现有的上市抗乳腺癌药物他莫昔芬等主要对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞起作用，对于雌激素受体α阴性乳腺癌细胞的作用收效甚微，而本发明专利技术的研究表明，藁本内酯能够使乳腺癌细胞的ERα蛋白表达上调，进而与他莫昔芬协同起到防治乳腺癌的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及藁本内酯的新用途，具体涉及藁本内酯在防治乳腺癌中的用途。
技术介绍
乳腺癌又名“乳石”、“乳癌”等，是女性最多发的恶性肿瘤之一。2016年《CancerStatistics》数据显示，2015年美国有1,685,210例新发癌症病例，595,690位患者会因癌症而逝，女性癌症发病率中乳腺癌以29％的比率独占鳌头，死亡率仅次于肺癌位居第二位。而在中国，乳腺癌的发病情况亦不乐观，早在2013年中国肿瘤登记年报数据揭示我国女性乳腺癌发病的平均年龄为48.7岁，比西方国家提早了10年，在女性高发癌症中，乳腺癌已经超越肺癌成为第一。2016年《CancerStatisticsinChina，2015》的统计结果表明，2009-2011年间我国女性癌症发病率显著增加，其中乳腺癌位居第一位，且呈逐年增加态势。因此，乳腺癌是一种严重影响妇女身心健康甚至危机生命的疾病。雌激素在女性的很多生理功能中具有重要作用，包括发育女性的性器官，为怀孕提供乳房和子宫的准备以及在生育后提供人乳喂养等。雌激素受体(estrogenreceptoralpha，ER)在乳腺癌的发生发展过程中扮演着重要角色，在体内通过与雌激素的结合激活含雌激素应答元件基因和含有其他转录因子结合元件基因的表达，进而导致乳腺癌的发生。约2/3乳腺癌患者其乳腺癌组织表达ER，这些肿瘤细胞一般分化较好，生长转移缓慢，对抗内分泌治疗敏感，具有雌激素依赖性。但约1/3患者的乳腺癌组织无ER表达，这些肿瘤分化差，生长分数高，临床预后不良，对抗内分泌治疗亦不敏感。因此，使ER重新表达并恢复内分泌治疗的敏感性就显得尤为重要。川芎为伞形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎，始载于《神农本草经》，其性温，味辛、微苦，具有活血行气、祛风止痛的功效。川芎主治血瘀气滞所致月经不调，痛经经闭，肝郁气滞而致血行不畅的胸胁疼痛，头痛，风寒湿痹，跌打肿痛等疾病。临床主要用于治疗心脑血管、呼吸、泌尿系统及妇科方面的疾病。当归(Angelicasinensis(Oliv.)Diels)是伞形科当归属的一种多年生草本植物。其干燥的贮藏根是我国一味常用的中药材，药用历史悠久，历代本草均有记载，有补血、和血、调经止血、润肠滑肠之功效，为医家常用，素有“十方九归”之称。藁本内酯是一种广泛存在于当归、川芎等多种植物中的苯酞类化合物，以挥发油形式存在，具有较强的药理作用，是一个极具开发价值的化合物，也是目前评价当归、川芎等药材及制剂质量的重要依据之一。藁本内酯1960年由Mitsuhashi首次从伞形科藁本属植物Ligusticumacutilobum中分离出来，并命名为ligustilide，其是具淡黄色带香味的油状液体，沸点为168-169℃，可溶于乙醇、甲醇、乙醚、乙酸乙酯、石油醚等有机溶剂，分子式为C12H14O2，相对分子质量为190.24。藁本内酯结构中有环外双键，可分为顺反两种异构体，即(Z)-ligustilide和(E)-ligustilide，由于Z型结构为空间优势构象，比E型更稳定，因而Z型藁本内酯在中药材中含量为E型的10倍左右。现有研究报道表明藁本内酯对心脑血管、循环系统及免疫功能等均有较强的药理作用，但这些研究一般使用当归油或川芎油等含藁本内酯的混合物，而对藁本内酯的药理研究不够深入和细致，并且藁本内酯在乳腺癌方面的药理活性研究较少。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供藁本内酯在防治乳腺癌中的应用，本专利技术的研究表明藁本内酯不仅能够直接对乳腺癌细胞起到抑制作用，还能够辅助现有成熟抗乳腺癌药物起到更好的疗效。本专利技术采取的技术方案如下：1、藁本内酯在制备预防或治疗乳腺癌药物中的用途。2、藁本内酯作为已上市防治乳腺癌药物的促进剂的用途。优选的，所述藁本内酯为顺式藁本内酯。优选的，藁本内酯作为雌激素受体α蛋白的表达促进剂起作用。优选的，所述成熟乳腺癌药物为他莫昔芬。3、藁本内酯在制备提高雌激素受体α蛋白表达的试剂或药物中的用途。4、藁本内酯在制备提高雌激素受体α不表达或表达较低的乳腺癌细胞中雌激素受体α蛋白表达的试剂或药物中的用途。优选的，所述乳腺癌细胞为MDA-MB-231细胞。5、藁本内酯结构类似物在制备预防或治疗乳腺癌药物中的用途。优选的，所述藁本内酯结构类似物为洋川芎内酯A、洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、新蛇床内酯、正丁基苯肽、丁烯基苯酞、欧当归内酯A中的一种。本专利技术的有益效果在于：藁本内酯对雌激素受体α阴性和阳性乳腺癌细胞均具有一定抑制作用。另外，现有的上市抗乳腺癌药物他莫昔芬等主要对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞起作用，对于雌激素受体α阴性乳腺癌细胞的作用收效甚微，而本专利技术的研究表明，藁本内酯能够使乳腺癌细胞的ERα蛋白表达上调，进而与他莫昔芬协同起到防治乳腺癌的作用。初步研究藁本内酯上调ERα表达的可能机制为藁本内酯能够改变ERα启动子的表观遗传修饰，一方面降低MTA1、HDAC家族相关蛋白表达，另一方面阻遏MTA1招募HDAC家族蛋白所组成复合物在ERα启动子上的结合，最终提高其转录活性。附图说明为了使本专利技术的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本专利技术提供如下附图：图1藁本内酯与他莫昔芬协同作用效果；图2洋川芎内酯A与他莫昔芬合用效果；图3藁本内酯上调ERα蛋白表达结果；图4洋川芎内酯A上调ERα蛋白表达结果；图5转染siER后检测藁本内酯与他莫昔芬的协同效果；图6藁本内酯与他莫昔芬协同作用对乳腺癌细胞凋亡的影响，合用组浓度为ZLIG50μM+TAM5μM)。具体实施方式下面对本专利技术的优选实施例进行详细的描述。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。本专利技术所用藁本内酯为顺式结构，分子式为C12H14O2，相对分子质量为190.24，Z型结构式为购于成都成都普思生物科技公司，产品货号CHB-G-020，CAS号4431-01-0。本专利技术所述他莫昔芬购自Sigma公司，产品编号T5648，CAS号10540-29-1。本专利技术所涉及的肿瘤细胞主要是指雌激素受体α不表达或表达较低的乳腺癌细胞，即本专利技术体内外实验中所指的雌激素受体α阴性乳腺癌细胞，如：MDA-MB-231细胞；反之则为雌激素受体α阳性乳腺癌细胞。实施例1藁本内酯与他莫昔芬的协同效果实验采用MDA-MB-231细胞，藁本内酯浓度设定为0、10、25、50μmol/L，藁本内酯预处理12h后，再分别与1、2.5、5μmol/L他莫昔芬共同孵育72h，用磺酰罗丹明B染色法(SRB)获得实验结果，结果如图1所示，单独的藁本内酯与他莫昔芬几乎无作用，但协同使用后随着浓度的逐渐升高，抑制率逐渐增加。实施例2洋川芎内酯A与他莫昔芬的协同效果实验采用MDA-MB-231细胞，将洋川芎内酯A浓度依次由低高到设置为0、50、100、150本文档来自技高网...

【技术保护点】
藁本内酯在制备预防或治疗乳腺癌药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.藁本内酯在制备预防或治疗乳腺癌药物中的用途。
2.藁本内酯作为已上市防治乳腺癌药物的促进剂的用途。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述藁本内酯为顺式藁本内酯。
4.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，藁本内酯作为雌激素受体α蛋白的表
达促进剂起作用。
5.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述成熟乳腺癌药物为他莫昔芬。
6.藁本内酯在制备提高雌激素受...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐红艺，马辉，李莉，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50