采用LLP2A-二膦酸盐/酯偶联物和间充质干细胞治疗炎症制造技术

本发明专利技术提供治疗具有原发性炎性疾病或紊乱的对象的方法，所述方法包括：给予所述对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物，其中该包含LLP2A-二膦酸盐/酯偶联物的组合物提高间充质干细胞向炎症位置的递送。还提供用于增强间充质干细胞的抗炎性或免疫调节性质的方法，所述方法包括：给予有此需求的对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物和所述间充质干细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请要求2013年10月4日提交的美国临时申请号61/887,275的优先权，其全文通过引用纳入本文用于所有目的。对于联邦资助下研发所得专利技术的权利的声明本专利技术是在政府支持下由国家卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)授予的基金号AR043052、AR057515和AR061366的资助完成。政府享有本专利技术的一定权利。专利技术背景类风湿性关节炎(RA)会导致关节肿胀和疼痛，长时间会导致关节功能损伤。两百万美国人患有RA。RA炎症的全身与局部作用会导致显著的全身与局部骨损失和软骨破坏，这归因于细胞因子的活化，例如肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)，其提高破骨细胞活性(Huizinga和Pincus，Ann.Intern.Med.，2010，153:ITC1-1-ITC1-15；Scott等，Lancet，2010，376:1094-1108)并抑制骨生成。TNFα通过诱导表达NF-κB配体的受体-活化剂(RANKL)来刺激骨诱裂发生和软骨损失，并且使破骨细胞前提对RANKL(McInnes和Schett，N.Engl.J.Med.，2011，365:2205-2219)和使软骨降解的酶敏化。此外，TNFα通过称为Smad泛素调节因子1(Smurf1)的酶影响成骨细胞，该酶进而下调对于骨形成而言极其重要的两种其它蛋白质，Smad1和r>Runx2(Guo等，J.Biol.Chem.，2008，283:23084-23092)。与RA相关联的骨损失因糖皮质激素(GC)的应用而进一步严重化，糖皮质激素仍频繁用于RA治疗(Lane和Yao，Ann.N.Y.Acad.Sci.，2010,1192:81-83；Lane等，J.BoneMiner.Res.,2006,21:466-76)。然而，GC的应用造成快速骨损失，其导致高发骨折事件的风险。尽管传统RA药物如NSAID和GC能够治疗症状，并且新兴种类的TNFα阻断剂(休米拉(Humira)、英利昔(Remicade)和依坦西普(Enbrel))能逆转疾病进程，但该种类的药物基于生物改造形式的蛋白质，并且生产成本昂贵(Chimenti等，Autoimmun.Rev.,2011,10:636-40lMarotte和Miossec,Biologics,2008,2:663-9；Caramaschi等,Rheumatol.Iint.,2006,26:209-14)。针对RA的传统的药物疗法(包括TNFα阻断剂)主要靶向炎症，并且降低骨吸收；然而，采用生物制剂(TNF、IL-6和B细胞消耗疗法，以及JAK抑制剂)的RA患者中有接近40％的疼痛和关节炎症未见显著缓解，导致持续的骨与软骨破坏。骨髓中的间充质干细胞(MSC)具有多谱系潜能，并且代表着间充质源性细胞类型(包括成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞)的前体的混合物(Owen，M.等，CibaFoundSymp，1988，136:第42-60页；Bruder,S.P.等,JCellBiochem,1994,56(3):第283-94页；Prockop,D.J.,Science,1997,276(5309):第71-4页)。处于各成熟阶段的骨细胞极其依赖于细胞基质和细胞-细胞相互作用(Mukherjee，S.等，JClinInvest，2008，118(2):第491-504页；Grzesik,W.J.和P.G.Robey,JBoneMinerRes,1994,9(4):第487-96页；Vukicevic,S.等,Cell,1990,63(2):第437-45页；Mbalaviele,G.等,JBoneMinerRes,2006,21(12):第1821-7页)。MSC表达整合素α1、2、3、4、6、11、CD51(整合素αV)和CD29(整合素β1)(Brooke,G.等，StemCellDev，2008).据报道，整合素α1β1、α2β1、αvβ1、αvβ5、α5β1和α4β1在成骨细胞中表达(Grzesik，W.J.和Robey，P.G.，JBoneMinerRes，1994，9(4):第487-96页；Gronthos,S.等,Bone,2001,28(2):第174-81页；Gronthos,S.等,JBoneMinerRes,1997.12(8):第1189-97页；Cowles,E.A.,L.L.Brailey和G.A.Gronowicz,JBiomedMaterRes,2000,52(4):第725-37页)。已报道，α4整合素在MSC上的过表达会增强MSC向骨寻靶(Mukherjee，S.等，JClinInvest，2008，118(2):第491-504页)。间充质干细胞还表达大量的趋化因子和细胞因子受体，并且能够抗击局部组织中的炎症。趋化因子和细胞因子在炎症过程中释放，并且发动炎性响应。这些相同的信号转导分子能够促进MSC通过MSC表面上的CXCR4受体或整合素β1寻靶(例如，迁移)炎性位点。此外，MSC能够通过信号转导将树突细胞靶向至抗炎性T细胞应答或通过抑制天然杀伤细胞功能来调节先天性免疫应答。MSC还通过与CD4+T细胞的活化的直接相互作用来发挥免疫调节作用以影响适应性免疫应答。已显示全身MSC移植会诱导抗炎作用。然而，MSC在进入发炎组织方面趋于低效。RA或炎性关节炎的医药方面仍需要用于预防和/或治疗关节炎症以及与炎性疾病相关联的免疫调节的组合物和方法。出乎意料的是，本专利技术满足了这些及其他需求。
技术实现思路
一方面中，本专利技术涉及用于减少关节炎(例如，类风湿性关节炎或炎性关节炎)疼痛的一种或多种迹象或症状的方法。在一些实施方式中，所述方法包括：给予具有关节炎(例如，类风湿性关节炎或炎性关节炎)的对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯(bisphosphonate)药物的偶联物的组合物。在一些实施方式中，所述组合物包含LLP2A和阿伦膦酸盐的偶联物(\LLP2A-Ale\)。在一些实施方式中，所述方法还包括给予外源性间充质干细胞。在另一方面，本专利技术涉及用于减少、缓解或抑制由关节炎(例如，类风湿性关节炎或炎性关节炎)中的炎症所致的软骨和骨破坏的方法。在一些实施方式中，所述方法包括：给予具有关节炎(例如，类风湿性关节炎或炎性关节炎)的对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物。在一些实施方式中，所述组合物包含LLP2A和阿伦膦酸盐的偶联物(\LL本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗具有原发性炎性疾病或紊乱的对象的方法，所述原发性炎性疾病或紊乱选自：关节炎、炎性关节炎、类风湿性关节炎、滑膜炎、青少年类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病性关节炎、脊椎关节炎和骨关节炎，所述方法包括：给予所述对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物，其中，包含所述偶联物的组合物能提高间充质干细胞向炎症位置的递送。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.10.04 US 61/887,2751.一种治疗具有原发性炎性疾病或紊乱的对象的方法，所述原发性炎性疾病
或紊乱选自：关节炎、炎性关节炎、类风湿性关节炎、滑膜炎、青少年类风湿性关
节炎、强直性脊柱炎、银屑病性关节炎、脊椎关节炎和骨关节炎，所述方法包括：
给予所述对象包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物，其中，
包含所述偶联物的组合物能提高间充质干细胞向炎症位置的递送。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物包含LLP2A和阿伦膦酸
盐的偶联物(\LLP2A-Ale\)。
3.如权利要求1或2所述的方法，其还包括给予外源性间充质干细胞。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，依次给予所述组合物和所述间充质
干细胞。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，同时给予所述组合物和所述间充质
干细胞。
6.如权利要求3-5中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所述间充
质干细胞之一或两者在炎症位置局部给予。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，所述炎症位置是关节。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所述间充
质干细胞之一或两者通过注射给予。
9.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，全身给予所述组合物和
所述间充质干细胞之一或两者。
10.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，静脉内给予所述组
合物和所述间充质干细胞之一或两者。
11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所述
间充质干细胞之一或两者以亚治疗剂量给予。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其特征在于，所述对象患有类风
湿性关节炎或滑膜炎。
13.一种减少有需要的对象中的炎症的方法，所述方法包括：共同给予所述
对象(a)包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物，和(b)间充质
干细胞，其中，包含所述偶联物的组合物能提高所述间充质干细胞向所述炎症位置

\t的递送。
14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，所述组合物包含LLP2A和阿伦
膦酸盐的偶联物(\LLP2A-Ale\)。
15.如权利要求13或14所述的方法，其特征在于，依次给予所述组合物和所
述间充质干细胞。
16.如权利要求13或14所述的方法，其特征在于，同时给予所述组合物和所
述间充质干细胞。
17.如权利要求13-16中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所
述间充质干细胞之一或两者在炎症位置局部给予。
18.如权利要17所述的方法，其特征在于，所述炎症位置是关节。
19.如权利要求13-18任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所述
间充质干细胞之一或两者通过注射给予。
20.如权利要求13-18中任一项所述的方法，其特征在于，全身给予所述组
合物和所述间充质干细胞之一或两者。
21.如权利要求13-18中任一项所述的方法，其特征在于，静脉内给予所述
组合物和所述间充质干细胞之一或两者。
22.如权利要求13-21中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所
述间充质干细胞之一或两者以亚治疗剂量给予。
23.如权利要求13-22中任一项所述的方法，其特征在于，给予的间充质干
细胞的量不多于单独给予时产生显著治疗效果的间充质干细胞的量的70％。
24.如权利要求13-23中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物和所
述间充质干细胞以数日或数周的时间间隔分开的系列剂量给予。
25.如权利要求13-24中任一项所述的方法，其特征在于，所述对象具有炎
性疾病或紊乱。
26.一种治疗具有炎性疾病或紊乱的患者的方法，所述方法包括：共同给予
该对象(a)包含LLP2A拟肽配体和二膦酸盐/酯药物的偶联物的组合物，和(b)间充
质干细胞，其中，给予的间充质干细胞的量是亚治疗剂量。
27.如权利要求26所述的方法，其特征在于，所述炎性疾病或紊乱选自：关
节炎、炎性关节炎、类风湿性关节炎、滑膜炎、青少年类风湿性关节炎、强直性脊
柱炎、银屑病性关节炎、脊椎关节炎和骨关节炎。
28.如权利要求27所述的方法，其特征在于，所述炎性疾病或紊乱是类风湿

\t性关节炎或滑膜炎。
29.如权利要求26-28中任一项所述的方法，其特征在于，所述组合物包含
LLP2A和阿伦膦酸盐的偶联...

【专利技术属性】
技术研发人员：N·E·莱恩，R·刘，W·姚，K·S·兰，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国;US