一种eTLC-SERS方法技术

本发明专利技术涉及分析检测领域，具体是一种增强薄层色谱‑表面增强拉曼光谱(eTLC‑SERS)分析方法，包括以下步骤：eTLC平台的搭建；样品溶液、HCL溶液的制备；原位检测eTLC平台的SERS活性；eTLC展开过程；采集拉曼光谱。本发明专利技术目的在于提供一种集SERS增强与薄层色谱分离于一体的新型分析方法，检测时无需添加SERS活性基底，消除了传统方法中“咖啡环效应”的影响，降低了检测误差，显著地提高了检测灵敏度，并简化了操作步骤。同时，对于那些分离后无法对斑点进行定位的化合物，可采用eTLC‑SERS方法使用逐点扫描的方式进行检测，与传统方法相比，eTLC‑SERS方法的应用范围更大，应用前景更广。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分析检测
，具体地说，是一种集SERS增强与TLC分离于一体的—新型eTLC-SERS分析方法。
技术介绍
薄层色谱-表面增强拉曼光谱联用技术(TLC-SERS)，利用TLC实现复杂体系的简单分离，再利用SERS实现待检成分的定性、定量鉴别，两种方法相补充，简便、专属性强，近年来受到人们的极大关注。传统TLC-SERS联用技术的分析步骤如下：首先，将待测物TLC分离后，加入增强基底(如金胶、银胶等)，然后置于拉曼仪器下检测。目前使用的增强基底，多为金属类基底，其稳定性较差、灵敏度低且不易保存。而且，对于那些与金属亲和力较差的分析物的检测，传统方法具有一定的局限性。此外，传统方法，增强基底滴在薄层板上，存在“咖啡环效应”(“咖啡环效应”是由液滴内部毛细流动和马拉哥尼流动而产生的，导致纳米粒子在薄层板上分布不均的现象)，导致信号强度不均，RSD(相对标准偏差)大，使检测结果的可信度遭到质疑。以上种种原因，使该技术的应用受到限制。为了解决以上问题，进一步促进TLC-SERS联用技术在分析领域的发展。现有技术提出了一种将SERS增强与TLC分离整合为一体的理念。如果，像传统TLC-SERS技术，TLC过程后，必须通过增强基底才能产生SERS效应，然而增强基底保存时容易变质，如果每次检测都需要制备基底，检测就会费时且繁琐。而且，TLC过程后，再加增强基底，“咖啡环效应”是无法避免的。而，如果，TLC过程后，无需通过增强基底就可以产生SERS效应，那么就不存在“咖啡环效应”的干扰，也没有制备基底的繁琐步骤。传统的TLC-SERS方法，对于那些分离后无法对斑点进行定位的化合物是无法检测的。基于SERS增强与TLC分离一体化理论的优点，现有技术中公开制备SERS增强与TLC分离一体化平台的方法，如H.Takei等构建了双层检测平台，下层修饰上金属纳米粒子，用以SERS增强，上层铺上一层硅胶材料，用以TLC分离，得到集SERS增强与TLC分离为一体的检测技术。(H.Takei,J.Saito,K.Kato,H.Vieker,A.BeyerandA.GTLC-SERSPlateswithaBuilt-InSERSLayerConsistingofCap-ShapedNobleMetalNanoparticlesIntendedforEnvironmentalMonitoringandFoodSafetyAssurance,JournalofNanomaterialsVolume2015,ArticleID316189,9pages)。然而，这种双层检测平台，其分离层，在TLC过程中，很多分析物残留在上层的分离层，无法渗透到下层的SERS增强层，检测的灵敏度较差。为了得到更好的检测方法，J.Chen等利用三角沉积技术将银纳米棒沉积于玻璃板上，得到集SERS增强与TLC分离于一体的检测平台。(J.Chen,Y.-W.HuangandY.P.Zhao,Detectionofpolycyclicaromatichydrocarbonsfromcookingoilusingultra-thinlayerchromatographyandsurfaceenhancedRamanspectroscopy,J.Mater.Chem.B,2015,3,1898–1906)但是，这种方法所采用的基底材料是银纳米棒，银不是绝对惰性的材料，可能会和部分待测物或流动相发生反应。有报道称，MOFs(金属有机骨架材料)具有多孔拓扑结构、超高的比表面积及内外可修饰的特性，被广泛用于SERS增强、液相色谱、气相色谱固定相等。然而，利用MOFs材料的多种特性，来改善传统TLC-SERS联用技术的不足的报道，到目前为止，还没有看到。
技术实现思路
本专利技术是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种集SERS增强与TLC分离于一体的新型分析方法，是一种新型增强薄层色谱-表面增强拉曼光谱(Surfaceenhancedthinlayerchromatography-Ramanspectroscopy，简称eTLC-SERS)方法，主要由两个重要部分组成：eTLC检测平台和便携式拉曼光谱仪。本专利技术开发的eTLC-SERS方法提高了检测灵敏度，消除了传统方法中“咖啡环效应”的影响，降低了检测误差，简化了操作步骤，扩宽的应用范围，显出地提高了检测效率。同时，对于那些分离后无法对斑点进行定位的化合物，可采用eTLC-SERS方法使用逐点扫描的方式进行检测。eTLC-SERS方法，集SERS增强与TLC分离一体化，可以消除繁琐的步骤，降低RSD，提高检测结果的可信度，同时其可适用于所有拉曼可测的化合物，大大扩展了传统方法的应用范围。为了实现上述目的，采用了以下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种eTLC-SERS方法，作为一种新型分析技术，包括以下步骤：步骤一，eTLC平台的搭建：制备AuNPS/MIL-101基底，将其与传统薄层用硅胶混合，加入粘合剂CMC-Na，搅拌混合后，超声处理，得到均一匀浆后，将其涂布于干净的玻璃板上，室温下，放置过夜，即制得eTLC平台；使用前，置于烘箱中，110℃干燥30min，冷却，密闭保存，备用；步骤二，样品溶液、润湿剂溶液的制备：制备待测样品溶液备用；配置浓度为10-3mol/L-10-1mol/L(优选10-2mol/L)的盐酸溶液作为润湿剂备用；步骤三，原位检测eTLC平台的SERS活性：将拉曼探针分子(如：罗丹明6G、结晶紫、对巯基苯胺等)制备成溶液，点样于eTLC平台上，将其置于便携式拉曼光谱仪下，滴加润湿剂(5-10ul)，以激光功率为60mw～100mw，照射时间为3s～10s，对样品斑点进行检测，并记录所得拉曼光谱；步骤四，薄层展开过程：将待测样品溶液点样于eTLC平台上，待斑点完全干燥后；放入展开缸中，利用展开剂进行展开，展开结束，取出将展开剂挥干；所述的展开剂为：乙酸乙酯：乙醇：水＝8:2:1(体积比)；步骤五，采集拉曼光谱：将展开后的eTLC平台，置于便携式拉曼光谱仪下，滴加盐酸溶液(5-10ul)作为润湿剂后，以激光功率为60mw～100mw，照射时间为3s～10s，从原点处前10mm开始扫描，直至溶剂前沿后10mm处，记录扫描所得拉曼光谱；步骤六：对待测样品溶液组分进行确定：将步骤五中所得拉曼光谱与标准拉曼图谱库进行比对，确定待测样品溶液的组成。优选的，步骤一中所述的AuNPS/MIL-101基底与传统薄层用硅胶的混合比例为1:1，w/w。优选的，步骤一中所述的粘合剂CMC-Na的浓度为0.3％-1％，w/v。优选的，步骤一中所述的超声的时间为30-60min。优选的，步骤一中所述的eTLC平台的厚度为200-300um。优选的，步骤三和步骤五中所述的便携式拉曼光谱仪的激发波长785nm。本专利技术优点在于：1、本专利技术的新型eTLC-SERS方法的研发，该技术中的eTLC平台是一个集SERS增强与TLC分离于一体的检测平台，其由传统硅胶和NPs@MOF复合材料共同组成。NPs@MOF复合材料的存在，使eTLC平台成为具有SERS活性的检测平台。同时，由于MOFs材料和硅胶材料本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种eTLC‑SERS方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，eTLC平台的搭建：制备AuNPS/MIL‑101基底，将其与传统薄层用硅胶以1:1的质量比混合，加入粘合剂CMC‑Na，搅拌混合后，超声处理，得到均一匀浆后，将其涂布于干净的玻璃板上，室温下，放置过夜，即制得eTLC平台；使用前，置于烘箱中，110℃干燥30min，冷却，密闭保存，备用；步骤二，样品溶液、润湿剂溶液的制备：制备待测样品溶液备用；配置浓度为10‑3mol/L‑10‑1mol/L的盐酸溶液作为润湿剂备用；步骤三，原位检测eTLC平台的SERS活性：将拉曼探针分子制备成溶液点样于eTLC平台上，将其置于便携式拉曼光谱仪下，滴加润湿剂，以激光功率为60mw～100mw，照射时间为3s～10s，对样品斑点进行检测，并记录所得拉曼光谱；步骤四，薄层展开过程：将待测样品溶液点样于eTLC平台上，待斑点完全干燥后；放入展开缸中，利用展开剂进行展开，展开结束，取出将展开剂挥干；所述的展开剂为：乙酸乙酯：乙醇：水为8:2:1，v/v；步骤五，采集拉曼光谱：将展开后的eTLC平台，置于便携式拉曼光谱仪下，滴加润湿剂后，以激光功率为60mw～100mw，照射时间为3s～10s，从原点处前10mm开始扫描，直至溶剂前沿后10mm处，记录扫描所得拉曼光谱；步骤六：对待测样品溶液组分进行确定：将步骤五中所得拉曼光谱与标准拉曼图谱库进行比对，确定待测样品溶液的组成。...

【技术特征摘要】
1.一种eTLC-SERS方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，eTLC平台的搭建：制备AuNPS/MIL-101基底，将其与传统薄层用硅胶以1:1的质量比混合，加入粘合剂CMC-Na，搅拌混合后，超声处理，得到均一匀浆后，将其涂布于干净的玻璃板上，室温下，放置过夜，即制得eTLC平台；使用前，置于烘箱中，110℃干燥30min，冷却，密闭保存，备用；步骤二，样品溶液、润湿剂溶液的制备：制备待测样品溶液备用；配置浓度为10-3mol/L-10-1mol/L的盐酸溶液作为润湿剂备用；步骤三，原位检测eTLC平台的SERS活性：将拉曼探针分子制备成溶液点样于eTLC平台上，将其置于便携式拉曼光谱仪下，滴加润湿剂，以激光功率为60mw～100mw，照射时间为3s～10s，对样品斑点进行检测，并记录所得拉曼光谱；步骤四，薄层展开过程：将待测样品溶液点样于eTLC平台上，待斑点完全干燥后；放入展开缸中，利用展开剂进行展开，展开结束，取出将展开剂挥干；所述的展开剂为：乙酸乙酯：乙醇：水为8:2:1，v/v；步骤五，采集拉曼光谱：将展开后的eTLC平台，置于便携式拉曼光谱仪下，滴加润湿剂后，以激光功率为60mw～...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆峰，张彬彬，柴逸峰，史毅，柳艳，陈辉，李皓，武媚然，吴棉棉，陈秀娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海;31