本发明专利技术公开了一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光探针的合成和应用，该探针的结构式如(1)所示。本发明专利技术提供的检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光探针具有响应速度快(15s)、检测限低(48 nM)、高选择性、高灵敏性，适合裸眼检测、pH适用范围广等优点，可以用于活体细胞中检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子；该探针不受AcO‑,CO32‑,F‑,Cl‑,Br‑,HCO3‑,NO3‑,S2O32‑,HS‑,SO42‑,HPO42‑,H2PO4‑,PO43‑,SCN‑等阴离子的干扰，即使在有干扰离子存在的条件下，探针也对亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子有很好的响应，检测限低至48 nM，是一种极灵敏的检测系统，该探针能够用于活体细胞分析成像，使得该荧光分子探针在生物化学，环境科学等领域具有潜在的实际应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物化学
,具体涉及一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的合成和应用。
技术介绍
由于荧光探针的高选择性和灵敏性以及实时成像，荧光探针的使用作为优异的检测技术已经引起越来越多的关注，而且操作简单，灵敏度高，无毒和可视化的优点，荧光分子探针已成为在生命系统中可视化阴离子的强大工具，近年来在分析检测中应用非常广泛。亚硫酸盐已广泛应用于食品和饮料加工作为防腐剂，因为它们具有抑制微生物生长和防止变色的能力。然而，过量的亚硫酸盐可以诱导腹泻，低血压，过敏反应和哮喘等疾病。此外，在现代工业过程中大量释放二氧化硫气体，这导致严重的环境问题；而且二氧化硫可溶于水生成亚硫酸盐和亚硫酸氢盐，对人体有毒害作用。因此，应为检测痕量亚硫酸氢根离子开发更多的分析方法。到目前为止，已经开发了许多分析方法，包括电化学，色谱，吸收和荧光光谱来定量检测亚硫酸氢根离子或者亚硫酸根离子。其中，荧光探针由于其高选择性，低检测限和适合实时监测而被广泛应用于分析检测等领域。
技术实现思路
鉴于上述情况，本专利技术的目的在于提供一种选择性好，灵敏度高，响应速度快，荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的合成和应用。本专利技术的目的还在于提供一种制备方法简单、反应条件温、成本较低的上述荧光分子探针的合成方法。本专利技术解决问题采取的技术方案为，一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针，具有以下结构的化学分子结构通式：其中：R为甲基或者乙基。本专利技术使用的荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针，采用2-(4-甲酰基苯基)菲并咪唑和3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物在催化剂的存在下缩合而成。缩合而成的碳碳双键作为反应部位。本专利技术代表性的化合物的合成原理，当R为乙基时，其合成路线如上图所示，将3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物和2-(4-甲酰基苯基)菲并咪唑溶解在无水乙醇中，滴加催化量的哌啶，室温搅拌反应8小时。将反应液过滤，并用无水乙醇洗涤所得固体，真空干燥得所述的荧光分子探针。在本说明书的实施例中更详细地说明了该探针的合成和检测方法。本专利技术的荧光分子探针使用方法没有特殊限制，通常可以在室温下将探针分子溶解在乙醇和水溶液(4:6，v/v)中进行测试。当加入亚硫酸氢根离子或者亚硫酸根离子时，由于亚硫酸氢根离子或者亚硫酸根离子对碳碳双键的亲核加成，改变了探针分子的电子共轭情况，使其在紫外、荧光光谱上产生明显的变化，且伴随颜色通过肉眼可以观察到由红色到无色的变化。本专利技术的一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的具体特征如下：该分子荧光探针用二甲基亚砜(DMSO)溶解，探针分子在乙醇和水溶液(4:6，v/v)中时其最大紫外吸收波长在493nm。加入亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子后，探针分子在493nm的吸收峰逐渐下降，同时在319nm处的吸收峰的逐渐增强。相应地，溶液的颜色由红色变为无色，裸眼能够清楚的观察到颜色的明显变化。探针分子在乙醇和水溶液(4:6，v/v)中时其显示弱荧光，荧光光谱波长在450nm，当加入亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子后，探针分子荧光明显增强。在365nm荧光灯照射下，探针溶液加入亚硫酸氢盐或亚硫酸盐以后，肉眼观察到颜色由红色变成绿色。本专利技术所述的荧光探针分子灵敏度高，荧光性能稳定，合成步骤简单，产率高，选择性好，检测速度快，检测限低等优点；响应时间为15秒，检测限为48nM，并且适合裸眼检测，同时，该分子荧光探针不受AcO-,CO32-,F-,Cl-,Br-,HCO3-,NO3-,S2O32-,HS-,SO42-,HPO42-,H2PO4-,PO43-,SCN-等阴离子的干扰，即使在有干扰离子存在的条件下，探针也对亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子有很好的响应，使得该荧光分子探针在生物化学，环境科学等分析检测领域具有实际的应用价值。附图说明图1为本专利技术的荧光探针在乙醇和水溶液(4:6，v/v)体系中，紫外吸收光谱随亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子浓度增加的变化情况，横坐标为波长，纵坐标为吸光度。图2为本专利技术的荧光探针在乙醇和水溶液(4:6，v/v)体系中，荧光发射光谱随亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子浓度增加的变化情况，横坐标为波长，纵坐标为荧光强度。图3为本专利技术的荧光探针在乙醇和水溶液(4:6，v/v)体系中，荧光发射光谱随加入等浓度不同离子的变化情况，横坐标为探针分子及探针分子与不同的分析离子，纵坐标是在波长为450nm处的荧光强度。图4为本专利技术的荧光探针在乙醇和水溶液(4:6，v/v)体系中，荧光发射光谱随加入亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子与不同共存离子的变化情况，横坐标为探针分子探针和亚硫酸氢根离子及不同的共存离子，纵坐标是在波长为450nm处的荧光强度。图5为本专利技术的荧光探针的核磁共振氢谱。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做进一步的说明。本专利技术所述的荧光分子探针的合成路线如下图所示：实施例1：分子荧光探针1的制备3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物357mg(0.97mmol)和2-(4-甲酰基苯基)菲并咪唑300mg(0.93mmol)溶解在10ml无水乙醇中，滴加2-3滴的哌啶，室温搅拌反应8小时。然后将反应液过滤，并用无水乙醇洗涤所得固体，真空干燥得所述的荧光分子探针260mg(42%)。上述所得探针的核磁氢谱数据：1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,2H),8.62-8.65(d,J=16.4Hz,3H),8.54–8.46(m,5H),8.32-8.34(d,J=9.0Hz,1H),8.24-8.25(d,J=8.2Hz,1H),8.16-8.18(d,J=8.9Hz,1H),7.87–7.60(m,8H),4.90-4.95(q,J=7.3Hz,2H),2.09(s,6H),1.58(t,J=7.3Hz,3H)。实施例2：分子荧光探针1的制备3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物357mg(0.97mmol)和2-(4-甲酰基苯基)菲并咪唑300mg(0.93mmol)溶解在10ml无水乙醇中，滴加2-3滴的吡咯烷，室温搅拌反应8小时。然后将反应液过滤，并用无水乙醇洗涤所得固体，真空干燥得所述的荧光分子探针250mg(40%)。上述所得探针的核磁氢谱数据：1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,2H),8.62-8.65(d,J=16.4Hz,3H),8.54–8.46(m,5H),8.32-8.34(d,J=9.0Hz,1H),8.24-8.25(d,J=8.2Hz,1H),8.16-8.18(d,J=8.9Hz,1H),7.87–7.60(m,8H),4.90-4.95(q,J=7.3Hz,2H),2.09(s,6H),1.58(t,J=7.3Hz,3H)。实施例3：荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的应用。将该分子荧光探针溶于二甲基亚砜(DMSO)中，配置成1mmol/L的探针溶液；取探针溶液加入相应的乙醇和PBS本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针，其特征在于，所描述的荧光分子探针是具有以下的化学分子结构通式，如(1)所示；其中：R为甲基或者乙基。
【技术特征摘要】
1.一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针，其特征在于，所描述的荧光分子探针是具有以下的化学分子结构通式，如(1)所示；其中：R为甲基或者乙基。2.一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的合成,其特征在于，R为乙基或者甲基。3.如权利要求2所述一种荧光增强型快速检测亚硫酸氢根离子或亚硫酸根离子荧光分子探针的合成,其特征在于，它包括以下步骤：步骤1，合成3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物a.将1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚和碘乙烷混合溶于乙腈，在搅拌条件下，回流反应20个小时；b.将步骤a中的反应液冷却至室温，可以冷却到10℃左右，然后过滤，用乙醚洗涤所得固体，真空干燥，得产物3-乙基-1,1,2-三甲基-1H-苯并[e]吲哚-3-鎓碘化物。4.步骤2，2-(4-甲酰基苯基)菲并咪唑的合成。5..将对苯二甲醛，菲醌和乙酸铵溶解在乙酸中，在微波反应器中加热反应15分钟；...
【专利技术属性】
技术研发人员：尹鹏，喻婷，尹国兴，李海涛，张友玉，
申请(专利权)人：湖南师范大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43
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