冰菜种子和茎段组织培养的方法技术

本发明专利技术一种冰菜种子和茎段组织培养的方法，涉及一种通过组织培养的技术再生的方法，特别是涉及一种用于冰菜的通过组织培养的技术再生的方法。其目的是为了提供一种冰菜种子和茎段组织培养的方法，本发明专利技术的冰菜种子组织培养的方法出芽率高、长势好，本发明专利技术的冰菜茎段组织培养的方法得到的冰菜株高和鲜重均显著高于常规方法。本发明专利技术的冰菜种子组织培养的方法包括：培养基的配制；种子的处理；接种、培养；本发明专利技术的冰菜茎段组织培养的方法包括：培养基的配制；接种材料的制备；接种、培养。本发明专利技术通过在培养基中加入盐溶液的培养方法，得到在较高含盐量(0.9％)的条件下生长良好的冰菜组培苗，并将其应用于耐盐生产。本发明专利技术用于冰菜种植领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种通过组织培养的技术再生的方法，特别是涉及一种用于冰菜的通过组织培养的技术再生的方法。
技术介绍
随着生物科学的发展和世界耕地及林地等盐渍化程度的日益加重，引进耐盐品种和提高植物耐盐性的研究越来越受到重视，冰菜汁液中含有一定的盐分，在盐碱地改良、食用等方面具有较高的应用价值。目前冰菜大规模生产中，培养基质中的含盐量不易控制，且采用常规的种子和茎段组织培养的方法进行培养，效果并不理想，或者是所得植株不够健壮，或者是长势不佳，培育出的冰菜口感也不好。
技术实现思路
本专利技术是为了解决的以上技术问题，而提供的一种冰菜种子和茎段组织培养的方法，本专利技术的冰菜种子组织培养的方法出芽率高、长势好，本专利技术的冰菜茎段组织培养的方法得到的冰菜株高和鲜重均显著高于常规方法。本专利技术通过在培养基中加入盐溶液的培养方法，得到在较高含盐量(0.9％)的条件下生长良好的冰菜组培苗，并将其应用于耐盐生产。本专利技术涉及一种冰菜种子组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4-5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，培养温度为25～30℃；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.9～1％。优选地，所述步骤三中，培养过程中冰菜种子出芽前为避光，出芽后光照强度为2000-3000Lx，光照周期12h/12h。优选地，所述步骤三中，接种量为每瓶6粒冰菜种子。本专利技术还涉及一种冰菜茎段组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、接种材料的制备：取冰菜种子接种于MS培养基中，培养42天，获得组培苗，从组培苗上切取长1～2cm的带叶片茎段，即为接种材料；三、接种、培养：取步骤二得到的接种材料置于步骤一制得的培养基上，培养温度为25～30℃，光照强度为2000-3000Lx；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.9～1％。优选地，所述步骤三中，光照周期12h/12h。优选地，所述步骤三中，接种量为每瓶2个接种材料。本专利技术的冰菜种子和茎段组织培养的方法与现有技术不同之处在于：1.本专利技术的冰菜种子培养的方法出芽率高、长势好，本专利技术的冰菜茎段组织培养的方法得到的冰菜株高和鲜重均显著高于常规方法。本专利技术通过在培养基中加入盐溶液的培养方法，得到在较高含盐量(0.9％)的条件下生长良好的冰菜组培苗，并将其应用于耐盐生产2.本专利技术的方法培养得到的冰菜带有大量冰晶，略带咸味；移栽后产量高。3.本专利技术的方法简单，易操作掌握，效果显著，具有很好的应用前景。具体实施方式通过以下实施例和验证试验对本专利技术的冰菜种子和茎段组织培养的方法作进一步的说明。实施例1本实施例的冰菜种子组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4-5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，接种量为每瓶6粒冰菜种子，培养温度为25℃，避光培养1天，冰菜种子出芽；然后调整光照强度为2000Lx，光照周期12h/12h，继续培养41天，得到大型冰晶状颗粒明显，生长健壮的冰菜组培苗；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.9％。实施例2本实施例的冰菜种子组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4-5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，接种量为每瓶6粒冰菜种子，培养温度为28℃，避光培养1天，冰菜种子出芽；然后调整光照强度为3000Lx，光照周期12h/12h，继续培养41天，得到大型冰晶状颗粒明显，生长健壮的冰菜幼苗；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为1％。实施例3本实施例的冰菜种子组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4-5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，接种量为每瓶6粒冰菜种子，培养温度为30℃，避光培养1天，冰菜种子出芽；然后调整光照强度为2500Lx，光照周期12h/12h，继续培养41天，得到大型冰晶状颗粒明显，生长健壮的冰菜组培苗；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.95％。对实施例1-3中得到的冰菜幼苗进行测定，所得结果如表1所示。接种7天后统计发芽率和死亡率，NaCl胁迫42d后，分别统计各个处理的株高(去掉根系从茎基部到生长点的长度)和鲜重(将植株去掉根系，称量鲜重)。出芽率(％)＝出芽株数/接种株数×100％成活率(％)＝成活株数/接种株数×100％株高＝总高度/接种株数，取各瓶平均数鲜重＝总的鲜重/接种株数，取各瓶平均数表1实施例1-3中所得幼苗的出芽率、成活率、株高和鲜重实施例4本实施例的冰菜茎段组织培养的方法，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入Na本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冰菜种子组织培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4‑5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，培养温度为25～30℃；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.9～1％。

【技术特征摘要】
1.一种冰菜种子组织培养的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：一、培养基的配制：调整MS培养基中蔗糖和琼脂的浓度，然后向MS培养基中加入NaCl，并调整pH值为5.8，得到冰菜培养基；二、种子的处理：将冰菜种子放入三角瓶中，加入40mL水和2滴吐温80(表面活性剂)，充分震荡(5min)；然后用水冲洗冰菜种子5遍，沥干水；在超净工作台中，用75％的酒精浸泡振荡30s，用无菌水冲洗1次；用10％的次氯酸钠溶液浸泡振荡15min后，用无菌水冲洗4-5次；取出冰菜种子放入带有无菌滤纸的培养皿中，吸干水分；三、接种、培养：取步骤二处理得到的冰菜种子置于步骤一制得的培养基上，培养温度为25～30℃；其中，步骤一的冰菜培养基中蔗糖的质量分数为2％；琼脂的质量分数为0.75％；NaCl的质量分数为0.9～1％。2.根据权利要求1所述的冰菜种子组织培养的方法，其特征在于：所述步骤三中，培养过程中冰菜种子出芽前为避光，出芽后光照强度为2000-3000Lx，光照周期12h...

【专利技术属性】
技术研发人员：荣海燕，潘淑芬，王坤，孙秀润，
申请(专利权)人：天津农学院，
类型：发明
国别省市：天津;12