【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种食品中砷对人体的生物有效性及毒性的联合评价模型。
技术介绍
砷是自然界中广泛存在的污染物,可以通过食物链对人体健康产生危害。食品安全性评价是预防人体砷中毒的重要保障。目前大部分评价方法是基于食品中砷积累来间接计算食品摄入砷对人体的生物学效应,该方法不能真实反映食品摄入砷对人体的生物效应。另外,采用动物实验也是对食物中砷的人体生物有效性的评价方法,但它的应用受到实验周期相对较长、个体差异大、实验费用较高的限制,因此,毒性评价时往往存在偏差。而人体实验可直接反映食物中砷摄入人体后的生物有效性及生物毒性,但在伦理道德和具体实施上存在很大困难。基于以上评价方法存在的问题以及在实际操作过程中的难度,急需建立相对操作方法简单、实验条件易于控制的评价食品中砷对人体生物有效性及毒性的方法。吸收过程是决定食品中砷对人体生物利用的关键因素之一。而小肠是食品中砷吸收的主要部位。来源于人的结肠癌细胞系的Caco-2单层细胞模型是目前被广泛应用于研究外源物质的生物膜通透性和跨膜转运机制的模型之一。该模型体系组成因素单一明确,且细胞结构、生化特性及功能与体内肠上皮细胞存在部分相似性,所以它可以用于食品中砷的吸收特性研究。但该模型缺少肝脏环境这一重要环节,从而与砷在人体内的吸收过程存在差异,并导致试验结果与砷实际生物有效性间存在差异。基于以上原因,本专利技术利用Caco-2细胞、QSG7701肝细胞建立食品中砷对人体的生物有效性及毒性的联合评价模型及方法。该培养模型能够提供与在体组织类似的微环境,发挥其对砷吸收转运代谢的生理功 ...
【技术保护点】
一食品中砷对人体的生物有效性及毒性的联合评价模型,其特征在于,包括Caco‑2细胞模型、QSG7701肝细胞模型以及由多孔膜分隔成顶侧室和基底侧室的容器,Caco‑2细胞培养在顶侧室中,QSG7701肝细胞培养在基底侧室中。
【技术特征摘要】
1.一食品中砷对人体的生物有效性及毒性的联合评价模型,其特征在于,包括Caco-2细
胞模型、QSG7701肝细胞模型以及由多孔膜分隔成顶侧室和基底侧室的容器,Caco-2细胞培
养在顶侧室中,QSG7701肝细胞培养在基底侧室中。
2.如权利要求1所述联合评价模型,其特征在于,所述顶侧室为Transwell插入式细胞
培养皿,基底侧室为细胞培养板,Transwell插入式细胞培养皿安装在细胞培养板的培养孔中。
3.如权利要求1所述联合评价模型,其特征在于,所述Caco-2细胞模型是细胞跨膜电
阻值大于等于550Ω·cm2的细胞单层。
4.如权利要求1所述联合评价模型的建立方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)Caco-2细胞培养
将Caco-2细胞培养在六孔板的Transwell插入式细胞培养皿;
(2)QSG7701肝细胞培养
将QSG7701肝细胞培养在另一块六孔培养板上;
(3)联合评价模型的建立;
将载有Caco-2细胞的Transwell插入式细胞培养皿置于培养QSG7701肝细胞的六孔板
之上,即可。
5.如权利要求4所述联合评价模型的建立方法,其特征在于,所述步骤(1)具体为:
a.取Caco-2细胞,复苏,将Caco-2细胞单独培养于25cm2培养瓶中,加入含胎牛血
清的DMEM培养液中培养,其中胎牛血清的体积分数为10%,按1:2传代进行传代培养,
b.将Transwell插入式细胞培养皿放入六孔培养板中,取传代好的Caco-2的细胞,将1.5mL
密度为3×105个/ml的Caco-2细胞液滴入Transwell插入式细胞培养皿中,同时,在基底侧
室加入2mL含胎牛血清的DMEM培养液,其中胎牛血清的体积分数为10%,然后置于
37℃、5%CO2的培养箱中培养,连续培养21天,期间每天更换基底侧室中的培养液,得载
有Caco-2细胞的Transwell插入式细胞培养皿。
6.如权利要求4所述联合评价模型的建立方法,其特征在于,所述步骤(2)具体为:
a.取QSG7701细胞,复苏,将QSG7701肝细胞单独培养于25cm2培养瓶中,加入含
胎牛血清的DMEM培养液,其中胎牛血清的体积分数为10%,按1:3传代培养,
b.取另一块六孔培养板,每孔加入2ml密...
【专利技术属性】
技术研发人员:韦燕燕,郑小曼,顾明华,黎晓峰,沈方科,
申请(专利权)人:广西大学,
类型:发明
国别省市:广西;45
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。