一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂及其制备方法。该发酵粉剂制作过程为将地衣芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌种子液按比例接种到液体培养基进行共培养发酵，将发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石按比例混合，自然晾干得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂。本发明专利技术可应用于畜禽粪便的堆肥发酵，通过经微切助互作技术处理过的沸石的吸附富集作用及两株细菌协同作用抑制氨气的挥发从而达到保氮的目的。

Compost fermentation powder with nitrogen retention function and preparation method thereof

The invention discloses a compost fermentation powder with nitrogen retention function and a preparation method thereof. The powder production process for fermentation of Bacillus licheniformis and Bacillus megaterium seed liquid medium fermentation liquid were cultured according to the proportion of inoculation, the fermentation liquid and the micro cutting aid interaction technology zeolite treated by mixture of natural dry compost fermentation by powder with nitrogen protecting function. The invention can be applied to the composting of livestock and poultry manure, and the adsorption and enrichment of the zeolite treated by the micro cutting interaction technique and the synergistic action of two strains of bacteria can inhibit the volatilization of ammonia so as to achieve the purpose of nitrogen protection.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂及其制备方法，属于农业生物

技术介绍
近年来，我国养殖业发展迅速，畜禽养殖数量剧增。养殖业迅速发展，但其“畜产公害”也日益凸显。畜禽养殖业废弃物带来的污染也越来越受到大家的重视。目前畜禽粪便的处理方式主要有焚烧法、粪便饲料化、沼气发酵法和堆肥法。堆肥处理养殖业畜禽粪便具有操作简便、投资少、运行费用低、处理效率高等优点，因此逐渐成为畜禽粪便处理手段中的主流方式。它不仅能够对畜禽粪便进行资源化、减量化、无害化处理，而且堆肥过程能够灭活畜禽粪便中的病原微生物、寄生虫卵、杂草种子等。堆肥法处理畜禽粪便作为一种经济型和环境友好型的处理手段，日益受到人们的关注。传统的堆肥具有升温慢，周期长，发酵不彻底，并且氮元素的损失较为严重。本专利为具有保氮功能的堆肥发酵粉剂，不仅兼具了传统堆肥菌剂快速提升堆肥发酵温度，缩短发酵周期，并且大大降低了堆肥过程中氮元素的损失。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂及其制备方法为了达到上述专利技术目的，本专利技术的技术方案是：一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂，地衣芽孢杆菌(Baclicuslincheniformis)ABTNL-1和巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)种子液接种到液体培养基进行共培养发酵，将发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石混合，自然晾干得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂。所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液，制备步骤包括：1)平板培养复壮：地衣芽孢杆菌ABTNL-1ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌保分别采用划线接种的方法在牛肉膏蛋白胨培养基上划线接种，于37℃培养24～36h，使其复壮，并形成单菌落；所述的牛肉膏蛋白胨平板培养基为按下述比例配制的混合物：牛肉膏3～5g，蛋白胨4～5g，氯化钠8～10g，琼脂15～20g，pH7.0～7.2，水1000mL，灭菌15分钟，冷却备用；2)制作摇瓶种子液：从步骤1)复壮的地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌落中分别挑单菌落，接种到牛肉膏蛋白胨菌液体培养基中，分别于37℃培养18小时和24小时，得到摇瓶种子液。所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌共培养发酵液制备步骤包括：制备培养基：按下述比例配制的混合物：甘蔗糖蜜3-6％、蛋白胨1-2％、淀粉3-5％、氯化钠1-2％剩余加满蒸馏水；调整pH保持在7.0-7.2；灭菌15分钟，冷却备用。优选的，所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液接种到共培养发酵液中的比例为1:1。所述经微切助互作技术处理过的沸石制备过程如下：1)预处理市场购买沸石粉，粗粉碎至40～60目；2)将经1)处理过的沸石置于搅拌机中利用高能振动磨产生的微剪切作用对其进行处理，处理时间为25分钟，得到600～800目的微切超微沸石粉原料。优选的发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石混合比例为0.75:1。所述一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂及其制备方法，其特征在于自然晾干得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂含水量低于10％，微生物数量级≥1×108。使用方法：本产品按重量比(1-2)：100的比例均匀撒在粪便表层，优选比例为1.5:100；三天后翻堆混匀，堆制成宽度1米,高0.5米条跺，之后翻堆频率采用“温到不等时，时到不等温”原则，即发酵物中心温度超过60℃立即翻堆，每隔三天翻一次堆。发酵过程堆体水分控制在40-55％左右，直至发酵体温度趋于室温，堆体完全无味即为发酵结束。与现有技术相比，本专利技术的优势和积极效果为：1经微切后的沸石具有强大氨气吸附能力，可以将氨气分子富集在沸石颗粒周围，快减少了氨气的挥发。2本专利技术从堆肥中筛选得到的两株芽孢杆菌地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌本身具有协同作用，互不抵抗，能够快速的提升堆肥的温度。3三株细菌具有强大的有机物分解能力不仅能减少了氨气的生成并且减少了氮元素以离子的形式流失。保藏说明本专利技术涉及的生物材料样品的保藏信息：参据的微生物(株)为ABTNL-1，分类命名为地衣芽孢杆菌ABTNL-1(Bacilluslicheniformis)，于2014年11月21日由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)保藏，保藏编号CGMCCNO.10037。CGMCC地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。具体实施方式实施例1：1地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌活化培养基：地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌活化培养基包括以下组分：牛肉膏4g，蛋白胨5g，氯化钠9g，琼脂18g，补足水至1000mL。活化培养基制作方法，将上述各组分混匀并调节pH到7.0-7.2，，灭菌15分钟，冷却至70-80℃倒平板，每只平板倒入量约15ml，冷却30分钟。将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌保取出，在37℃水浴中快速解冻，采用平板划线的方式接种上述各菌，培养24-36小时，使菌种复壮。2地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液制备：牛肉膏4g，蛋白胨5g，氯化钠9g蒸馏水1000mL,上述材料充分搅拌溶解后，调整pH至7.0-7.2，120℃灭菌15分钟；分装于无菌试管中，在无菌工作台中分别接入复壮的地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌，放入37℃摇床分别培养18h和24h,即得到地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液。3地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌共培养发酵甘蔗糖蜜250g,蛋白胨100g,淀粉200g,氯化钠100g,蒸馏水5000mL,上述材料充分搅拌溶解后，调整pH至7.0-7.2，120℃灭菌15分钟；冷却至40℃以下按以下比例接入地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液地衣芽孢杆菌ABTNL-1种子液1mL,巨大芽孢杆菌种子液1mL,放入已经灭菌处理的发酵罐中，以好氧发酵方式发酵5天，pH保持在7.0-7.2，即完成发酵。4经微切助互作技术处理过的沸石制备：1)预处理市场购买沸石粉，粗粉碎至40～60目；2)将经1)处理过的沸石置于搅拌机中利用高能振动磨产生的微剪切作用对其进行处理，处理时间为25分钟，得到600～800目的微切超微沸石粉原料，备用。5具有保氮功能的堆肥发酵粉剂的制备：将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌共培养发酵完成后的发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石0.75:1的比例充分混合，置于24-35℃的阴凉处自然晾干，期间每隔六小时翻动一次。当水分含量低于10％即得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂。实施例2：1地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌活化培养基：地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌活化培养基包括以下组分：牛肉膏3g，蛋白胨4g，氯化钠8g，琼脂18g，补足水至1000mL.活化培养基制作方法，将上述各组分混匀并调节pH到7.0-7.2，，灭菌15分钟，冷却至70-80℃倒平板，每只平板倒入量约15ml，冷却30分钟。将地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌保取出，在37℃水浴中快速解冻，采用平板划线的方式接种上述各菌，培养24-36小时，使菌种复壮。2地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液制备：牛肉膏3g，蛋白胨4g，氯化钠8g蒸馏水100本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂，其特征在于：地衣芽孢杆菌ABTNL‑1和巨大芽孢杆菌种子液接种到液体培养基进行共培养发酵，将发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石按比例混合，自然晾干得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂；所述地衣芽孢杆菌ABTNL‑1保藏编号：CGMCC NO.10037。

【技术特征摘要】
1.一种具有保氮功能的堆肥发酵粉剂，其特征在于：地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液接种到液体培养基进行共培养发酵，将发酵液与经微切助互作技术处理过的沸石按比例混合，自然晾干得到具有保氮功能的堆肥发酵粉剂；所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1保藏编号：CGMCCNO.10037。2.一种制备权利要求1所述具有保氮功能的堆肥发酵粉剂的方法，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌种子液，制备步骤包括：1)平板培养复壮：地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌保分别采用划线接种的方法在牛肉膏蛋白胨培养基上划线接种，于37℃培养24～36h，使其复壮，并形成单菌落；所述的牛肉膏蛋白胨平板培养基为按下述比例配制的混合物：牛肉膏3～5g，蛋白胨4～5g，氯化钠8～10g，琼脂15～20g，pH7.0～7.2，水1000mL，灭菌15分钟，冷却备用；2)制作摇瓶种子液：从步骤1)复壮的地衣芽孢杆菌ABTNL-1和巨大芽孢杆菌菌落中分别挑单菌落，接种到牛肉膏蛋白胨菌液体培养基中，分别于37℃培养18小时和24小时，得到摇瓶种子液。3.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李淑英，徐牧，张楠，
申请(专利权)人：大连赛姆生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21